Immuunivaste SARS-CoV-2/COVID-19-rokotteelle sarkoidoosissa

Johdanto, hypoteesi ja erityistavoitteet

Sarkoidoosia sairastavilla ihmisillä, erityisesti niillä, joilla on merkittäviä keuhko- ja/tai sydänsairauksia ja jotka saavat SARS-CoV-2-tartunnan, on todennäköisesti lisääntynyt COVID-19-komplikaatioiden tai kuoleman riski. Vaikka SARS-CoV-2-rokotteet ovat erittäin tehokkaita COVID-19:n ehkäisyssä väestössä, ei tiedetä, tarjoaako rokotus samanlaisen suojan sarkoidoosia sairastaville ihmisille. Tutkijat olettavat, että sarkoidoosia sairastaville ihmisille kehittyy vähemmän vankka vasta-aine ja differentiaatio 4 (CD4)+ T-soluvälitteinen immuunivaste SARS-CoV-2-rokotteelle kuin terveillä henkilöillä sekä itse taudin seurauksena että seurauksena. hoito immunosuppressiivisilla lääkkeillä.

Erityinen tavoite 1. Määritä veren anti-SARS-CoV-2-piikkiproteiinin IgG-vasta-ainetasot SARS-CoV-2-rokotuksen jälkeen henkilöillä, joilla on sarkoidoosi ja joita on hoidettu immunosuppressiivisilla lääkkeillä ja joita ei ole hoidettu immunosuppressiivisilla lääkkeillä, verrattuna ikään ja sukupuoleen vastaaviin terveisiin kontrolleihin.

Erityinen tavoite 2. Määritä SARS-CoV-2-spesifisen perifeerisen veren CD4+ T-solujen aktivaation tasot SARS-CoV-2-rokotuksen jälkeen sarkoidoosipotilailla, joita on hoidettu ja joita ei ole hoidettu immunosuppressiivisilla lääkkeillä, verrattuna ikään ja sukupuoleen vastaaviin terveisiin säätimet.

Tämän tutkimuksen tulokset korjaavat kriittisen aukon sarkoidoosipotilaiden rokotevasteiden ymmärtämisessä. Lisäksi tutkimus antaa tietoa, jota tarvitaan kliinikkojen antamien sarkoidoosipotilaiden suositusten antamiseksi SARS-CoV-2-rokotuksen jälkeisten infektioriskien suhteen, ja se auttaa luomaan perustan tuleville tutkimuksille, joilla arvioidaan tehosterokotteen mahdollisia hyötyjä huonosti sairailla. immuunivasteet ensimmäiselle rokotukselle.

Tausta

Turvallisten ja tehokkaiden rokotteiden kehittäminen SARS-CoV-2:ta vastaan ​​viimeisen vuoden aikana edustaa tieteellistä voittoa ja kansanterveyden läpimurtoa taistelussa COVID-19-pandemian hallitsemiseksi. USA:n väestön meneillään oleva rokottaminen on sattunut samaan aikaan, kun raportoitujen COVID-19-tapausten määrä on vähentynyt yli 12-kertaiseksi tammikuun 2021 huippukeskiarvosta 260 000 tapauksesta päivässä tämän kirjoittamisen (29. toukokuuta 2021) 21 000:een päivässä. Valitettavasti näin ei ole tapahtunut muissa osissa maailmaa, etenkään globaalin etelän matala- ja keskituloisissa maissa, joissa rokotteiden saatavuus on ollut ankarasti rajoitettua ja rokotusasteet ovat toistaiseksi melko alhaiset. Vaikka eriarvoisuus on pienempi kuin kansainvälisesti, rokotteiden saatavuudessa ja käytössä on eroja ryhmien välillä Yhdysvalloissa, ja afroamerikkalaisten, latinalaisamerikkalaisten ja muiden rokotusasteet ovat alhaisemmat. Tämän seurauksena näiden ryhmien jäsenet ovat edelleen suuremmassa vaarassa, ja heillä on edelleen suhteeton COVID-19-taakka.

