评估泰国成人感染间日疟原虫所需最小蚊子叮咬次数的临床研究 (MIST4)

受控人类疟疾感染（CHMI）已成为加速开发疟疾疫苗和治疗干预措施的重要方法。该方法涉及通过蚊虫叮咬或直接接种子孢子或寄生红细胞，将疟疾寄生虫接种到人类志愿者体内。CHMI有助于在受控良好的早期临床研究中评估候选疫苗和药物，从而能够在疟疾流行地区进一步评估最有希望的候选药物。

虽然此类研究可以采用寄生虫静脉注射，但通过蚊虫叮咬的自然感染途径具有显著优势，特别是在刺激皮肤感染部位的免疫反应，并紧密模拟自然感染过程，使肝脏和血液阶段的感染得以发展。此外，基于蚊虫的挑战模型为评估红细胞前（子孢子）候选疫苗提供了宝贵的平台。有效的子孢子疫苗预计能够诱导产生血清抗体，这些抗体能够在子孢子侵入肝细胞之前中和它们，从而预防肝脏阶段和血液阶段的疟疾。

历史上，包括沃尔特里德陆军研究所、Sanaria公司、马里兰大学、西雅图生物医学研究所、牛津大学和拉德堡德大学医学中心在内的知名研究中心已进行了大量使用恶性疟原虫感染的蚊虫叮咬或疟疾寄生虫的挑战研究。这些研究涉及大量人群，包括超过45项涉及恶性疟原虫感染蚊虫的试验。然而，使用间日疟原虫感染蚊虫叮咬的研究数量较少，仅有8项试验在哥伦比亚、英国和泰国等地区进行。

间日疟原虫是撒哈拉以南非洲以外最普遍的疟疾物种，是泰国等国家疟疾的重要原因。鉴于间日疟原虫在泰国和东南亚的巨大负担，一个国际合作研究团队提议在流行地区推进间日疟原虫疟疾候选疫苗的开发和评估。该计划旨在纳入具有与目标人群相似的遗传和免疫学特征的志愿者，从而确保研究结果的相关性和适用性。

泰国首个使用间日疟原虫子孢子感染的人类挑战研究，即“泰国疟疾感染研究1（MIST1）”，目前正在国际公认的疟疾研究专业机构——热带医学学院进行。该研究旨在评估间日疟原虫子孢子人类挑战在当地人群中的可行性和安全性。它代表了支持间日疟原虫流行地区有效疟疾疫苗开发和评估的关键里程碑。

大多数疟疾子孢子挑战研究（75%，52项研究中的39项）传统上依赖于五只感染蚊虫的叮咬来诱发疟疾。使用五只蚊虫叮咬的理由基于先前对恶性疟原虫的广泛经验，其中少于五只蚊虫接种的子孢子在无疟疾经验的志愿者中导致了不一致的感染。然而，这种模式似乎不适用于间日疟原虫感染的蚊虫，因为大多数研究显示使用2-4只蚊虫叮咬和5只蚊虫叮咬的感染率达到100%。一项使用间日疟原虫感染蚊虫的研究报告称，18名参与者中有1人在蚊虫挑战后未发展出疟疾感染。然而，由于该研究未测量抗疟药物水平，这一结果的原因仍不明确。值得注意的是，没有研究使用少至一只蚊虫叮咬来诱发间日疟原虫疟疾。

在自然条件下，个体很少每晚被超过一只感染蚊虫叮咬，除非在疟疾传播强度非常高的环境中。在泰缅边境的一个极低传播地点，最近一项研究报告每只蚊虫的几何平均子孢子数为57个（范围9-11,428个）。这与早期在非洲和巴布亚新几内亚的研究相比，那里流行率较高，几何平均数>4000个（范围150-10,000个）。感染概率随着感染叮咬次数的增加而增加。关于自然感染蚊虫中子孢子数量的数据相对较少。已证明，在剂量-反应关系中，高度感染的蚊虫比轻度感染的蚊虫更可能引起感染。

MIST1研究最初采用五只蚊虫叮咬，以确保在六名志愿者的小型队列中实现一致的感染。然而，使用五只蚊虫叮咬可能创造一个不切实际的挑战，并可能阻碍对真实疫苗效力的评估。MIST1研究中五名志愿者中有一名发展出间日疟原虫复发感染，这表明涉及五只间日疟原虫感染蚊虫的标准挑战可能导致过度感染。

本研究的主要目的是确定在健康个体中可靠诱发疟疾感染所需的最少间日疟原虫感染蚊虫叮咬次数。本研究将从两只蚊虫叮咬的挑战剂量开始，因为只有有限数量的研究评估了使用少至2-4只感染蚊虫的挑战模型，并且一些研究涉及小样本量。此外，没有研究使用少至一只蚊虫叮咬来诱发间日疟原虫疟疾。

研究者旨在确认1-3次叮咬是否足以持续诱发间日疟原虫感染，同时保持一个更接近自然传播的挑战模型，避免过度的寄生虫暴露，并可能削弱疫苗效力评估。如果接受两只蚊虫叮咬的至少一名志愿者未成功感染，研究者将增加挑战剂量至三只蚊虫叮咬。如果三只蚊虫叮咬后至少一名志愿者仍未感染，研究者将不会将挑战升级至四只蚊虫叮咬，因为从标准的五只减少到四只可能不会提供有意义的优势，正如指导委员会所建议。

该研究将为开发间日疟原虫蚊媒传递CHMI试验平台提供重要信息，使疟疾研究中的疫苗效力评估更安全、更准确。此外，在当地人群中进行该试验将增强研究结果在现实流行环境中的适用性。