Immunválasz a SARS-CoV-2/COVID-19 oltásra szarkoidózisban

Bevezetés, hipotézisek és konkrét célok

Azoknál a szarkoidózisban szenvedőknél, különösen a jelentős tüdő- és/vagy szívbetegségben szenvedőknél, akik megfertőződnek a SARS-CoV-2-vel, valószínűleg nagyobb a COVID-19 okozta szövődmények vagy halálozás kockázata. Míg a SARS-CoV-2 vakcinák rendkívül hatékonyak a COVID-19 megelőzésében a lakosság körében, nem ismert, hogy az oltás hasonló védelmet nyújt-e a szarkoidózisban szenvedő betegeknél. A kutatók azt feltételezik, hogy a szarkoidózisban szenvedő embereknél kevésbé robusztus antitestek és 4-es differenciálódású (CD4)+ T-sejt-mediált immunválaszok alakulnak ki a SARS-CoV-2 vakcinációval szemben, mint az egészséges egyéneknél, mind magának a betegségnek, mind a immunszuppresszív gyógyszeres kezelés.

Specifikus cél 1. A vér anti-SARS-CoV-2 tüskeprotein IgG antitestszintjének meghatározása SARS-CoV-2 vakcinációt követően immunszuppresszív gyógyszerekkel kezelt és nem kezelt szarkoidózisban szenvedő egyénekben, összehasonlítva az életkorban és nemben megfelelő egészséges kontrollokkal.

Specifikus cél 2. A perifériás vér CD4+ T-sejtek SARS-CoV-2-specifikus aktivációjának meghatározása SARS-CoV-2 vakcinációt követően szarkoidózisban szenvedő, immunszuppresszív gyógyszerekkel kezelt és nem kezelt egyéneknél, összehasonlítva az életkorban és nemben megfelelő egészségesekkel vezérlők.

A vizsgálat eredményei a szarkoidózisban szenvedő betegek vakcinaválaszának megértésében fennálló kritikus hiányosságot orvosolják. Ezen túlmenően a tanulmány hozzájárul a klinikusok szarkoidózisban szenvedő betegeknek a SARS-CoV-2 oltás utáni fertőzés kockázatával kapcsolatos ajánlásaihoz szükséges ismeretek megismeréséhez, és segít megalapozni azokat a jövőbeli kísérleteket, amelyekben értékelni fogják az emlékeztető oltás lehetséges előnyeit rossz egészségi állapotú egyéneknél. immunválaszok a kezdeti oltásra.

Háttér

A SARS-CoV-2 elleni biztonságos és hatékony vakcinák kifejlesztése az elmúlt évben tudományos diadalt és közegészségügyi áttörést jelent a COVID-19 világjárvány megfékezéséért folytatott küzdelemben. Az Egyesült Államok lakosságának folyamatban lévő vakcinázása egybeesett a bejelentett COVID-19 megbetegedések több mint 12-szeres csökkenésével, a 2021 januári csúcsátlagról napi 260 000-ről 21 000-re a jelen írás időpontjában (2021. május 29-én). Sajnos ez nem így van a világ más részein, különösen a globális déli országok alacsony és közepes jövedelmű országaiban, ahol a vakcinák elérhetősége erősen korlátozott, és az oltások aránya eddig meglehetősen alacsony. Bár kisebb, mint a nemzetközi egyenlőtlenség, az Egyesült Államokon belüli csoportok között eltérések mutatkoznak az oltásokhoz való hozzáférésben és -felhasználásban, alacsonyabb az afro-amerikaiak, latin-amerikaiak és mások oltási aránya. Ennek eredményeként e csoportok tagjai továbbra is fokozott kockázatnak vannak kitéve, és továbbra is aránytalanul nagy terhet fognak viselni a COVID-19 miatt.

A COVID-19 kifejlődésének fokozott kockázatának kitett másik csoportba azok az emberek tartoznak, akiknek egészségügyi állapota van, vagy olyan kezelésben részesülnek, amely immunszuppressziót okoz, és ezért előfordulhat, hogy nem tudnak védekező immunválaszt kifejteni a SARS-CoV-2 oltással szemben. Például a legújabb jelentések azt mutatják, hogy a SARS-CoV-2 hírvivő RNS (mRNS) vakcinákkal szembeni antitestválaszok szuboptimálisak a szilárd szervátültetettek és a rosszindulatú hematológiai daganatos betegek jelentős részében. A kötőszöveti és egyéb krónikus gyulladásos betegségekben szenvedő betegekre vonatkozó adatok vegyesek, néhány újabb tanulmány szerint a SARS-CoV-2 vakcinákkal szemben még az immunszuppresszív terápiában részesülőkben is erőteljes antitestválaszok alakultak ki, míg egy másik jelentés szerint az ilyen egyének antitestválasza csökken, /vagy késve. Nevezetesen, az utóbbi vizsgálatban a csökkent antitest-válaszok immunmediált gyulladásos betegség jelenlétével jártak együtt, de nem valószínűbb azoknál, akik specifikus immunszuppresszív gyógyszereket kaptak. Ezzel szemben egy másik közelmúltbeli tanulmány azt találta, hogy a metotrexát alkalmazása a SARS-CoV-2 BNT162b2 mRNS vakcinára, míg más orális immunmodulátorokra és tumornekrózis faktorra (TNF) csökkent antitest- és differenciálódási klaszter (CD8)+ T-sejt-válaszokhoz kapcsolódik. ) inhibitoroknak nem volt ilyen hatása.

