10119473 - Estudio de Biomarcadores HDV VIROMARKERS

Para cada participante, se obtuvo una muestra de sangre al inicio y cada 3 meses durante el tratamiento con BLV hasta la semana 96. Para un subconjunto de participantes, las muestras de sangre recogidas hasta las 144 semanas de tratamiento también estarán disponibles para el análisis. En cada punto temporal, el ARN del VHD sérico se cuantificó con el ensayo de referencia RoboGene 2.0 utilizado en estudios clínicos destinados a evaluar la eficacia de BLV [Wedemeyer et al., 2023; Degasperi et al., J Hepatol 2025].

Para un subconjunto de 80 participantes seguidos en la Unidad de Enfermedades Infecciosas y Hepatología de la Universidad de Roma Tor Vergata y en el Policlínico de Milán, la cuantificación del ARN del VHD utilizando Altona (ensayos AltoStar), Qiagen y RoboGene 2.0 se realizará retrospectivamente en muestras almacenadas entre 2023-2025, así como en muestras recién recogidas entre 2025-2028. Esto permitirá comparar el rendimiento diagnóstico de estos ensayos y su capacidad para predecir el logro de respuesta virológica o ARN del VHD indetectable en la semana 48 y 96, y en la semana 144 en un subconjunto. Por lo tanto, para el análisis de asociación se realizarán análisis separados según el método de cuantificación utilizado. Se prestará especial atención a comparar la sensibilidad de los ensayos mencionados evaluando su capacidad para detectar viremia residual del VHD durante el tratamiento.

Además, en este subconjunto de aproximadamente 80 individuos, se cuantificarán los niveles de las tres isoformas diferentes del HBsAg (L-, M- y S-HBs) utilizando tres ensayos ELISA diseñados ad hoc en los siguientes puntos temporales: inicio, semanas 48, 96 y 144 para pacientes seleccionados. Se ha demostrado que estos ensayos tienen alta sensibilidad (el límite de detección para cada proteína es de 0,1 ng/ml) y alta especificidad, aprovechando un sistema sándwich basado en anticuerpos anti-PreS1, anti-PreS2 y anti-S, respectivamente. Para cada paciente y en cada punto temporal, los niveles de HBsAg total, L-HBs, M-HBs y S-HBs se cuantificarán por duplicado.

En el análisis, el estado virológico de cada participante inscrito se evaluará cada 3 meses según las directrices promovidas por la Asociación Europea para el Estudio del Hígado y hasta las 144 semanas.

El uso de especímenes clínicos almacenados dentro de este protocolo será revisado por el Equipo del Protocolo, el Comité Directivo Científico de VIROMARKERS y la CE Horizon Europe.

Los objetivos secundarios específicos incluyen comparar el rendimiento diagnóstico de los ensayos disponibles para la cuantificación del ARN del VHD; comparar las tasas de ARN del VHD sérico indetectable en las semanas 48, 96 y 144 mediante diferentes ensayos de ARN del VHD; comparar la cinética del ARN del VHD durante el tratamiento con BLV mediante diferentes ensayos para la cuantificación del ARN del VHD; evaluar si los niveles de las isoformas del HBsAg, solos o en combinación con el ARN del VHD sérico al inicio, pueden predecir el logro de respuesta virológica a BLV en las semanas 48, 96 y 144, y comparar la tasa de respuesta virológica a BLV según los genotipos/subgenotipos del VHD.

La información utilizada de este estudio sobre participantes con VHD crónico se analizará rápidamente y se compartirá ampliamente para guiar a los responsables de políticas en el uso y seguimiento de la respuesta a BLV y para diseñar estudios futuros.

Selección de Participantes El estudio incluirá a 220 pacientes que iniciaron BLV desde enero de 2023 hasta febrero de 2025 para los cuales hay datos y muestras retrospectivos disponibles. El seguimiento y la recogida de muestras se extenderán para esta población durante el período de la beca del estudio.

Para ser elegible para la inclusión tanto en la parte retrospectiva como prospectiva del estudio, los participantes deben tener ≥18 años de edad, haber firmado un consentimiento informado y cumplir los siguientes criterios adicionales:

Un diagnóstico de infección crónica por VHD con o sin cirrosis compensada Haber iniciado monoterapia con BLV 2mg/día según los criterios reportados en las recientes guías de práctica clínica sobre infección por VHD promovidas por EASL Estar bajo tratamiento efectivo con análogos de nucleósidos con ADN del VHB <20 UI/ml en el momento de iniciar BLV

Diseño del Estudio Este es un estudio observacional principalmente retrospectivo y parcialmente prospectivo que incluirá pacientes con VHD crónico que iniciaron BLV entre 2023 y marzo de 2025. Los participantes fueron inscritos en otros proyectos y la mayoría ya ha sido seguida durante algún tiempo como parte de estos estudios y serán inscritos en este nuevo estudio en el momento de firmar el consentimiento para participar en VIROMARKERS.

