Иммунный ответ на вакцинацию против SARS-CoV-2/COVID-19 при саркоидозе

Введение, гипотеза и конкретные цели

Люди с саркоидозом, особенно со значительным поражением легких и/или сердца, инфицированные SARS-CoV-2, вероятно, подвергаются повышенному риску осложнений или смерти от COVID-19. В то время как вакцины против SARS-CoV-2 очень эффективны в предотвращении COVID-19 среди населения в целом, неизвестно, обеспечивает ли вакцинация подобную защиту у людей с саркоидозом. Исследователи предполагают, что у людей с саркоидозом вырабатываются менее устойчивые антитела и кластер дифференцировки 4 (CD4)+ T-клеток, опосредованный иммунным ответом на вакцинацию против SARS-CoV-2, чем у здоровых людей, как следствие самой болезни, так и в результате лечение иммуносупрессивными препаратами.

Конкретная цель 1. Определить уровни антител IgG к шиповидному белку SARS-CoV-2 после вакцинации против SARS-CoV-2 у пациентов с саркоидозом, получавших и не получавших иммуносупрессивные препараты, по сравнению со здоровыми людьми соответствующего возраста и пола.

Конкретная цель 2. Определить уровни специфической для SARS-CoV-2 активации CD4+ Т-клеток периферической крови после вакцинации против SARS-CoV-2 у пациентов с саркоидозом, получавших и не получавших иммунодепрессанты, по сравнению со здоровыми людьми того же возраста и пола. контролирует.

Результаты этого исследования устранят критический пробел в понимании реакции на вакцину у людей с саркоидозом. Кроме того, исследование внесет знания, необходимые для информирования клинических рекомендаций пациентам с саркоидозом относительно риска инфекции после вакцинации против SARS-CoV-2, и поможет заложить основу для будущих испытаний, чтобы оценить возможную пользу бустерной вакцины у людей с плохим состоянием здоровья. иммунный ответ на первичную вакцинацию.

Фон

Разработка безопасных и эффективных вакцин против SARS-CoV-2 за последний год представляет собой научный триумф и прорыв в области общественного здравоохранения в борьбе с пандемией COVID-19. Текущая вакцинация населения США совпала с более чем 12-кратным сокращением зарегистрированных случаев COVID-19 с пикового среднего значения 260 000 в день в январе 2021 г. до 21 000 в день на момент написания этой статьи (29 мая 2021 г.). К сожалению, этого не произошло в других частях мира, особенно в странах с низким и средним уровнем дохода Глобального Юга, где доступность вакцин была сильно ограничена, а уровень вакцинации пока довольно низок. Хотя неравенство меньше, чем неравенство на международном уровне, существуют различия в доступе к вакцинам и их использовании среди групп в США, с более низкими показателями вакцинации среди афроамериканцев, латиноамериканцев и других. В результате члены этих групп по-прежнему подвергаются повышенному риску и будут продолжать нести непропорционально тяжелое бремя COVID-19.

Другая группа с повышенным риском развития COVID-19 состоит из людей с заболеваниями или получающих лечение, вызывающее подавление иммунитета, у которых, следовательно, может не сформироваться защитный иммунный ответ на вакцинацию против SARS-CoV-2. Например, недавние сообщения показывают, что гуморальный ответ на вакцины матричной РНК (мРНК) SARS-CoV-2 является субоптимальным у значительной части реципиентов паренхиматозных органов и пациентов с гематологическими злокачественными новообразованиями. Данные о пациентах с соединительной тканью и другими хроническими воспалительными заболеваниями неоднозначны: некоторые недавние исследования показали сильный гуморальный ответ на вакцины против SARS-CoV-2 даже у пациентов, получающих иммуносупрессивную терапию, в то время как в другом отчете было обнаружено, что гуморальный ответ у таких людей снижен и /или с задержкой. Примечательно, что в последнем исследовании сниженный ответ антител был связан с наличием иммуноопосредованного воспалительного заболевания, но не более вероятным у тех, кто принимал специфические иммунодепрессанты. Напротив, другое недавнее исследование показало, что использование метотрексата было связано со снижением ответов антител и кластера дифференцировки 8 (CD8)+ Т-клеток на мРНК-вакцину SARS-CoV-2 BNT162b2, в то время как другие пероральные иммуномодулирующие препараты и фактор некроза опухоли (TNF ) ингибиторы такого эффекта не оказывали.

