10119473 -VIROMARKERS HDV Biomarker-Studie

Für jeden Teilnehmer wurde zu Beginn und alle 3 Monate während der BLV-Behandlung bis zur Woche 96 eine Blutprobe entnommen. Für eine Untergruppe von Teilnehmern stehen auch Blutproben, die bis zu 144 Wochen der Behandlung gesammelt wurden, für die Analyse zur Verfügung. An jedem Zeitpunkt wurde die Serum-HDV-RNA mit dem in klinischen Studien zur Bewertung der Wirksamkeit von BLV verwendeten Referenzassay RoboGene 2.0 quantifiziert [Wedemeyer et al., 2023; Degasperi et al., J Hepatol 2025].

Für eine Untergruppe von 80 Teilnehmern, die in der Abteilung für Infektionskrankheiten und Hepatologie der Universität Rom Tor Vergata und im Policlinico von Mailand nachbeobachtet wurden, wird die HDV-RNA-Quantifizierung mit Altona (AltoStar-Assays), Qiagen und RoboGene 2.0 retrospektiv in Proben durchgeführt, die 2023-2025 gelagert wurden, sowie in neu gesammelten Proben 2025-2028. Dies ermöglicht einen Vergleich der diagnostischen Leistungsfähigkeit dieser Assays und ihrer Fähigkeit, das Erreichen eines virologischen Ansprechens oder einer nicht nachweisbaren HDV-RNA in Woche 48 und 96 sowie in Woche 144 in einer Untergruppe vorherzusagen. Daher werden für die Assoziationsanalyse separate Analysen entsprechend der verwendeten Quantifizierungsmethode durchgeführt. Besondere Aufmerksamkeit wird dem Vergleich der Sensitivität der oben genannten Assays gewidmet, indem ihre Fähigkeit bewertet wird, eine residuelle HDV-Virämie während der Behandlung zu detektieren.

Auch bei dieser Untergruppe von etwa 80 Personen werden die Spiegel der drei verschiedenen Isoformen von HBsAg (L-, M- und S-HBs) unter Verwendung von drei verschiedenen ad-hoc entwickelten ELISA-Assays zu folgenden Zeitpunkten quantifiziert: zu Beginn, in Woche 48 und 96 sowie in Woche 144 für ausgewählte Patienten. Diese Assays haben sich als hochsensitiv (Nachweisgrenze für jedes Protein beträgt 0,1 ng/ml) und hochspezifisch erwiesen, wobei ein Sandwich-System basierend auf Anti-PreS1-, Anti-PreS2- bzw. Anti-S-Antikörpern genutzt wird. Für jeden Patienten und jeden Zeitpunkt werden Gesamt-HBsAg, L-HBs, M-HBs und S-HBs-Spiegel in Doppelbestimmung quantifiziert.

In der Analyse wird der virologische Status jedes eingeschlossenen Teilnehmers alle 3 Monate gemäß den von der European Association for the Study of the Liver geförderten Leitlinien und bis zu 144 Wochen bewertet.

Die Verwendung gelagerter klinischer Proben innerhalb dieses Protokolls wird vom Protokollteam, dem VIROMARKERS Scientific Steering Committee und EC Horizon Europe überprüft.

Spezifische sekundäre Ziele umfassen den Vergleich der diagnostischen Leistungsfähigkeit verfügbarer Assays zur HDV-RNA-Quantifizierung; den Vergleich der Raten nicht nachweisbarer Serum-HDV-RNA in Woche 48, 96 und 144 durch verschiedene HDV-RNA-Assays; den Vergleich der Kinetik der HDV-RNA während der BLV-Behandlung durch verschiedene Assays zur HDV-RNA-Quantifizierung; die Bewertung, ob die Spiegel der HBsAg-Isoformen, allein oder in Kombination mit Serum-HDV-RNA zu Beginn, das Erreichen eines virologischen Ansprechens auf BLV in Woche 48, 96 und 144 vorhersagen können, und den Vergleich der Rate des virologischen Ansprechens auf BLV gemäß HDV-Genotypen/Subgenotypen.

Die aus dieser Studie zu Teilnehmern mit CHD gewonnenen Informationen werden schnell analysiert und breit geteilt, um politische Entscheidungsträger bei der Anwendung und Überwachung des Ansprechens auf BLV zu leiten und zukünftige Studien zu entwerfen.

Teilnehmerauswahl Die Studie wird 220 Patienten einschließen, die BLV von Januar 2023 bis Februar 2025 begonnen haben, für die retrospektive Daten und Proben verfügbar sind. Die Nachbeobachtung und Probenentnahme wird für diese Population über den Zeitraum des Studienzuschusses verlängert.

Um für die Einschließung in sowohl den retrospektiven als auch den prospektiven Teil der Studie berechtigt zu sein, müssen Teilnehmer ≥18 Jahre alt sein, eine informierte Einwilligung unterschrieben haben und die folgenden zusätzlichen Kriterien erfüllen:

Eine Diagnose einer chronischen HDV-Infektion mit oder ohne kompensierte Zirrhose Begonnen haben mit BLV-Monotherapie 2mg/Tag gemäß den in den kürzlich veröffentlichten klinischen Praxisleitlinien zur HDV-Infektion, gefördert von EASL, berichteten Kriterien Unter effektiver Behandlung mit Nukleosidanaloga mit HBV-DNA <20 IU/ml zum Zeitpunkt des Beginns von BLV stehen

Studiendesign Dies ist eine hauptsächlich retrospektive und teilweise prospektive Beobachtungsstudie, die Patienten mit CHD einschließen wird, die BLV über 2023-März 2025 begonnen haben. Teilnehmer wurden in andere Projekte eingeschlossen und die meisten wurden bereits einige Zeit im Rahmen dieser Studien nachbeobachtet und werden in diese neue Studie zum Zeitpunkt der Unterzeichnung der Einwilligung zur Teilnahme an VIROMARKERS eingeschlossen.

