Resposta imune à vacinação contra SARS-CoV-2/COVID-19 na sarcoidose

Introdução, Hipóteses e Objetivos Específicos

Pessoas com sarcoidose, particularmente aquelas com envolvimento pulmonar e/ou cardíaco significativo, que são infectadas com SARS-CoV-2 provavelmente correm maior risco de complicações ou morte por COVID-19. Embora as vacinas SARS-CoV-2 sejam altamente eficazes na prevenção de COVID-19 na população em geral, não se sabe se a vacinação fornece proteção semelhante em pessoas com sarcoidose. Os pesquisadores levantam a hipótese de que as pessoas com sarcoidose desenvolvem respostas imunes mediadas por células T de cluster de diferenciação 4 (CD4)+ menos robustas à vacinação contra SARS-CoV-2 do que indivíduos saudáveis, tanto como consequência da própria doença quanto como resultado de tratamento com medicamentos imunossupressores.

Objetivo específico 1. Determinar os níveis de anticorpos IgG anti-SARS-CoV-2 no sangue após a vacinação contra SARS-CoV-2 em indivíduos com sarcoidose tratados e não tratados com medicamentos imunossupressores, em comparação com controles saudáveis ​​pareados por idade e sexo.

Objetivo específico 2. Determinar os níveis de ativação específica de SARS-CoV-2 de células T CD4+ do sangue periférico após a vacinação contra SARS-CoV-2 em indivíduos com sarcoidose tratados e não tratados com medicamentos imunossupressores, em comparação com indivíduos saudáveis ​​pareados por idade e sexo controles.

Os resultados desta investigação abordarão uma lacuna crítica na compreensão das respostas vacinais em pessoas com sarcoidose. Além disso, o estudo contribuirá com o conhecimento necessário para informar as recomendações dos médicos aos pacientes com sarcoidose em relação ao risco de infecção após a vacinação contra SARS-CoV-2 e ajudará a estabelecer as bases para futuros ensaios para avaliar o possível benefício dos reforços da vacina em indivíduos com problemas de saúde. respostas imunes à vacinação inicial.

Fundo

O desenvolvimento de vacinas seguras e eficazes contra o SARS-CoV-2 no ano passado representa um triunfo científico e um avanço da saúde pública na batalha para controlar a pandemia do COVID-19. A vacinação contínua da população dos EUA coincidiu com uma redução > 12 vezes nos casos relatados de COVID-19, de uma média de pico de 260.000 por dia em janeiro de 2021 para 21.000 por dia no momento em que este artigo foi escrito (29 de maio de 2021). Infelizmente, esse não é o caso em outras partes do mundo, particularmente nos países de baixa e média renda do Sul Global, onde a disponibilidade de vacinas foi severamente limitada e as taxas de vacinação são até agora bastante baixas. Embora menor do que a desigualdade internacionalmente, há disparidades no acesso e absorção de vacinas entre grupos nos EUA, com taxas de vacinação mais baixas entre afro-americanos, latino-americanos e outros. Como resultado, os membros desses grupos permanecem em maior risco e continuarão a suportar uma carga desproporcional de COVID-19.

Outro grupo com maior risco de desenvolver COVID-19 é composto por pessoas com condições médicas ou em tratamentos que causam supressão imunológica, que, portanto, podem falhar em montar uma resposta imune protetora à vacinação SARS-CoV-2. Por exemplo, relatórios recentes indicam que as respostas de anticorpos às vacinas de RNA mensageiro (mRNA) de SARS-CoV-2 são subótimas em proporções substanciais de receptores de transplante de órgãos sólidos e pacientes com malignidades hematológicas. Os dados sobre pacientes com tecido conjuntivo e outras doenças inflamatórias crônicas são mistos, com alguns estudos recentes mostrando respostas robustas de anticorpos às vacinas SARS-CoV-2, mesmo naqueles em terapias imunossupressoras, enquanto outro relatório descobriu que as respostas de anticorpos nesses indivíduos são reduzidas e /ou atrasado. Notavelmente, no último estudo, respostas reduzidas de anticorpos foram associadas à presença de uma doença inflamatória mediada pelo sistema imunológico, mas não mais provável naqueles em uso de medicamentos imunossupressores específicos. Em contraste, outro estudo recente descobriu que o uso de metotrexato estava associado à diminuição das respostas de células T de cluster de diferenciação 8 (CD8)+ à vacina SARS-CoV-2 BNT162b2 mRNA, enquanto outras drogas imunomoduladoras orais e fator de necrose tumoral (TNF ) inibidores não parecem ter tal efeito.

