Imunitní odpověď na očkování proti SARS-CoV-2/COVID-19 u sarkoidózy

Úvod, hypotéza a specifické cíle

Lidé se sarkoidózou, zejména ti s významným postižením plic a/nebo srdce, kteří se nakazí SARS-CoV-2, jsou pravděpodobně vystaveni zvýšenému riziku komplikací nebo úmrtí na COVID-19. Zatímco vakcíny proti SARS-CoV-2 jsou vysoce účinné v prevenci COVID-19 v obecné populaci, není známo, zda očkování poskytuje podobnou ochranu u lidí se sarkoidózou. Vyšetřovatelé předpokládají, že u lidí se sarkoidózou se vyvinou méně silné protilátky a imunitní reakce zprostředkované klastru diferenciace 4 (CD4)+ T lymfocyty na očkování proti SARS-CoV-2 než u zdravých jedinců, a to jak v důsledku nemoci samotné, tak v důsledku léčba imunosupresivními léky.

Specifický cíl 1. Stanovit hladiny IgG protilátek proti SARS-CoV-2 v krvi po očkování proti SARS-CoV-2 u jedinců se sarkoidózou léčených a neléčených imunosupresivními léky ve srovnání se zdravými kontrolami stejného věku a pohlaví.

Specifický cíl 2. Určit hladiny SARS-CoV-2-specifické aktivace CD4+ T buněk periferní krve po očkování SARS-CoV-2 u jedinců se sarkoidózou léčených a neléčených imunosupresivními léky, ve srovnání se zdravými věkem a pohlavím řízení.

Výsledky tohoto výzkumu se zaměří na kritickou mezeru v chápání reakcí na vakcínu u lidí se sarkoidózou. Kromě toho tato studie přispěje znalostmi potřebnými k informování lékařů o doporučeních pro pacienty se sarkoidózou ohledně rizika infekce po očkování proti SARS-CoV-2 a pomůže položit základ pro budoucí studie k vyhodnocení možného přínosu posilovačů vakcíny u jedinců s nedostatečným onemocněním. imunitní reakce na počáteční očkování.

Pozadí

Vývoj bezpečných a účinných vakcín proti SARS-CoV-2 za poslední rok představuje vědecký triumf a průlom v oblasti veřejného zdraví v boji o kontrolu pandemie COVID-19. Probíhající očkování americké populace se časově shodovalo s >12násobným snížením hlášených případů COVID-19 z maximálního průměru 260 000 za den v lednu 2021 na 21 000 za den v době tohoto psaní (29. května 2021). Bohužel tomu tak nebylo v jiných částech světa, zejména v zemích globálního jihu s nízkými a středními příjmy, kde je dostupnost vakcíny značně omezená a proočkovanost je zatím poměrně nízká. I když jsou menší než nerovnosti v mezinárodním měřítku, existují rozdíly v přístupu k vakcíně a jejím přijímání mezi skupinami v USA, přičemž míra očkování je nižší u Afroameričanů, Latinské Ameriky a dalších. V důsledku toho zůstávají členové těchto skupin vystaveni zvýšenému riziku a budou i nadále nést nepřiměřenou zátěž COVID-19.

Další skupinu se zvýšeným rizikem rozvoje COVID-19 tvoří lidé se zdravotním stavem nebo užívající léčbu, která způsobuje imunitní supresi, u kterých se proto nemusí podařit vytvořit ochrannou imunitní odpověď na očkování proti SARS-CoV-2. Nedávné zprávy například naznačují, že protilátkové reakce na SARS-CoV-2 messenger RNA (mRNA) vakcíny jsou u podstatné části příjemců transplantátu solidních orgánů a pacientů s hematologickými malignitami suboptimální. Údaje o pacientech s pojivovou tkání a jinými chronickými zánětlivými onemocněními jsou smíšené, přičemž některé nedávné studie prokázaly silné protilátkové reakce na vakcíny proti SARS-CoV-2, a to i u pacientů na imunosupresivní léčbě, zatímco jiná zpráva zjistila, že protilátkové reakce u těchto jedinců jsou sníženy a /nebo zpožděné. Je pozoruhodné, že ve druhé studii byly snížené protilátkové odpovědi spojeny s přítomností imunitně zprostředkovaného zánětlivého onemocnění, ale ne pravděpodobněji u pacientů užívajících specifické imunosupresivní léky. Naproti tomu jiná nedávná studie zjistila, že použití methotrexátu bylo spojeno se sníženou protilátkovou a shlukem diferenciačních 8 (CD8)+ T buněčných odpovědí na mRNA vakcínu SARS-CoV-2 BNT162b2, zatímco jiné perorální imunomodulační léky a tumor nekrotizující faktor (TNF ) inhibitory neměly takový účinek.