Неизвестно, нарушен ли иммунный ответ на вакцинацию против SARS-CoV-2 у людей с саркоидозом. Это важный вопрос, потому что пациенты с саркоидозом могут подвергаться повышенному риску тяжелых неблагоприятных исходов COVID-19. Литература о реакции на другие вакцины при саркоидозе немногочисленна. В одном исследовании не сообщалось о различиях в ответе антител на вакцинацию против гриппа у нелеченных пациентов с саркоидозом по сравнению со здоровыми людьми. Напротив, в другом отчете ответ антител на вакцинацию против столбняка был снижен у пациентов с саркоидозом, 52% из которых принимали пероральные кортикостероиды, хотя ухудшение ответа на вакцину не было связано с терапией кортикостероидами. Нет опубликованных данных о реакции Т-лимфоцитов на вакцинацию при саркоидозе, хотя наблюдение, что активация и пролиферация CD4+ Т-клеток нарушены при активном саркоидозе, предполагает, что ответ Т-клеток на вакцинацию против SARS-CoV-2 также может быть снижен. В отсутствие лучших данных, специфичных для болезни, группа международных экспертов недавно выдвинула настоятельную рекомендацию по вакцинации против SARS-CoV-2 у людей с саркоидозом и, экстраполируя информацию об ответах на другие вакцины у пациентов с ревматоидным артритом, предложила алгоритм корректировки иммуномодулирующих препаратов во время вакцинации.

Отсутствие информации об иммунном ответе на вакцинацию против SARS-CoV-2 при саркоидозе указывает на то, что срочно необходимы исследования для решения этой проблемы. Предлагаемое исследование начнет восполнять этот критический пробел в знаниях путем оценки реакции антител и Т-клеток на вакцинацию против SARS-CoV-2 у людей с саркоидозом, которые не получали лечения, и других, которые лечились иммуномодулирующими агентами, по сравнению со здоровыми субъектами контроля.

План исследования

Общий. Утверждение будет получено от Институционального наблюдательного совета Северо-Западного университета. Исследование будет зарегистрировано на сайте Clinicaltrials.gov. до даты начала исследования.

Участники исследования. Три группы субъектов женского и мужского пола, все из которых должны пройти первичную вакцинацию или первичную вакцинацию плюс бустерную вакцинацию одной из трех вакцин против SARS-CoV-2, разрешенных в настоящее время в США (BNT162b2 [Pfizer-BioNTech], мРНК- 1273 [Moderna] или JNJ-78436735 [Johnson & Johnson]), по крайней мере за 2 недели до этого, будут изучены: 1) люди с саркоидозом, не получавшие иммуносупрессивные препараты; 2) пациенты с саркоидозом, получавшие иммунодепрессанты, включая системные кортикостероиды, метотрексат, азатиоприн, микофенолата мофетил, лефлуномид и моноклональные антитела против TNF; и 3) люди без саркоидоза, других иммуноопосредованных заболеваний, хронических заболеваний легких, болезней сердца или злокачественных новообразований, и не принимающие иммуномодулирующие препараты [здоровая контрольная группа]. Субъекты саркоидоза, получавшие и не получавшие лечение иммунодепрессантами, будут набраны из установленных пациентов, наблюдаемых в пульмонологических и кардиологических клиниках Северо-западной медицинской программы по саркоидозу. Здоровые субъекты контроля, соответствующие по возрасту и полу субъектам с саркоидозом, будут набраны из числа членов сообщества Северо-Западной Медицины и сообщества в целом. Демографические данные, даты и тип полученной вакцины против SARS-CoV-2, а также история предшествующего тестирования на инфекцию SARS-CoV-2 или симптоматический COVID-19 будут зарегистрированы для всех субъектов. Для субъектов с саркоидозом будет записана подробная информация о методе диагностики саркоидоза, продолжительности болезни, прошлом и настоящем медикаментозном лечении саркоидоза, других текущих лекарствах, сопутствующих заболеваниях, употреблении табака и других психоактивных веществ, а также о роде занятий. Для здоровых контролей также будут регистрироваться текущие лекарства, история болезни в прошлом, употребление табака и других психоактивных веществ, а также профессия.