Não se sabe se a resposta imune à vacinação contra SARS-CoV-2 é prejudicada em pessoas com sarcoidose. Esta é uma questão crítica porque os pacientes com sarcoidose podem ter um risco aumentado de resultados adversos graves do COVID-19. A literatura sobre as respostas a outras vacinas na sarcoidose é escassa. Um estudo não relatou diferença na resposta de anticorpos à vacinação contra influenza em pacientes com sarcoidose não tratados em comparação com controles saudáveis. Por outro lado, em outro relato, as respostas de anticorpos à vacinação contra o tétano foram reduzidas em pacientes com sarcoidose, 52% dos quais estavam em uso de corticosteroides orais, embora o comprometimento da resposta à vacina não estivesse relacionado à terapia com corticosteroides. Não há dados publicados sobre as respostas dos linfócitos T à vacinação na sarcoidose, embora a observação de que a ativação e a proliferação das células T CD4+ sejam prejudicadas na sarcoidose ativa sugere que a resposta das células T à vacinação com SARS-CoV-2 também pode ser reduzida. Na ausência de melhores dados específicos para a doença, um grupo de especialistas internacionais apresentou recentemente uma forte recomendação para a vacinação contra SARS-CoV-2 em pessoas com sarcoidose e extrapolando as informações sobre as respostas a outras vacinas em pacientes com artrite reumatoide, propostas um algoritmo para ajuste de medicamentos imunomoduladores no momento da vacinação.

A falta de informações sobre as respostas imunes à vacinação contra SARS-CoV-2 na sarcoidose indica que estudos para abordar esse problema são urgentemente necessários. A investigação proposta começará a preencher essa lacuna crítica de conhecimento, avaliando as respostas de anticorpos e células T à vacinação contra SARS-CoV-2 em indivíduos com sarcoidose não tratados e outros tratados com agentes imunomoduladores em comparação com indivíduos de controle saudáveis.

Plano de pesquisa

Em geral. A aprovação será obtida do Conselho de Revisão Institucional da Northwestern University. O estudo será registrado em Clinicaltrials.gov antes da data de início do estudo.

Participantes do estudo. Três grupos de indivíduos do sexo feminino e masculino, todos com vacinação primária completa ou vacinação primária mais vacinação de reforço, com uma das três vacinas SARS-CoV-2 atualmente autorizadas nos EUA (BNT162b2 [Pfizer-BioNTech], mRNA- 1273 [Moderna] ou JNJ-78436735 [Johnson & Johnson]) pelo menos 2 semanas antes, serão estudados: 1) indivíduos com sarcoidose não tratados com medicamentos imunossupressores; 2) indivíduos com sarcoidose tratados com medicamentos imunossupressores, incluindo corticosteroides sistêmicos, metotrexato, azatioprina, micofenolato de mofetil, leflunomida e anticorpos monoclonais anti-TNF; e 3) indivíduos sem sarcoidose, outras doenças imunomediadas, doença pulmonar crônica, doença cardíaca ou malignidade e que não fazem uso de medicamentos imunomoduladores [controles saudáveis]. Indivíduos com sarcoidose tratados e não tratados com medicamentos imunossupressores serão recrutados de pacientes estabelecidos acompanhados nas Clínicas de Cardiologia e Pulmonar do Programa de Sarcoidose da Northwestern Medicine. Indivíduos de controle saudáveis, pareados por idade e sexo com os indivíduos com sarcoidose, serão recrutados entre membros da comunidade da Northwestern Medicine e da comunidade em geral. Informações demográficas, datas e tipo de vacina SARS-CoV-2 recebida e histórico de testes anteriores para infecção por SARS-CoV-2 ou COVID-19 sintomático serão registrados para todos os indivíduos. Para indivíduos com sarcoidose, serão registradas informações detalhadas sobre o método de diagnóstico da sarcoidose, duração da doença, terapia médica passada e atual para sarcoidose, outros medicamentos atuais, condições médicas comórbidas, uso de tabaco e outras substâncias e ocupação. Para controles saudáveis, medicamentos atuais, histórico médico anterior, uso de tabaco e outras substâncias e ocupação também serão registrados.