Není známo, zda je imunitní odpověď na očkování proti SARS-CoV-2 u lidí se sarkoidózou narušena. Toto je kritická otázka, protože pacienti se sarkoidózou mohou být vystaveni zvýšenému riziku závažných nepříznivých následků COVID-19. Literatura o odpovědích na jiné vakcíny u sarkoidózy je řídká. Jedna studie neuvedla žádný rozdíl v protilátkové odpovědi na očkování proti chřipce u neléčených pacientů se sarkoidózou ve srovnání se zdravými kontrolami. Naproti tomu v jiné zprávě byly protilátkové odpovědi na očkování proti tetanu sníženy u pacientů se sarkoidózou, z nichž 52 % užívalo perorální kortikosteroidy, ačkoli zhoršení odpovědi na vakcinaci nesouviselo s léčbou kortikosteroidy. Neexistují žádné publikované údaje o odpovědích T lymfocytů na vakcinaci u sarkoidózy, ačkoli pozorování, že aktivace a proliferace CD4+ T lymfocytů jsou při aktivní sarkoidóze narušeny, naznačuje, že odpověď T lymfocytů na vakcinaci SARS-CoV-2 může být rovněž snížena. Vzhledem k tomu, že neexistují lepší údaje specifické pro toto onemocnění, skupina mezinárodních odborníků nedávno předložila důrazné doporučení pro očkování proti SARS-CoV-2 u lidí se sarkoidózou a extrapolovala z informací o reakcích na jiné vakcíny u pacientů s revmatoidní artritidou. algoritmus pro úpravu imunomodulačních léků v době očkování.

Nedostatek informací o imunitních reakcích na očkování proti SARS-CoV-2 u sarkoidózy naznačuje, že je naléhavě zapotřebí studií, které by se touto otázkou zabývaly. Navrhovaný výzkum začne tuto kritickou znalostní mezeru zaplňovat hodnocením protilátkových a T buněčných odpovědí na očkování proti SARS-CoV-2 u jedinců se sarkoidózou, kteří nejsou léčeni, a dalších, kteří jsou léčeni imunomodulačními látkami, ve srovnání se zdravými kontrolními subjekty.

Výzkumný plán

Všeobecné. Schválení bude získáno od Institutional Review Board of Northwestern University. Studie bude registrována na Clinictrials.gov před datem zahájení studia.

Účastníci studie. Tři skupiny ženských a mužských subjektů, z nichž všichni budou mít dokončené základní očkování nebo základní očkování plus přeočkování jednou ze tří vakcín proti SARS-CoV-2 v současnosti povolených v USA (BNT162b2 [Pfizer-BioNTech], mRNA- 1273 [Moderna] nebo JNJ-78436735 [Johnson & Johnson]) alespoň 2 týdny předtím, budou studováni: 1) jedinci se sarkoidózou neléčení imunosupresivními léky; 2) jedinci se sarkoidózou léčení imunosupresivními léky, včetně systémových kortikosteroidů, metotrexátu, azathioprinu, mykofenolát mofetilu, leflunomidu a anti-TNF monoklonálních protilátek; a 3) jedinci bez sarkoidózy, jiných imunitně zprostředkovaných onemocnění, chronického onemocnění plic, srdečního onemocnění nebo zhoubného bujení a neužívající imunomodulační léky [zdravé kontroly]. Subjekty se sarkoidózou léčené a neléčené imunosupresivními léky se budou rekrutovat ze zavedených pacientů sledovaných na plicních a kardiologických klinikách programu sarkoidózy severozápadní medicíny. Zdravé kontrolní subjekty, které odpovídají věku a pohlaví subjektům se sarkoidózou, se budou rekrutovat z členů komunity severozápadní medicíny a komunity obecně. U všech subjektů budou zaznamenány demografické informace, data a typ obdržené vakcíny proti SARS-CoV-2 a historie předchozího testování na infekci SARS-CoV-2 nebo symptomatický COVID-19. U subjektů se sarkoidózou budou zaznamenány podrobné informace o způsobu diagnostiky sarkoidózy, trvání onemocnění, minulé a současné lékařské terapii sarkoidózy, dalších současných lécích, přidružených chorobných stavech, užívání tabáku a jiných látek a zaměstnání. U zdravých kontrol budou rovněž zaznamenány současné léky, minulá lékařská historie, užívání tabáku a jiných látek a zaměstnání.

