10119473 -VIROMARKERS HDV Biomarkørstudie

For hver deltager blev der taget en blodprøve ved baseline og hver 3. måned under BLV-behandling op til uge 96. For en undergruppe af deltagerne vil blodprøver indsamlet op til 144 ugers behandling også være tilgængelige til analyse. Ved hvert tidspunkt blev serum HDV-RNA kvantificeret med referenceanalysen RoboGene 2.0, der anvendes i kliniske studier med det formål at evaluere effektiviteten af BLV [Wedemeyer et al., 2023; Degasperi et al., J Hepatol 2025].

For en undergruppe på 80 deltagere fulgt op på Infektionssygdomme og Hepatologi-enheden på University of Rome Tor Vergata og på Policlinico i Milano, vil HDV RNA-kvantificering ved brug af Altona (AltoStar-analyser), Qiagen og RoboGene 2.0 blive udført retrospektivt på prøver opbevaret i 2023-2025 samt på nyligt indsamlede prøver i 2025-2028. Dette vil muliggøre en sammenligning af disse analysers diagnostiske ydeevne og deres evne til at forudsige opnåelse af virologisk respons eller ikke-påviselig HDV-RNA ved uge 48 og 96 samt ved uge 144 i en undergruppe. Derfor vil der til associationsanalysen blive udført separate analyser i henhold til den anvendte kvantificeringsmetode. Der vil blive lagt særlig vægt på at sammenligne følsomheden af de ovennævnte analyser ved at evaluere deres evne til at påvise residual HDV-viræmi under behandlingen.

Ligeledes vil niveauerne af de tre forskellige isoformer af HBsAg (L-, M- og S-HBs) på denne undergruppe på cirka 80 personer blive kvantificeret ved brug af tre forskellige ad-hoc-designede ELISA-analyser på følgende tidspunkter: baseline, 48 og 96 uger samt 144 uger for udvalgte patienter. Disse analyser har vist sig at have høj følsomhed (detektionsgrænse for hvert protein er 0,1 ng/ml) og høj specificitet ved at udnytte et sandwich-system baseret på henholdsvis anti-PreS1, anti-PreS2 og anti-S-antistoffer. For hver patient og for hvert tidspunkt vil total HBsAg, L-HBs, M-HBs og S-HBs-niveauer blive kvantificeret i duplikat.

I analysen vil hver indskrevne deltagers virologiske status blive vurderet hver 3. måned i henhold til retningslinjerne fremmet af European Association for the Study of the Liver og op til 144 uger.

Brugen af opbevarede kliniske prøver inden for denne protokol vil blive gennemgået af Protokolteamet, VIROMARKERS' Videnskabelige Styringsudvalg og EC Horizon Europe.

Specifikke sekundære mål omfatter at sammenligne de tilgængelige analysers diagnostiske ydeevne til HDV-RNA-kvantificering; sammenligne hyppigheden af ikke-påviseligt serum HDV-RNA ved uge 48, 96 og 144 ved forskellige HDV-RNA-analyser; sammenligne kinetikken for HDV-RNA under BLV-behandling ved forskellige analyser til HDV-RNA-kvantificering; evaluere om niveauerne af HBsAg-isoformer, alene eller i kombination med serum HDV-RNA ved baseline, kan forudsige opnåelse af virologisk respons på BLV ved uge 48, 96 og 144; og sammenligne hyppigheden af virologisk respons på BLV i henhold til HDV-genotyper/subgenotyper.

Oplysningerne fra denne undersøgelse om deltagere med CHD vil blive hurtigt analyseret og bredt delt for at vejlede beslutningstagere i anvendelsen og overvågningen af respons på BLV og til at designe fremtidige studier.

Deltagerselektion Undersøgelsen vil inkludere 220 patienter, der startede BLV fra januar 2023 til februar 2025, for hvem retrospektive data og prøver er tilgængelige. Opfølgning og prøveindsamling vil blive udvidet for denne population i løbet af studiebevillingens periode.

For at være berettiget til inklusion i både den retrospektive og prospektive del af undersøgelsen, skal deltagerne være ≥18 år, have underskrevet et informeret samtykke og opfylde følgende yderligere kriterier:

En diagnose på kronisk HDV-infektion med eller uden kompenseret cirrose At have startet BLV-monoterapi 2 mg/dag i henhold til kriterierne rapporteret i de seneste kliniske praksisretningslinjer for HDV-infektion fremmet af EASL At være under effektiv behandling med nukleosidanaloger med HBV-DNA <20 IU/ml på tidspunktet for start af BLV

Studiedesign Dette er et hovedsageligt retrospektivt og delvist prospektivt observationsstudie, der vil rekruttere patienter med CHD, der startede BLV i løbet af 2023-marts 2025. Deltagerne blev rekrutteret til andre projekter, og de fleste er allerede blevet fulgt i nogen tid som en del af disse studier og vil blive indskrevet i dette nye studie på tidspunktet for underskrivelse af samtykket til at deltage i VIROMARKERS.