Toinen ryhmä, jolla on kohonnut riski saada COVID-19, koostuu ihmisistä, joilla on sairauksia tai hoitoja, jotka aiheuttavat immuunivasteen heikkenemistä, ja jotka siksi eivät ehkä pysty muodostamaan suojaavaa immuunivastetta SARS-CoV-2-rokotteelle. Esimerkiksi viimeaikaiset raportit osoittavat, että vasta-ainevasteet SARS-CoV-2-lähetti-RNA (mRNA) -rokotteille eivät ole optimaalisia huomattavassa osassa kiinteiden elinsiirtojen saajia ja potilaita, joilla on hematologisia pahanlaatuisia kasvaimia. Tiedot sidekudos- ja muista kroonisista tulehdussairauksista kärsivistä potilaista ovat ristiriitaisia. Jotkut viimeaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet voimakkaita vasta-ainevasteita SARS-CoV-2-rokotteille, jopa immunosuppressiivisessa hoidossa, kun taas toisessa raportissa havaittiin, että vasta-ainevasteet tällaisilla henkilöillä ovat vähentyneet ja /tai myöhässä. Erityisesti jälkimmäisessä tutkimuksessa vähentyneet vasta-ainevasteet liittyivät immuunivälitteiseen tulehdussairauteen, mutta eivät todennäköisemmin niillä, jotka käyttivät tiettyjä immunosuppressiivisia lääkkeitä. Sitä vastoin toisessa äskettäin tehdyssä tutkimuksessa havaittiin, että metotreksaatin käyttö liittyi vähentyneeseen vasta-aineeseen ja erilaistumisklusterin 8 (CD8)+ T-soluvasteisiin SARS-CoV-2 BNT162b2 mRNA-rokotteelle, kun taas muut suun kautta otettavat immunomodulaattorilääkkeet ja tuumorinekroositekijä (TNF) ) estäjillä ei näyttänyt olevan tällaista vaikutusta.

Ei tiedetä, onko immuunivaste SARS-CoV-2-rokotteelle heikentynyt ihmisillä, joilla on sarkoidoosi. Tämä on kriittinen kysymys, koska sarkoidoosipotilailla voi olla suurempi riski saada COVID-19:n vakavia haittavaikutuksia. Kirjallisuus vasteista muihin sarkoidoosirokotteisiin on niukkaa. Yhdessä tutkimuksessa ei raportoitu eroa influenssarokotuksen vasta-ainevasteessa hoitamattomilla sarkoidoosipotilailla terveisiin verrokkeihin verrattuna. Sitä vastoin toisessa raportissa vasta-ainevasteet jäykkäkouristusrokotukselle vähenivät sarkoidoosipotilailla, joista 52 % käytti oraalisia kortikosteroideja, vaikka rokotevasteen heikkeneminen ei liittynyt kortikosteroidihoitoon. T-lymfosyyttivasteista sarkoidoosin rokottamisen yhteydessä ei ole julkaistuja tietoja, vaikka havainto, että CD4+ T-solujen aktivaatio ja proliferaatio ovat heikentyneet aktiivisessa sarkoidoosissa, viittaa siihen, että T-soluvaste SARS-CoV-2-rokotteelle saattaa myös heikentyä. Koska taudista ei ole saatavilla parempia tietoja, kansainvälisten asiantuntijoiden ryhmä esitti äskettäin vahvan suosituksen SARS-CoV-2-rokotuksesta sarkoidoosia sairastaville ihmisille ja ehdotti nivelreumapotilaiden muiden rokotteiden vastetta koskevien tietojen ekstrapolointia. algoritmi immunomoduloivien lääkkeiden säätämiseksi rokotuksen aikana.