Los participantes han sido seguidos durante un mínimo de 96 semanas para el logro de respuesta virológica. Se planean criterios de inclusión similares y seguimiento con recogida y análisis adicional de muestras (niveles de isoformas del HBsAg, genotipos/subgenotipos del VHD) para la parte prospectiva, que abarca una extensión del seguimiento para aquellos ya reclutados en la fase retrospectiva. No se planean nuevas inscripciones para este protocolo.

Objetivos del Estudio Los objetivos primarios y secundarios se enumeran a continuación.

Primario Caracterizar a individuos con VHD crónico en términos de demografía, comorbilidades y estado de la enfermedad por VHD Describir el curso virológico y clínico bajo tratamiento con BLV para todos los participantes Estimar la proporción de participantes que logran una respuesta virológica (definida como una disminución del ARN del VHD sérico de >2 log o ARN del VHD indetectable) y ARN del VHD indetectable a las 48, 96, 144 semanas desde el inicio de BLV Estimar el porcentaje de pacientes que logran respuesta bioquímica y respuesta combinada (definida como logro de respuesta virológica y normalización de ALT) a las 48, 96, 144 semanas desde el inicio de BLV Identificar posibles predictores de respuesta: niveles de ARN del VHD al inicio, cinética del ARN del VHD durante las primeras 12 semanas En un subconjunto de la población del estudio, medir los niveles de isoformas del HBsAg, solos o en combinación con el ARN del VHD sérico al inicio y durante el seguimiento, y genotipos/subgenotipos del VHD al inicio.

Secundario En un subconjunto de la población del estudio con múltiples mediciones, comparar el rendimiento diagnóstico de los ensayos para la cuantificación del ARN del VHD por Robogene, Altona (ensayos AltoStar) y Qiagen, contra el estándar de referencia de la OMS y muestras clínicas con ARN del VHD sérico conocido.

Trazar y comparar la cinética del ARN del VHD durante el tratamiento con BLV utilizando diferentes ensayos para la cuantificación del ARN del VHD.

Comparar la tasa de ARN del VHD sérico indetectable hasta las 144 semanas mediante diferentes ensayos para la cuantificación del ARN del VHD.

Tamaño de la Muestra El tamaño de la muestra para la parte retrospectiva se cerró en 220 individuos. Se esperan más reclutamientos durante los 3 años de la beca. Es incierto cuántos participantes iniciarán tratamiento cada año. Con la infraestructura existente, el reclutamiento de pacientes que necesitan tratamiento será rápido aunque sea una enfermedad rara, por lo que el pronóstico es inscribir un máximo de 30 individuos adicionales.

Basándose en la población de individuos previamente estudiados y que pueden ser potencialmente inscritos y seguidos en VIROMARKERS, se espera tener una población de estudio con una mediana de edad de 50 años (rango 30-70) con una distribución de género comparable, 95% de origen europeo. Han participado sitios en diversas ubicaciones geográficas en varios países. Por el contrario, las muestras prospectivas se recogerán solo en Italia en los sitios del proyecto en el Policlínico de la Universidad de Milán y Roma (Universidad de Tor Vergata).

Para participantes con VHD crónico en BLV, existen datos de un único ensayo para estimar el porcentaje de participantes que lograrán respuesta virológica en la semana 48 y determinar el poder para estudiar factores de riesgo relacionados con la respuesta.

Las consideraciones estadísticas se resumen a continuación. En el estudio se consideran predictores tanto binarios como continuos, por ejemplo, ARN del VHD, pendiente del ARN del VHD, etc.). Para estos últimos, el poder se estimó comparando el cuartil superior frente al inferior del factor.

En un análisis reciente de 244 personas con VHD crónico (el estudio SAVE-D), el 48% logró ARN del VHD indetectable y el 79% respuesta virológica. Utilizando estos datos, se pueden detectar riesgos relativos de 2,21 y 2,50 con un poder del 80% y 90%, respectivamente, asumiendo que 100 participantes lograrán ARN del VHD sérico indetectable). Para la respuesta virológica y la normalización de ALT, que tienen tasas de respuesta más altas, el poder será mayor. Esperamos tener isoformas del HBsAg medidas en un subconjunto de 80 individuos, por lo que el poder será limitado para este análisis para ORs en el rango de 1,8-2,8, dependiendo de la tasa de inscripción de nuevos iniciadores.

Selección de Participantes Criterios de Inclusión

Para ser elegible para la inscripción, los participantes deben:

Tener > 18 años de edad Firmar un consentimiento informado Tener un diagnóstico de infección por VHD con o sin cirrosis compensada Haber iniciado monoterapia con BLV 2mg/día según los criterios reportados en las recientes guías de práctica clínica sobre infección por VHD promovidas por EASL (EASL CPG 2023) Estar bajo tratamiento efectivo con análogos de nucleósidos con ADN del VHB <20 UI/ml en el momento de iniciar BLV Criterios de Exclusión Enfermedad hepática descompensada BLV combinado con pegIFN Tratamiento previo con BLV