Nem ismert, hogy a SARS-CoV-2 oltásra adott immunválasz károsodott-e a szarkoidózisban szenvedő betegeknél. Ez kritikus kérdés, mert a szarkoidózisban szenvedő betegek fokozottan ki vannak téve a COVID-19 súlyos káros következményeinek. A szarkoidózisban más vakcinákra adott válaszokról szóló irodalom kevés. Egy vizsgálat nem számolt be az influenza elleni védőoltásra adott antitestválaszban a kezeletlen szarkoidózisban szenvedő betegeknél az egészséges kontrollokhoz képest. Ezzel szemben egy másik jelentésben a tetanusz elleni oltásra adott antitest-válaszok csökkentek a szarkoidózisban szenvedő betegeknél, akiknek 52%-a orális kortikoszteroidot kapott, bár a vakcinaválasz romlása nem függött össze a kortikoszteroid-terápiával. Nincs publikált adat a T-limfociták oltásra adott válaszáról szarkoidózisban, bár az a megfigyelés, hogy a CD4+ T-sejtek aktivációja és proliferációja károsodott aktív sarcoidosisban, arra utal, hogy a SARS-CoV-2 vakcinációra adott T-sejt-válasz is csökkenhet. A betegségre vonatkozó jobb adatok hiányában nemzetközi szakértők egy csoportja a közelmúltban határozott ajánlást fogalmazott meg a sarcoidosisban szenvedő betegek SARS-CoV-2 elleni védőoltására vonatkozóan, és a reumás ízületi gyulladásban szenvedő betegek más vakcinákra adott válaszaira vonatkozó információkból extrapolálva javasolta. egy algoritmus az immunmoduláló gyógyszerek beállítására az oltás idején.

A szarkoidózisban a SARS-CoV-2 oltásra adott immunválaszra vonatkozó információk hiánya azt jelzi, hogy sürgősen szükség van a probléma kezelésére irányuló vizsgálatokra. A javasolt vizsgálat megkezdi ezt a kritikus tudáshézagot azzal, hogy megvizsgálja a SARS-CoV-2 vakcinációra adott antitest- és T-sejt-válaszokat olyan szarkoidózisban szenvedő egyéneknél, akiket nem kezeltek, és másoknál, akiket immunmoduláló szerekkel kezelnek, összehasonlítva az egészséges kontroll alanyokkal.

Kutatási terv

Tábornok. A jóváhagyást a Northwestern Egyetem Intézményi Ellenőrző Testületétől kell beszerezni. A vizsgálatot a clinictrials.gov oldalon regisztrálják a tanulmány kezdete előtt.

A tanulmány résztvevői. Női és férfi alanyok három csoportja, akik mindegyike megkapta az alapoltást vagy az elsődleges oltást és az emlékeztető oltást az Egyesült Államokban jelenleg engedélyezett három SARS-CoV-2 vakcina egyikével (BNT162b2 [Pfizer-BioNTech], mRNA- 1273 [Moderna] vagy JNJ-78436735 [Johnson & Johnson]) legalább 2 héttel korábban a következőket vizsgálják: 1) sarcoidosisban szenvedő egyének, akiket nem kezeltek immunszuppresszív gyógyszerekkel; 2) szarkoidózisban szenvedő egyének, akiket immunszuppresszív gyógyszerekkel kezelnek, beleértve a szisztémás kortikoszteroidokat, metotrexátot, azatioprint, mikofenolát-mofetilt, leflunomidot és anti-TNF monoklonális antitesteket; és 3) olyan személyek, akik nem szenvednek szarkoidózistól, egyéb immunmediált betegségtől, krónikus tüdőbetegségtől, szívbetegségtől vagy rosszindulatú daganattól, és nem szednek immunmoduláló gyógyszereket [egészséges kontrollok]. Az immunszuppresszív gyógyszerekkel kezelt és nem kezelt szarkoidózisos alanyokat a Northwestern Medicine szarkoidózis programjának tüdő- és kardiológiai klinikáján megfigyelt betegek közül választják. A szarkoidózisos alanyokhoz igazodó, koruk és nemük szerint egészséges kontrollalanyokat a Northwestern Medicine közösség és a közösség tagjai közül fognak toborozni. A demográfiai adatokat, a beérkezett SARS-CoV-2 vakcina dátumait és típusát, valamint a SARS-CoV-2 fertőzésre vagy a tünetekkel járó COVID-19-re vonatkozó előzetes vizsgálatok előzményeit minden alany esetében rögzítjük. A szarkoidózisban szenvedő alanyok esetében részletes információkat rögzítenek a szarkoidózis diagnózisának módszeréről, a betegség időtartamáról, a szarkoidózis múltbeli és jelenlegi orvosi terápiájáról, egyéb jelenlegi gyógyszeres kezelésekről, társbetegségekről, dohányzásról és egyéb szerhasználatról, valamint foglalkozásról. Az egészséges kontrollok esetében a jelenlegi gyógyszereket, a múltbeli kórtörténetet, a dohány- és egyéb szerhasználatot, valamint a foglalkozást is rögzíteni kell.