Tietojen puute immuunivasteista SARS-CoV-2-rokotteelle sarkoidoosissa osoittaa, että tämän ongelman ratkaisemiseksi tarvitaan kiireesti tutkimuksia. Ehdotettu tutkimus alkaa täyttää tätä kriittistä tiedon puutetta arvioimalla sekä vasta-aine- että T-soluvasteita SARS-CoV-2-rokotteelle potilailla, joilla on hoitamaton sarkoidoosi, ja muilla, joita hoidetaan immunomodulatorisilla aineilla, verrattuna terveisiin kontrollihenkilöihin.

Tutkimussuunnitelma

Kenraali. Hyväksyntä hankitaan Northwestern Universityn Institutional Review Boardilta. Tutkimus rekisteröidään klinikalla.gov ennen opintojen alkamispäivää.

Tutkimuksen osallistujat. Kolme ryhmää nais- ja mieshenkilöitä, jotka kaikki ovat saaneet perusrokotuksen tai perusrokotuksen ja tehosterokotteen yhdellä kolmesta Yhdysvalloissa tällä hetkellä hyväksytystä SARS-CoV-2-rokotteesta (BNT162b2 [Pfizer-BioNTech], mRNA- 1273 [Moderna] tai JNJ-78436735 [Johnson & Johnson]) vähintään 2 viikkoa aikaisemmin, tutkitaan: 1) sarkoidoosia sairastavat henkilöt, joita ei ole hoidettu immunosuppressiivisilla lääkkeillä; 2) sarkoidoosia sairastavat henkilöt, joita hoidetaan immunosuppressiivisilla lääkkeillä, mukaan lukien systeemiset kortikosteroidit, metotreksaatti, atsatiopriini, mykofenolaattimofetiili, leflunomidi ja monoklonaaliset anti-TNF-vasta-aineet; ja 3) henkilöt, joilla ei ole sarkoidoosia, muita immuunivälitteisiä sairauksia, kroonista keuhkosairautta, sydänsairautta tai maligniteettia ja jotka eivät käytä immunomoduloivia lääkkeitä [terveelliset kontrollit]. Sarkoidoosipotilaat, joita hoidetaan ja joita ei hoideta immunosuppressiivisilla lääkkeillä, rekrytoidaan vakiintuneista potilaista, joita seurataan Northwestern Medicine Sarcoidosis -ohjelman keuhko- ja kardiologian klinikoilla. Terveet kontrollihenkilöt, jotka vastaavat ikää ja sukupuolta sarkoidoosipotilaiden kanssa, rekrytoidaan Northwestern Medicine -yhteisön ja koko yhteisön jäsenistä. Kaikista koehenkilöistä tallennetaan väestötiedot, vastaanotetun SARS-CoV-2-rokotteen päivämäärät ja tyyppi sekä SARS-CoV-2-infektion tai oireisen COVID-19:n varalta tehdyt aiemmat testit. Sarkoidoosipotilaille tallennetaan yksityiskohtaiset tiedot sarkoidoosin diagnoosimenetelmästä, taudin kestosta, sarkoidoosin aiemmasta ja nykyisestä lääkehoidosta, muista nykyisistä lääkkeistä, samanaikaisista sairauksista, tupakan ja muiden päihteiden käytöstä sekä ammatista. Terveiden kontrollien osalta kirjataan myös nykyiset lääkkeet, aiempi sairaushistoria, tupakan ja muiden päihteiden käyttö sekä ammatti.

