10119473 -VIROMARKERS HDV Biomarkers Studie

For hver deltaker ble det tatt en blodprøve ved oppstart og hver 3. måned under BLV-behandling opp til uke 96. For en undergruppe av deltakerne vil blodprøver samlet inn opp til 144 uker med behandling også være tilgjengelig for analyse. Ved hvert tidspunkt ble serum HDV-RNA kvantifisert med referanseassaysen RoboGene 2.0 som er brukt i kliniske studier med mål om å evaluere effekten av BLV [Wedemeyer et al., 2023; Degasperi et al., J Hepatol 2025].

For en undergruppe på 80 deltakere som ble fulgt opp ved Infeksjonssykdom og hepatologi-avdelingen ved Universitetet i Roma Tor Vergata og ved Policlinico i Milano, vil HDV RNA-kvantifisering ved bruk av Altona (AltoStar-assays), Qiagen og RoboGene 2.0 bli utført retrospektivt i prøver lagret i 2023-2025 samt i nylig innsamlede prøver i 2025-2028. Dette vil muliggjøre en sammenligning av de diagnostiske egenskapene til disse assaysene og deres evne til å forutsi oppnåelse av virologisk respons eller umålbart HDV-RNA ved uke 48 og 96 og ved uke 144 i en undergruppe. Derfor vil det for assosiasjonsanalysen bli utført separate analyser i henhold til den brukte kvantifiseringsmetoden. Spesielt oppmerksomhet vil bli viet til å sammenligne sensitiviteten til de ovennevnte assaysene ved å evaluere deres evne til å påvise gjenværende HDV-viremi under behandling.

Også i denne undergruppen på omtrent 80 personer vil nivåene av de tre forskjellige isoformene av HBsAg (L-, M- og S-HBs) bli kvantifisert ved bruk av tre forskjellige ad-hoc-designede ELISA-assays ved følgende tidspunkter: oppstart, 48 og 96 uker og 144 uker for utvalgte pasienter. Disse assaysene har vist seg å ha høy sensitivitet (deteksjonsgrensen for hvert protein er 0,1 ng/ml) og høy spesifisitet, ved å dra nytte av et sandwichsystem basert på henholdsvis anti-PreS1-, anti-PreS2- og anti-S-antistoffer. For hver pasient og for hvert tidspunkt vil totalt HBsAg, L-HBs, M-HBs og S-HBs-nivåer bli kvantifisert i duplikat.

I analysen vil den virologiske statusen til hver innmeldt deltaker bli vurdert hver 3. måned i henhold til retningslinjene fremmet av European Association for the Study of the Liver og opp til 144 uker.

Bruken av lagrede kliniske prøver innenfor dette protokollen vil bli vurdert av Protokollteamet, VIROMARKERS vitenskapelige styrekomité og EC Horizon Europe.

Spesifikke sekundære mål inkluderer å sammenligne de diagnostiske egenskapene til tilgjengelige assays for HDV-RNA-kvantifisering; sammenligne frekvensen av umålbart serum HDV-RNA ved uke 48, 96 og 144 med forskjellige HDV-RNA-assays; sammenligne kinetikken til HDV-RNA under BLV-behandling med forskjellige assays for HDV-RNA-kvantifisering; evaluere om nivåene av HBsAg-isoformer, alene eller i kombinasjon med serum HDV-RNA ved oppstart, kan forutsi oppnåelse av virologisk respons på BLV ved uke 48, 96 og 144 og sammenligne andelen virologisk respons på BLV i henhold til HDV-genotyper/subgenotyper.

Informasjonen fra denne studien om deltakere med kronisk HDV-infeksjon vil bli raskt analysert og bredt delt for å veilede beslutningstakere i bruken og overvåkningen av respons på BLV og for å utforme fremtidige studier.

Deltakervalg Studien vil inkludere 220 pasienter som startet BLV fra januar 2023 til februar 2025, og for hvem retrospektive data og prøver er tilgjengelige. Oppfølging og prøveinnsamling vil bli utvidet for denne populasjonen i løpet av studieperioden.

For å være kvalifisert for inkludering i både den retrospektive og prospektive delen av studien, må deltakerne være ≥18 år, ha signert et informert samtykke og oppfylle følgende tilleggskriterier:

En diagnose på kronisk HDV-infeksjon med eller uten kompensert cirrose Ha startet BLV-monoterapi 2mg/dag i henhold til kriteriene rapportert i de nylige kliniske praksisretningslinjene for HDV-infeksjon fremmet av EASL Være under effektiv behandling med nukleosidanaloger med HBV-DNA <20 IU/ml ved start av BLV

Studiedesign Dette er en hovedsakelig retrospektiv og delvis prospektiv observasjonsstudie som vil inkludere pasienter med kronisk HDV-infeksjon som startet BLV i perioden 2023-mars 2025. Deltakerne ble inkludert i andre prosjekter, og de fleste har allerede blitt fulgt en tid som en del av disse studiene, og vil bli inkludert i denne nye studien ved signering av samtykke til å delta i VIROMARKERS.