Deltagerne er blevet fulgt i mindst 96 uger for opnåelse af virologisk respons. Lignende inklusionskriterier og opfølgning med yderligere prøveindsamling og testning (niveauer af HBsAg-isoformer, HDV-genotyper/subgenotyper) er planlagt til den prospektive del, der omfatter en udvidelse af opfølgningen for dem, der allerede er rekrutteret i den retrospektive fase. Der er ikke planlagt nye indskrivninger til denne protokol.

Studiemål Primære og sekundære mål er anført nedenfor.

Primært Karakterisere individer med CHD med hensyn til demografi, komorbiditeter og HDV-sygdomsstatus Beskrive den virologiske og kliniske forløb under behandling med BLV for alle deltagere Estimere andelen af deltagere, der opnår et virologisk respons (defineret som et fald i serum HDV RNA på >2 log eller ikke-påviselig HDV-RNA) og ikke-påviselig HDV-RNA inden 48, 96, 144 uger efter start af BLV Estimere procentdelen af patienter, der opnår biokemisk respons og kombineret respons (defineret som opnåelse af virologisk respons og ALT-normalisering) ved 48, 96, 144 uger efter start af BLV Identificere potentielle prædiktorer for respons: HDV-RNA-niveauer ved baseline, HDV-RNA-kinetik i løbet af de første 12 uger I en undergruppe af studiepopulationen, at måle niveauer af HBsAg-isoformer, alene eller i kombination med serum HDV-RNA ved baseline og under opfølgningen og HDV-genotyper/subgenotyper ved baseline.

Sekundært I en undergruppe af studiepopulationen med flere målinger, at sammenligne analysernes diagnostiske ydeevne til HDV-RNA-kvantificering ved Robogene, Altona (AltoStar-analyser) og Qiagen mod WHO-referencestandard og kliniske prøver med kendt serum HDV RNA.

At spore og sammenligne kinetikken for HDV-RNA under BLV-behandling ved at bruge forskellige analyser til HDV-RNA-kvantificering.

At sammenligne hyppigheden af ikke-påviseligt serum HDV-RNA op til 144 uger ved forskellige analyser til HDV-RNA-kvantificering.

Stikprøvestørrelse Stikprøvestørrelsen for den retrospektive del blev afsluttet ved 220 individer. Der forventes yderligere rekrutteringer i løbet af bevillingens 3 år. Det er usikkert, hvor mange deltagere der vil starte behandling hvert år. Med den infrastruktur, der er på plads, vil rekruttering af patienter, der har brug for behandling, være hurtig, selvom det er en sjælden sygdom, så prognosen er at rekruttere yderligere maksimalt 30 personer.

Baseret på populationen af tidligere studerede individer, der potentielt kan rekrutteres og følges op i VIROMARKERS, er forventningen at have en studiepopulation med en medianalder på 50 år (interval 30-70) med en sammenlignelig kønsfordeling, 95% af europæisk oprindelse. Steder på forskellige geografiske lokationer i flere lande har deltaget. Derimod vil de prospektive prøver kun blive indsamlet i Italien på projektstederne i Policlinico University of Milan og Rom (University of Tor Vergata).

For CHD-deltagere på BLV eksisterer der data fra et enkelt forsøg til at estimere procentdelen af deltagere, der vil opnå virologisk respons ved uge 48, og til at bestemme styrken for at studere risikofaktorer relateret til respons.

Statistiske overvejelser er sammenfattet nedenfor. I studiet betragtes binære såvel som kontinuerte prædiktorer, f.eks. HDV RNA, HDV RNA-hældning osv.). For sidstnævnte blev styrken estimeret ud fra sammenligning af den øverste versus den laveste kvartil af faktoren.

I en nylig analyse af 244 personer med CHD (SAVE-D-studiet) opnåede 48% ikke-påviselig HDV-RNA og 79% virologisk respons. Ved at bruge disse data kan relative risici på 2,21 og 2,50 påvises med henholdsvis 80% og 90% styrke, forudsat at 100 deltagere vil opnå ikke-påviseligt serum HDV-RNA). For virologisk respons og ALT-normalisering, som har højere responsrater, vil styrken være større. Vi forventer at have HBsAg-isoformer målt i en undergruppe på 80 individer, så styrken vil være begrænset for denne analyse for OR'er i intervallet 1,8-2,8, afhængigt af rekrutteringsraten for nye behandlingsstartende.

Deltagerselektion Inklusionskriterier

For at være berettiget til indskrivning skal deltagere:

Være > 18 år Underskrive et informeret samtykke Have en diagnose på HDV-infektion med eller uden kompenseret cirrose At have startet BLV-monoterapi 2 mg/dag i henhold til kriterierne rapporteret i de seneste kliniske praksisretningslinjer for HDV-infektion fremmet af EASL (EASL CPG 2023) At være under effektiv behandling med nukleosidanaloger med HBV-DNA <20 IU/ml på tidspunktet for start af BLV Eksklusionskriterier Dekompenseret leversygdom BLV kombineret med pegIFN Tidligere behandling med BLV