Erityinen tavoite 1. Kaikilta koehenkilöiltä otetaan laskimoveri, ja seerumi erotetaan, jaetaan eriin ja pakastetaan myöhempää analyysiä varten. Seerumin anti-SARS-CoV-2-piikkiproteiinin IgG mitataan SARS-CoV-2-rokotuksen jälkeen sarkoidoosia sairastaville henkilöille, joita on hoidettu immunosuppressiivisilla lääkkeillä ja joita ei ole hoidettu immunosuppressiivisilla lääkkeillä, sekä iän ja sukupuolen mukaan yhteensopivat terveet kontrollit LIAISON SARS-CoV-2 -rokotteen avulla. TrimericS IgG -määritys (Diasorin). Tämä on erittäin herkkä ja spesifinen toisen sukupolven määritys SARS-CoV-2-trimeerisen piikkiproteiinin reseptorin sitoutumisdomeenin IgG-vasta-aineille. Määritys on kalibroitu erillistä SARS-CoV-2-viruksen neutralointimääritystä vastaan, jossa vastaanottimen toiminta-alue on käyrän alla vasta-aineen havaitsemiseksi, jonka viruksen neutralointikapasiteetti on 0,996. Diasorin TrimericS IgG -määritys sai hätäkäyttöluvan FDA:lta 19. toukokuuta 2021, ja se korvaa ensimmäisen sukupolven LIAISON SARS-CoV-2 S1/S2 IgG -määrityksen, joka itse korreloi eniten viruksen neutralointikyvyn kanssa viidestä kaupallisesta SARS-CoV-viruksesta. -2 vasta-ainemääritystä tuoreessa tutkimuksessa. On huomattava, että neutraloivien vasta-aineiden tasot ennustavat hyvin immuunisuojaa oireellista SARS-CoV-2-infektiota vastaan. Seeruminäytteet säilytetään pakastettuina -80 °C:ssa ja analysoidaan eränä, kun koehenkilöiden rekisteröinti ja näytteenotto on suoritettu.

Tehoanalyysi: Ekstrapoloitu äskettäin tehdyn tutkimuksen tiedoista vasta-ainevasteista SARS-CoV2-rokotteelle potilailla, joilla on immunosuppressiivisia sairauksia, ja online-otoskoon laskin ClinCalc.com Käytettiin määrittämään, että jopa 80 koehenkilöä ryhmää kohti vaaditaan havaitsemaan 20 %:n aleneminen keskimääräisessä vasta-ainetasossa kummassakin sarkoidiryhmässä terveisiin kontrolleihin verrattuna teholla 0,80 alfa-0,05:ssä.

Erityinen tavoite 2. Perifeerisen veren mononukleaarisolut (PBMC:t) eristetään antikoaguloidusta laskimoverestä 10 koehenkilöstä kummassakin sarkoidoosiryhmässä ja terveistä kontrolleista Ficoll-Paque-sentrifugoinnilla, pestään, suspendoidaan uudelleen 10-prosenttiseen dimetyylisulfoksidiin/naudan sikiön seerumiin ja kryosäilytettyyn naudan seerumiin. -80°C:ssa. SARS-CoV-2-spesifinen CD4+-T-soluaktivaatio määritetään käyttämällä PBMC-soluja sarkoidoosipotilailta, joita hoidetaan ja joita ei ole hoidettu immunosuppressiivisilla lääkkeillä, ja iän ja sukupuolen mukaan vastaavilta terveiltä kontrolleilta käyttämällä interferoni-y EliSpotPLUS -määritystä (Mabtech). PBMC:itä stimuloidaan SARS-CoV-2-piikki- ja nukleokapsidiproteiinipeptidipoolilla (BEI Resources) tai anti-cluster of differentiation 3 (CD3) -vasta-aineella (Mabtech) positiivisena kontrollina, kuten on kuvattu (19). PBMC:t pysyvät kylmäsäilytettyinä -80 °C:ssa, sitten sulatetaan, suspendoidaan uudelleen elatusaineeseen ja analysoidaan eränä, kun kohteen rekisteröinti ja näytteenotto on suoritettu. Vaihtoehtoisesti T-soluvaste rokotukselle arvioidaan antikoaguloidusta kokoverestä käyttämällä SARS-CoV-2 QuantiFERON -määritystä (Qiagen).

Tilastollinen analyysi. Ryhmien keskiarvojen välisten erojen merkitys määritetään Varianssianalyysillä ja Dunnettin Multiple Comparison Testillä. P < 0,05 katsotaan merkitseväksi.