10119473 -VIROMARKERS HDV Biomarkers Studie

Voor elke deelnemer werd een bloedmonster afgenomen bij aanvang en elke 3 maanden tijdens BLV-behandeling tot week 96. Voor een subgroep deelnemers zullen ook bloedmonsters verzameld tot 144 weken behandeling beschikbaar zijn voor analyse. Op elk tijdstip werd serum HDV-RNA gekwantificeerd met de referentie RoboGene 2.0-test gebruikt in klinische studies gericht op het evalueren van de werkzaamheid van BLV [Wedemeyer et al., 2023; Degasperi et al., J Hepatol 2025].

Voor een subgroep van 80 deelnemers die werden opgevolgd op de afdeling Infectieziekten en Hepatologie van de Universiteit van Rome Tor Vergata en het Policlinico van Milaan, zal HDV RNA-kwantificatie met Altona (AltoStar-testen), Qiagen en RoboGene 2.0 retrospectief worden uitgevoerd op monsters opgeslagen in 2023-2025 evenals op nieuw verzamelde monsters in 2025-2028. Dit zal een vergelijking mogelijk maken van de diagnostische prestaties van deze testen en hun vermogen om het bereiken van virologische respons of ondetecteerbaar HDV-RNA op week 48 en 96 en op week 144 in een subgroep te voorspellen. Daarom zullen voor de associatieanalyse afzonderlijke analyses worden uitgevoerd volgens de gebruikte kwantificatiemethode. Bijzondere aandacht zal worden besteed aan het vergelijken van de gevoeligheid van de bovengenoemde testen door hun vermogen te evalueren om resterende HDV-viremie tijdens behandeling te detecteren.

Ook zullen bij deze subgroep van ongeveer 80 personen de niveaus van de drie verschillende isoformen van HBsAg (L-, M- en S-HBs) worden gekwantificeerd met behulp van drie verschillende ad-hoc ontworpen ELISA-testen op de volgende tijdstippen: aanvang, 48 en 96 weken en 144 weken voor geselecteerde patiënten. Van deze testen is aangetoond dat ze een hoge gevoeligheid hebben (detectielimiet voor elk eiwit is 0,1 ng/ml) en een hoge specificiteit, gebruikmakend van een sandwichesysteem gebaseerd op respectievelijk anti-PreS1, anti-PreS2 en anti-S antilichamen. Voor elke patiënt en voor elk tijdstip zullen totaal HBsAg, L-HBs, M-HBs en S-HBs niveaus in duplo worden gekwantificeerd.

In de analyse zal de virologische status van elke ingeschreven deelnemer elke 3 maanden worden beoordeeld volgens de richtlijnen gepromoot door de European Association for the Study of the Liver en tot 144 weken.

Het gebruik van opgeslagen klinische monsters binnen dit protocol zal worden beoordeeld door het Protocollteam, de VIROMARKERS Wetenschappelijke Stuurgroep en EC Horizon Europe.

Specifieke secundaire doelstellingen omvatten het vergelijken van de diagnostische prestaties van beschikbare testen voor HDV-RNA-kwantificatie; het vergelijken van de percentages ondetecteerbaar serum HDV-RNA op week 48, 96 en 144 door verschillende HDV-RNA-testen; het vergelijken van de kinetiek van HDV-RNA tijdens BLV-behandeling door verschillende testen voor HDV-RNA-kwantificatie; evalueren of de niveaus van HBsAg-isoformen, alleen of in combinatie met serum HDV-RNA bij aanvang, het bereiken van virologische respons op BLV op week 48, 96 en 144 kunnen voorspellen en het vergelijken van de snelheid van virologische respons op BLV volgens HDV-genotypen/subgenotypen.

De informatie uit deze studie over deelnemers met CHD zal snel worden geanalyseerd en breed gedeeld om beleidsmakers te begeleiden bij het gebruik en monitoren van respons op BLV en om toekomstige studies te ontwerpen.

Deelnemersselectie De studie zal 220 patiënten omvatten die BLV startten van januari 2023 tot februari 2025 voor wie retrospectieve gegevens en monsters beschikbaar zijn. Opvolging en monstercollectie zullen voor deze populatie worden uitgebreid over de periode van de studietoelage.

Om in aanmerking te komen voor inclusie in zowel het retrospectieve als prospectieve deel van de studie, moeten deelnemers ≥18 jaar oud zijn, een geïnformeerde toestemming hebben ondertekend en voldoen aan de volgende aanvullende criteria:

Een diagnose van chronische HDV-infectie met of zonder gecompenseerde cirrose BLV-monotherapie 2mg/dag zijn gestart volgens de criteria vermeld in de recente klinische praktijkrichtlijnen over HDV-infectie gepromoot door EASL Onder effectieve behandeling zijn met nucleoside-analogen met HBV-DNA <20 IU/ml op het moment van starten BLV

Studieontwerp Dit is een voornamelijk retrospectieve en gedeeltelijk prospectieve observationele studie die patiënten met CHD zal inschrijven die BLV startten over 2023-maart 2025. Deelnemers werden ingeschreven in andere projecten en de meesten zijn reeds enige tijd opgevolgd als onderdeel van deze studies en zullen worden ingeschreven in deze nieuwe studie op het moment van ondertekenen van de toestemming om deel te nemen aan VIROMARKERS.