Specifikus cél 1. Minden alanytól vénás vért vesznek, és a szérumot elválasztják, aliquot részekre osztják és lefagyasztják a későbbi elemzéshez. A szérum anti-SARS-CoV-2 tüskeprotein IgG-t az immunszuppresszív gyógyszerekkel kezelt és nem kezelt szarkoidózisban szenvedő egyének SARS-CoV-2 elleni oltását követően, valamint a LIAISON SARS-CoV-2 használatával kor- és nemüknek megfelelő egészséges kontrollokat követően mérik. TrimericS IgG vizsgálat (Diasorin). Ez egy rendkívül érzékeny és specifikus, második generációs vizsgálati eljárás a SARS-CoV-2 trimer spike protein receptor kötődomén elleni IgG antitestek kimutatására. A vizsgálatot egy különálló SARS-CoV-2 vírussemlegesítési teszthez kalibrálták, ahol a vevő működési jellemzője a görbe alatt található a 0,996 vírussemlegesítési kapacitású antitest kimutatására. A Diasorin TrimericS IgG-teszt 2021. május 19-én sürgősségi felhasználási engedélyt kapott az FDA-tól, és felváltja az első generációs LIAISON SARS-CoV-2 S1/S2 IgG-teszt, amely maga is a legjobban korrelált a vírussemlegesítési kapacitással az öt kereskedelmi SARS-CoV közül. -2 antitest vizsgálat egy friss tanulmányban. Meg kell jegyezni, hogy a neutralizáló antitestszintek nagymértékben előre jelzik a tünetekkel járó SARS-CoV-2 fertőzés elleni immunvédelmet. A szérummintákat -80 °C-on fagyasztva tárolják, és tételként vizsgálják, amikor az alanyok felvétele és a mintavétel befejeződött.

Hatékonysági elemzés: A ClinCalc.com online mintanagyság-kalkulátor egy nemrégiben végzett vizsgálat adataiból extrapolálva a SARS-CoV2 oltásra adott antitestválaszokat reumás betegeknél immunszuppresszív terápiában. -ot használták annak meghatározására, hogy csoportonként legfeljebb 80 alanynak kell kimutatnia az átlagos antitestszint 20%-os csökkenését bármelyik szarkoid csoportban az egészséges kontrollokhoz képest, 0,80-as hatványértékkel az alfa 0,05-nél.

Specifikus cél 2. A perifériás vér mononukleáris sejtjeit (PBMC) izoláljuk a két szarkoidózis csoport 10 alanyának és egészséges kontrolljainak alvadásgátló vénás véréből Ficoll-Paque centrifugálással, mossuk, újra szuszpendáljuk 10%-os dimetilszulfoxid/magzati borjúszérumban és kriopreservált szérumban. -80 °C-on. A SARS-CoV-2-specifikus CD4+ T-sejt-aktivációt immunszuppresszív gyógyszerekkel kezelt és nem kezelt szarkoidózisos alanyokból származó PBMC-k segítségével, valamint életkor és nem szerinti egészséges kontrollok segítségével, az interferon-γ EliSpotPLUS vizsgálattal (Mabtech) vizsgálják. A PBMC-ket SARS-CoV-2 tüske és nukleokapszid fehérje peptid poolokkal (BEI Resources) vagy anti-cluster of differentiation 3 (CD3) antitesttel (Mabtech) stimuláljuk pozitív kontrollként, a leírtak szerint (19). A PBMC-k -80 °C-on mélyhűtve maradnak, majd felolvasztják, újraszuszpendálják a tápközegben, és tételként vizsgálják, amikor az alanyok besorolása és a mintavétel befejeződött. Alternatív megoldásként a vakcinázásra adott T-sejt-választ antikoagulált teljes vérben értékelik a SARS-CoV-2 QuantiFERON teszt (Qiagen) segítségével.

Statisztikai analízis. A csoportátlagok közötti különbségek jelentőségét a varianciaanalízis és a Dunnett-féle többszörös összehasonlítási teszt határozza meg. P < 0,05 szignifikánsnak tekinthető.