Objetivo Específico 1. Sangue venoso será obtido de todos os indivíduos, e o soro será separado, aliquotado e congelado para posterior análise. A proteína anti-SARS-CoV-2 spike IgG sérica será medida após a vacinação contra SARS-CoV-2 de indivíduos com sarcoidose tratados e não tratados com medicamentos imunossupressores e controles saudáveis ​​pareados por idade e sexo usando o LIAISON SARS-CoV-2 Ensaio TrimericS IgG (Diasorin). Este é um ensaio de segunda geração altamente sensível e específico para anticorpos IgG para o domínio de ligação do receptor de proteína spike trimérico SARS-CoV-2. O ensaio foi calibrado contra um ensaio separado de neutralização do vírus SARS-CoV-2, com uma área característica de operação do receptor sob a curva para detecção de anticorpo com capacidade de neutralização do vírus de 0,996. O ensaio Diasorin TrimericS IgG recebeu autorização de uso de emergência do FDA em 19 de maio de 2021 e substituirá o ensaio LIAISON SARS-CoV-2 S1/S2 IgG de primeira geração, que se correlacionou mais fortemente com a capacidade de neutralização do vírus entre cinco SARS-CoV comerciais -2 ensaios de anticorpos em um estudo recente. Deve-se observar que os níveis de anticorpos neutralizantes são altamente preditivos da proteção imunológica contra a infecção sintomática por SARS-CoV-2. As amostras de soro serão armazenadas congeladas a -80°C e analisadas como um lote quando a inscrição do sujeito e a aquisição da amostra estiverem concluídas.

Análise de poder: extrapolando os dados de um estudo recente de respostas de anticorpos à vacinação contra SARS-CoV2 em pacientes com doenças reumáticas em terapias imunossupressoras, a calculadora de tamanho de amostra online ClinCalc.com foi usado para determinar que até 80 indivíduos por grupo serão necessários para detectar uma redução de 20% no nível médio de anticorpos em qualquer um dos grupos sarcóides em comparação com controles saudáveis, com um poder de 0,80 em alfa 0,05.

Objetivo Específico 2. Células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) serão isoladas do sangue venoso anticoagulado de 10 indivíduos em cada um dos dois grupos de sarcoidose e controles saudáveis ​​por centrifugação Ficoll-Paque, lavadas, ressuspensas em dimetilsulfóxido 10%/soro fetal bovino e criopreservadas a -80°C. A ativação de células T CD4+ específicas de SARS-CoV-2 será avaliada usando PBMCs de indivíduos com sarcoidose tratados e não tratados com medicamentos imunossupressores e controles saudáveis ​​pareados por idade e sexo usando o ensaio EliSpotPLUS de interferon-γ (Mabtech). As PBMCs serão estimuladas com pico de SARS-CoV-2 e pools de peptídeos de proteína de nucleocapsídeo (BEI Resources) ou anticorpo anti-cluster de diferenciação 3 (CD3) (Mabtech) como controle positivo, conforme descrito (19). As PBMCs permanecerão criopreservadas a -80°C, depois descongeladas, ressuspensas em meio de cultura e analisadas como um lote quando a inscrição do sujeito e a aquisição da amostra estiverem concluídas. Alternativamente, a resposta das células T à vacinação será avaliada em sangue total anticoagulado usando o ensaio SARS-CoV-2 QuantiFERON (Qiagen).

Análise Estatística. A significância das diferenças entre as médias dos grupos será determinada pela Análise de Variância e pelo Teste de Comparação Múltipla de Dunnett. P < 0,05 será considerado significativo.