Specifický cíl 1. Všem subjektům bude odebrána venózní krev a sérum bude odděleno, rozděleno na alikvoty a zmrazeno pro následnou analýzu. Sérový anti-SARS-CoV-2 vrcholový protein IgG bude měřen po očkování proti SARS-CoV-2 jedincům se sarkoidózou léčených a neléčených imunosupresivními léky a zdravých kontrol odpovídajících věku a pohlaví pomocí LIAISON SARS-CoV-2 TrimericS IgG test (Diasorin). Jedná se o vysoce citlivý a specifický test druhé generace pro IgG protilátky proti trimerní spike protein receptor vazebné doméně SARS-CoV-2. Test byl kalibrován proti samostatnému testu neutralizace viru SARS-CoV-2 s provozní charakteristickou plochou přijímače pod křivkou pro detekci protilátky s virovou neutralizační kapacitou 0,996. Test Diasorin TrimericS IgG obdržel povolení pro nouzové použití od FDA dne 19. května 2021 a nahradí první generaci testu LIAISON SARS-CoV-2 S1/S2 IgG, který sám o sobě nejvíce koreluje s virovou neutralizační kapacitou mezi pěti komerčními SARS-CoV. -2 testy protilátek v nedávné studii. Je třeba poznamenat, že hladiny neutralizačních protilátek jsou vysoce prediktivní pro imunitní ochranu před symptomatickou infekcí SARS-CoV-2. Vzorky séra budou skladovány zmrazené při -80 °C a testovány jako šarže po dokončení registrace subjektu a získání vzorku.

Analýza síly: Extrapolace z údajů v nedávné studii protilátkových odpovědí na očkování proti SARS-CoV2 u pacientů s revmatickými onemocněními na imunosupresivních terapiích, online kalkulačka velikosti vzorku ClinCalc.com byla použita ke stanovení, že až 80 subjektů na skupinu bude zapotřebí k detekci 20% snížení průměrné hladiny protilátek v jedné ze sarkoidních skupin ve srovnání se zdravými kontrolami, se silou 0,80 při alfa 0,05.

Specifický cíl 2. Mononukleární buňky periferní krve (PBMC) budou izolovány z antikoagulované venózní krve 10 subjektů v každé ze dvou skupin sarkoidózy a zdravých kontrol pomocí Ficoll-Paque centrifugace, promyty, resuspendovány v 10% dimethylsulfoxidu/fetálním bovinním séru a kryokonzervovány při -80 °C. Aktivace CD4+ T buněk specifická pro SARS-CoV-2 bude testována pomocí PBMC od subjektů se sarkoidózou léčených a neléčených imunosupresivními léky a zdravých kontrol odpovídajících věku a pohlaví pomocí testu interferon-y EliSpotPLUS (Mabtech). PBMC budou stimulovány spikem SARS-CoV-2 a nukleokapsidovými proteinovými peptidovými pooly (BEI Resources) nebo protilátkou proti shluku diferenciace 3 (CD3) (Mabtech) jako pozitivní kontrolou, jak je popsáno (19). PBMC zůstanou kryokonzervovány při -80 °C, poté se rozmrazí, resuspendují v kultivačním médiu a testují jako šarže, když je registrace subjektu a získání vzorku dokončeno. Alternativně bude reakce T buněk na vakcinaci hodnocena v antikoagulované plné krvi pomocí testu SARS-CoV-2 QuantiFERON (Qiagen).

Statistická analýza. Význam rozdílů mezi průměry skupin bude stanoven analýzou rozptylu a Dunnettovým vícenásobným srovnávacím testem. P < 0,05 bude považováno za významné.