Deelnemers zijn minimaal 96 weken opgevolgd voor het bereiken van virologische respons. Vergelijkbare inclusiecriteria en opvolging met aanvullende monstercollectie en testen (niveaus van HBsAg-isoformen, HDV-genotypen/subgenotypen) zijn gepland voor het prospectieve deel dat een verlenging van opvolging omvat voor diegenen die al zijn gerekruteerd in de retrospectieve fase. Er zijn geen nieuwe inschrijvingen gepland voor dit protocol.

Studiedoelstellingen Primaire en secundaire doelstellingen worden hieronder vermeld.

Primair Karakteriseer individuen met CHD in termen van demografie, comorbiditeiten en HDV-ziektestatus Beschrijf het virologische en klinische beloop onder behandeling met BLV voor alle deelnemers Schat het aandeel deelnemers dat een virologische respons bereikt (gedefinieerd als een daling in serum HDV RNA van >2 log of ondetecteerbaar HDV-RNA) en ondetecteerbaar HDV-RNA tegen 48, 96, 144 weken na start BLV Schat het percentage patiënten dat biochemische respons en gecombineerde respons bereikt (gedefinieerd als het bereiken van virologische respons en ALT-normalisatie) op 48, 96, 144 weken na start BLV Identificeer potentiële voorspellers van respons: HDV-RNA-niveaus bij aanvang, HDV-RNA-kinetiek tijdens de eerste 12 weken In een subgroep van de studiepopulatie, niveaus van HBsAg-isoformen meten, alleen of in combinatie met serum HDV-RNA bij aanvang en tijdens opvolging en HDV-genotypen/subgenotypen bij aanvang.

Secundair In een subgroep van de studiepopulatie met meerdere metingen, de diagnostische prestaties vergelijken van de testen voor HDV-RNA-kwantificatie door Robogene, Altona (AltoStar-testen) en Qiagen, tegen de WHO-referentiestandaard en klinische monsters met bekend serum HDV RNA.

De kinetiek van HDV-RNA tijdens BLV-behandeling traceren en vergelijken door gebruik te maken van verschillende testen voor HDV-RNA-kwantificatie.

Het percentage ondetecteerbaar serum HDV-RNA tot 144 weken vergelijken door verschillende testen voor HDV-RNA-kwantificatie.

Steekproefomvang Steekproefomvang voor het retrospectieve deel werd gesloten op 220 individuen. Er worden verdere rekruteringen verwacht over de 3 jaar van de toelage. Het is onzeker hoeveel deelnemers elk jaar behandeling zullen starten. Met de infrastructuur die aanwezig is, zal rekrutering van patiënten die behandeling nodig hebben snel verlopen hoewel het een zeldzame ziekte is, dus de voorspelling is om maximaal 30 extra individuen verder in te schrijven.

Gebaseerd op de populatie van individuen die eerder zijn bestudeerd en die potentieel kunnen worden ingeschreven en opgevolgd in VIROMARKERS, is de verwachting een studiepopulatie te hebben met een mediane leeftijd van 50 jaar (bereik 30-70) met een vergelijkbare geslachtsverdeling, 95% van Europese afkomst. Locaties in diverse geografische locaties in verschillende landen hebben deelgenomen. Daarentegen zullen de prospectieve monsters alleen in Italië worden verzameld op de projectlocaties in Policlinico Universiteit van Milaan en Rome (Universiteit van Tor Vergata).

Voor CHD-deelnemers op BLV bestaan gegevens van een enkele trial om het percentage deelnemers te schatten dat virologische respons zal bereiken tegen week 48 en om power te bepalen voor het bestuderen van risicofactoren gerelateerd aan respons.

Statistische overwegingen worden hieronder samengevat. In de studie worden zowel binaire als continue voorspellers overwogen, bv. HDV RNA, HDV RNA helling, etc.). Voor de laatste werd power geschat door de bovenste versus laagste kwartiel van de factor te vergelijken.

In een recente analyse van 244 personen met CHD (de SAVE-D-studie), bereikte 48% ondetecteerbaar HDV-RNA en 79% virologische respons. Met behulp van deze gegevens kunnen relatieve risico's van 2,21 en 2,50 worden gedetecteerd met respectievelijk 80% en 90% power, ervan uitgaande dat 100 deelnemers ondetecteerbaar serum HDV-RNA zullen bereiken). Voor virologische respons en ALT-normalisatie die hogere responspercentages hebben, zal de power groter zijn. We verwachten HBsAg-isoformen te hebben gemeten in een subgroep van 80 individuen, dus de power zal beperkt zijn voor deze analyse voor OR's in het bereik van 1,8-2,8, afhankelijk van de snelheid van inschrijving van nieuwe starters.

Deelnemersselectie Inclusiecriteria

Om in aanmerking te komen voor inschrijving moeten deelnemers:

> 18 jaar oud zijn Een geïnformeerde toestemming ondertekenen Een diagnose van HDV-infectie hebben met of zonder gecompenseerde cirrose BLV-monotherapie 2mg/dag zijn gestart volgens de criteria vermeld in de recente klinische praktijkrichtlijnen over HDV-infectie gepromoot door EASL (EASL CPG 2023) Onder effectieve behandeling zijn met nucleoside-analogen met HBV-DNA <20 IU/ml op het moment van starten BLV Exclusiecriteria Gedecompenseerde leverziekte BLV gecombineerd met pegIFN Eerdere behandeling met BLV