Конкретная цель 1. Венозная кровь будет получена от всех субъектов, а сыворотка будет разделена, разделена на аликвоты и заморожена для последующего анализа. Сывороточный шиповидный белок IgG против SARS-CoV-2 будет измеряться после вакцинации против SARS-CoV-2 у людей с саркоидозом, получавших и не получавших иммуносупрессивные препараты, а также у здоровых людей соответствующего возраста и пола с использованием LIAISON SARS-CoV-2. Анализ TrimericS IgG (диасорин). Это высокочувствительный и специфичный анализ второго поколения на антитела IgG к домену, связывающему тримерный шиповидный белок-рецептор SARS-CoV-2. Анализ был откалиброван по отдельному анализу нейтрализации вируса SARS-CoV-2 с рабочей характеристической площадью приемника под кривой для обнаружения антител со способностью нейтрализации вируса 0,996. Анализ Diasorin TrimericS IgG получил разрешение FDA на экстренное использование 19 мая 2021 г. и заменит анализ первого поколения LIAISON SARS-CoV-2 S1/S2 IgG, который сам по себе наиболее тесно коррелирует со способностью нейтрализовать вирус среди пяти коммерческих SARS-CoV. -2 анализов антител в недавнем исследовании. Следует отметить, что уровни нейтрализующих антител в высокой степени предсказывают иммунную защиту от симптоматической инфекции SARS-CoV-2. Образцы сыворотки будут храниться в замороженном виде при температуре -80 ° C и анализироваться как партия после завершения регистрации субъектов и получения образцов.

Анализ мощности: экстраполяция данных недавнего исследования реакции антител на вакцинацию против SARS-CoV2 у пациентов с ревматическими заболеваниями, получающих иммуносупрессивную терапию, онлайн-калькулятор размера выборки ClinCalc.com был использован для определения того, что до 80 субъектов в группе потребуется для обнаружения 20% снижения среднего уровня антител в любой из групп с саркоидом по сравнению со здоровым контролем, с мощностью 0,80 при альфа 0,05.

Конкретная цель 2. Мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC) будут выделены из антикоагулянтной венозной крови 10 субъектов в каждой из двух групп с саркоидозом и здоровых людей с помощью центрифугирования Ficoll-Paque, промыты, ресуспендированы в 10% диметилсульфоксиде/фетальной бычьей сыворотке и криоконсервированы. при -80°С. SARS-CoV-2-специфическая активация CD4+ T-клеток будет анализироваться с использованием PBMC от пациентов с саркоидозом, получавших и не получавших иммуносупрессивные препараты, и здоровых людей соответствующего возраста и пола с использованием анализа интерферона-γ EliSpotPLUS (Mabtech). PBMC будут стимулировать спайками SARS-CoV-2 и пулами нуклеокапсидных белковых пептидов (BEI Resources) или антителами против кластера дифференцировки 3 (CD3) (Mabtech) в качестве положительного контроля, как описано (19). РВМС остаются криоконсервированными при -80°C, затем оттаивают, ресуспендируют в культуральной среде и анализируют как партию, когда завершится набор субъектов и сбор образцов. В качестве альтернативы ответ Т-клеток на вакцинацию будет оцениваться в цельной крови с антикоагулянтом с использованием анализа SARS-CoV-2 QuantiFERON (Qiagen).

Статистический анализ. Значимость различий между средними группами будет определяться с помощью дисперсионного анализа и критерия множественного сравнения Даннета. P < 0,05 будет считаться значимым.