Deltakerne har blitt fulgt i minst 96 uker for oppnåelse av virologisk respons. Lignende inklusjonskriterier og oppfølging med tilleggsprøveinnsamling og testing (nivåer av HBsAg-isoformer, HDV-genotyper/subgenotyper) er planlagt for den prospektive delen, som omfatter en forlengelse av oppfølgingen for de som allerede er rekruttert i den retrospektive fasen. Ingen nye inkluderinger er planlagt for denne protokollen.

Studiemål Primære og sekundære mål er listet opp nedenfor.

Primære Karakterisere individer med kronisk HDV-infeksjon når det gjelder demografi, komorbiditeter og HDV-sykdomsstatus Beskrive den virologiske og kliniske forløpet under behandling med BLV for alle deltakere Estimere andelen deltakere som oppnår en virologisk respons (definert som en reduksjon i serum HDV RNA på >2 log eller umålbart HDV-RNA) og umålbart HDV-RNA innen 48, 96, 144 uker etter start av BLV Estimere prosentandelen av pasienter som oppnår biokjemisk respons og kombinert respons (definert som oppnåelse av virologisk respons og ALT-normalisering) ved 48, 96, 144 uker etter start av BLV Identifisere potensielle prediktorer for respons: HDV-RNA-nivåer ved oppstart, HDV-RNA-kinetikk i løpet av de første 12 ukene I en undergruppe av studiepopulasjonen, å måle nivåer av HBsAg-isoformer, alene eller i kombinasjon med serum HDV-RNA ved oppstart og under oppfølging og HDV-genotyper/subgenotyper ved oppstart.

Sekundære I en undergruppe av studiepopulasjonen med flere målinger, å sammenligne de diagnostiske egenskapene til assaysene for HDV-RNA-kvantifisering med Robogene, Altona (AltoStar-assays) og Qiagen, mot WHO-referansestandarden og kliniske prøver med kjent serum HDV RNA.

Å spore og sammenligne kinetikken til HDV-RNA under BLV-behandling ved å bruke forskjellige assays for HDV-RNA-kvantifisering.

Å sammenligne frekvensen av umålbart serum HDV-RNA opp til 144 uker med forskjellige assays for HDV-RNA-kvantifisering.

Utvalgsstørrelse Utvalgsstørrelsen for den retrospektive delen ble avsluttet ved 220 individer. Det forventes ytterligere rekruttering i løpet av de 3 årene med bevilgningen. Det er usikkert hvor mange deltakere som vil starte behandling hvert år. Med den infrastrukturen som er på plass, vil rekruttering av pasienter som trenger behandling være rask, selv om det er en sjelden sykdom, så prognosen er å inkludere maksimalt 30 ytterligere individer.

Basert på populasjonen av individer som tidligere er studert og som potensielt kan inkluderes og følges opp i VIROMARKERS, er forventningen å ha en studiepopulasjon med en medianalder på 50 år (område 30-70) med en sammenlignbar kjønnsfordeling, 95 % av europeisk opprinnelse. Steder i ulike geografiske beliggenheter i flere land har deltatt. Derimot vil de prospektive prøvene kun bli samlet inn i Italia ved prosjektstedene i Policlinico Universitetet i Milano og Roma (Universitetet i Tor Vergata).

For deltakere med kronisk HDV-infeksjon på BLV, finnes det data fra en enkelt studie for å estimere prosentandelen av deltakere som vil oppnå virologisk respons innen uke 48 og for å bestemme styrken for å studere risikofaktorer relatert til respons.

Statistiske vurderinger er oppsummert nedenfor. I studien betraktes både binære og kontinuerlige prediktorer, f.eks. HDV RNA, HDV RNA-helning, etc.). For de sistnevnte ble styrken estimert fra å sammenligne den øverste versus laveste kvartilen av faktoren.

I en nylig analyse av 244 personer med kronisk HDV-infeksjon (SAVE-D-studien), oppnådde 48 % umålbart HDV-RNA og 79 % virologisk respons. Ved å bruke disse dataene kan relative risikofaktorer på 2,21 og 2,50 påvises med henholdsvis 80 % og 90 % styrke, forutsatt at 100 deltakere vil oppnå umålbart serum HDV-RNA). For virologisk respons og ALT-normalisering, som har høyere responsrater, vil styrken være større. Vi forventer å ha HBsAg-isoformer målt i en undergruppe på 80 individer, så styrken vil være begrenset for denne analysen for OR-er i området 1,8-2,8, avhengig av rekrutteringsraten for nye som starter behandling.

Deltakervalg Inklusjonskriterier

For å være kvalifisert for inkludering må deltakerne:

Være > 18 år Signere et informert samtykke Ha en diagnose på HDV-infeksjon med eller uten kompensert cirrose Ha startet BLV-monoterapi 2mg/dag i henhold til kriteriene rapportert i de nylige kliniske praksisretningslinjene for HDV-infeksjon fremmet av EASL (EASL CPG 2023) Være under effektiv behandling med nukleosidanaloger med HBV-DNA <20 IU/ml ved start av BLV Eksklusjonskriterier Dekompensert leversykdom BLV kombinert med pegIFN Tidligere behandling med BLV