10119473 -VIROMARKERS HDV 生物标志物研究

每位参与者在基线及BLV治疗期间每3个月（直至第96周）采集一次血样。 对于一部分参与者，还将获得治疗期间直至第144周采集的血样用于分析。 在每个时间点，使用临床研究中用于评估BLV疗效的参考方法RoboGene 2.0检测定量血清HDV-RNA [Wedemeyer等人，2023；Degasperi等人，J Hepatol 2025]。

对于在罗马Tor Vergata大学传染病与肝病科及米兰综合医院随访的80名参与者子集，将回顾性检测2023-2025年储存样本及2025-2028年新采集样本中的HDV RNA，使用Altona（AltoStar检测）、Qiagen和RoboGene 2.0方法。 这将比较这些检测方法的诊断性能及其预测第48周、第96周和第144周（子集）实现病毒学应答或HDV-RNA不可测的能力。 因此，在关联分析中将根据使用的定量方法进行单独分析。 将特别关注通过评估上述检测方法在治疗期间检测残留HDV病毒血症的能力来比较其灵敏度。

此外，在这约80名个体的子集中，将在以下时间点使用三种不同专门设计的ELISA检测定量三种不同HBsAg亚型（L-、M-和S-HBs）的水平：基线、第48周、第96周及选定患者的第144周。 这些检测方法已证明具有高灵敏度（每种蛋白的检测限为0.1 ng/ml）和高特异性，利用了分别基于抗PreS1、抗PreS2和抗S抗体的夹心系统。 对于每位患者及每个时间点，总HBsAg、L-HBs、M-HBs和S-HBs水平将进行重复定量。

在分析中，将根据欧洲肝脏研究协会推广的指南，每3个月评估每位入组参与者的病毒学状态，直至第144周。

本方案中使用储存临床标本的事项将由方案团队、VIROMARKERS科学指导委员会和EC Horizon Europe审查。

具体的次要目标包括：比较现有HDV-RNA定量检测方法的诊断性能；比较不同HDV-RNA检测方法在第48周、第96周和第144周血清HDV-RNA不可测率；比较BLV治疗期间使用不同HDV-RNA定量检测方法时HDV-RNA的动力学；评估HBsAg亚型水平（单独或与基线血清HDV-RNA结合）是否能预测第48周、第96周和第144周对BLV的病毒学应答实现；以及根据HDV基因型/亚型比较对BLV的病毒学应答率。

本研究关于CHD参与者的信息将被迅速分析并广泛共享，以指导政策制定者使用和监测对BLV的应答，并设计未来研究。

参与者选择 本研究将纳入220名于2023年1月至2025年2月期间开始BLV治疗的患者，这些患者有可用的回顾性数据和样本。 对于该人群，随访和样本采集将在研究资助期间延长。

要符合纳入研究的回顾性和前瞻性部分的条件，参与者必须年龄≥18岁、已签署知情同意书并满足以下附加标准：

诊断为慢性HDV感染，伴或不伴代偿性肝硬化；根据EASL推广的近期HDV感染临床实践指南中的标准，已开始BLV单药治疗（2mg/天）；在开始BLV时正接受核苷类似物有效治疗且HBV-DNA <20 IU/ml。

研究设计 这是一项主要为回顾性、部分前瞻性的观察性研究，将纳入于2023年至2025年3月期间开始BLV治疗的CHD患者。 参与者曾参与其他项目，且大多数已在这些研究中随访一段时间，将在签署参与VIROMARKERS的同意书时入组本新研究。

参与者已随访至少96周以评估病毒学应答实现情况。 前瞻性部分计划采用相似的纳入标准和随访，并进行额外的样本采集和检测（HBsAg亚型水平、HDV基因型/亚型），该部分将延长回顾性阶段已招募参与者的随访。 本方案未计划新的入组。

研究目标 主要和次要目标如下所列。

主要 从人口统计学、合并症和HDV疾病状态方面描述CHD个体特征；描述所有参与者在BLV治疗下的病毒学和临床病程；估计从开始BLV起第48周、第96周、第144周实现病毒学应答（定义为血清HDV RNA下降>2 log或HDV-RNA不可测）和HDV-RNA不可测的参与者比例；估计从开始BLV起第48周、第96周、第144周实现生化应答和联合应答（定义为实现病毒学应答且ALT正常化）的患者百分比；识别潜在的应答预测因素：基线HDV-RNA水平、前12周内HDV-RNA动力学；在研究人群子集中，测量HBsAg亚型水平（单独或与基线及随访期间血清HDV-RNA结合）以及基线HDV基因型/亚型。

次要 在研究人群中有多次测量的子集中，比较Robogene、Altona（AltoStar检测）和Qiagen的HDV-RNA定量检测方法的诊断性能，以WHO参考标准和已知血清HDV RNA的临床样本为对照。

通过使用不同的HDV-RNA定量检测方法，追踪和比较BLV治疗期间HDV-RNA的动力学。

比较不同HDV-RNA定量检测方法直至第144周的血清HDV-RNA不可测率。

样本量 回顾性部分的样本量已确定为220人。 预计在3年资助期内有进一步招募。 每年有多少参与者开始治疗不确定。 凭借现有基础设施，尽管是罕见病，需要治疗的患者招募将迅速进行，因此预测最多额外招募30人。

基于先前研究过且可能入组并随访于VIROMARKERS的个体人群，预计研究人群的中位年龄为50岁（范围30-70岁），性别分布相当，95%为欧洲裔。 多个国家的不同地理区域中心已参与。 相比之下，前瞻性样本将仅在意大利的项目中心采集：米兰综合医院大学和罗马（Tor Vergata大学）。

对于接受BLV治疗的CHD参与者，现有单一试验数据可用于估计第48周实现病毒学应答的参与者百分比，并确定研究与应答相关风险因素的功效。

统计考量总结如下。 研究中考虑二元及连续预测因素（如HDV RNA、HDV RNA斜率等）。 对于后者，功效通过比较该因素的最高与最低四分位数来估计。

在最近一项对244名CHD患者（SAVE-D研究）的分析中，48%实现HDV-RNA不可测，79%实现病毒学应答。 使用这些数据，假设100名参与者将实现血清HDV-RNA不可测，可分别以80%和90%功效检测到2.21和2.50的相对风险。 对于病毒学应答和ALT正常化（应答率更高），功效将更大。 预计在80名个体子集中测量HBsAg亚型，因此该分析对于OR在1.8-2.8范围内的功效将有限， 取决于新开始治疗者的入组率。

参与者选择 纳入标准

要符合入组条件，参与者必须：

年龄 > 18岁；签署知情同意书；诊断为HDV感染，伴或不伴代偿性肝硬化；根据EASL推广的近期HDV感染临床实践指南（EASL CPG 2023）中的标准，已开始BLV单药治疗（2mg/天）；在开始BLV时正接受核苷类似物有效治疗且HBV-DNA <20 IU/ml。 排除标准 失代偿性肝病；BLV联合聚乙二醇干扰素治疗；既往接受过BLV治疗。