Teilnehmer wurden mindestens 96 Wochen lang auf das Erreichen eines virologischen Ansprechens nachbeobachtet. Ähnliche Einschlusskriterien und Nachbeobachtung mit zusätzlicher Probenentnahme und -testung (Spiegel von HBsAg-Isoformen, HDV-Genotypen/Subgenotypen) sind für den prospektiven Teil geplant, der eine Verlängerung der Nachbeobachtung für diejenigen umfasst, die bereits in der retrospektiven Phase rekrutiert wurden. Für dieses Protokoll sind keine neuen Einschreibungen geplant.

Studienziele Primäre und sekundäre Ziele sind unten aufgeführt.

Primär Charakterisierung von Personen mit CHD hinsichtlich Demografie, Komorbiditäten und HDV-Krankheitsstatus Beschreibung des virologischen und klinischen Verlaufs unter Behandlung mit BLV für alle Teilnehmer Schätzung des Anteils der Teilnehmer, die ein virologisches Ansprechen (definiert als ein Abfall der Serum-HDV-RNA um >2 log oder nicht nachweisbare HDV-RNA) und nicht nachweisbare HDV-RNA bis 48, 96, 144 Wochen nach Beginn von BLV erreichen Schätzung des Prozentsatzes der Patienten, die ein biochemisches Ansprechen und kombiniertes Ansprechen (definiert als Erreichen eines virologischen Ansprechens und ALT-Normalisierung) in Woche 48, 96, 144 nach Beginn von BLV erreichen Identifizierung potenzieller Prädiktoren des Ansprechens: HDV-RNA-Spiegel zu Beginn, HDV-RNA-Kinetik während der ersten 12 Wochen In einer Untergruppe der Studienpopulation, Messung der Spiegel von HBsAg-Isoformen, allein oder in Kombination mit Serum-HDV-RNA zu Beginn und während der Nachbeobachtung und HDV-Genotypen/Subgenotypen zu Beginn.

Sekundär In einer Untergruppe der Studienpopulation mit mehrfachen Messungen, Vergleich der diagnostischen Leistungsfähigkeit der Assays zur HDV-RNA-Quantifizierung durch Robogene, Altona (AltoStar-Assays) und Qiagen, gegen den WHO-Referenzstandard und klinische Proben mit bekannter Serum-HDV-RNA.

Verfolgung und Vergleich der Kinetik der HDV-RNA während der BLV-Behandlung durch Verwendung verschiedener Assays zur HDV-RNA-Quantifizierung.

Vergleich der Rate nicht nachweisbarer Serum-HDV-RNA bis zu 144 Wochen durch verschiedene Assays zur HDV-RNA-Quantifizierung.

Stichprobengröße Die Stichprobengröße für den retrospektiven Teil wurde auf 220 Personen festgelegt. Weitere Rekrutierungen über die 3 Jahre des Zuschusses werden erwartet. Es ist ungewiss, wie viele Teilnehmer jährlich die Behandlung beginnen werden. Mit der vorhandenen Infrastruktur wird die Rekrutierung von Patienten, die eine Behandlung benötigen, schnell erfolgen, obwohl es sich um eine seltene Krankheit handelt, daher ist die Prognose, maximal 30 zusätzliche Personen weiter einzuschließen.

Basierend auf der Population zuvor untersuchter Personen, die potenziell in VIROMARKERS eingeschlossen und nachbeobachtet werden können, wird erwartet, eine Studienpopulation mit einem medianen Alter von 50 Jahren (Bereich 30-70) mit einer vergleichbaren Geschlechterverteilung zu haben, 95% europäischer Herkunft. Standorte in verschiedenen geografischen Regionen in mehreren Ländern haben teilgenommen. Im Gegensatz dazu werden die prospektiven Proben nur in Italien an den Projektstandorten im Policlinico der Universität Mailand und Rom (Universität Tor Vergata) gesammelt.

Für CHD-Teilnehmer unter BLV existieren Daten aus einer einzigen Studie, um den Prozentsatz der Teilnehmer zu schätzen, die bis Woche 48 ein virologisches Ansprechen erreichen werden, und um die Power für die Untersuchung von Risikofaktoren im Zusammenhang mit dem Ansprechen zu bestimmen.

Statistische Überlegungen sind unten zusammengefasst. In der Studie werden sowohl binäre als auch kontinuierliche Prädiktoren betrachtet, z.B. HDV-RNA, HDV-RNA-Steigung, usw.). Für letztere wurde die Power aus dem Vergleich des obersten versus niedrigsten Quartils des Faktors geschätzt.

In einer kürzlichen Analyse von 244 Personen mit CHD (die SAVE-D-Studie) erreichten 48% eine nicht nachweisbare HDV-RNA und 79% ein virologisches Ansprechen. Unter Verwendung dieser Daten können relative Risiken von 2,21 und 2,50 mit 80% bzw. 90% Power detektiert werden, unter der Annahme, dass 100 Teilnehmer eine nicht nachweisbare Serum-HDV-RNA erreichen werden). Für virologisches Ansprechen und ALT-Normalisierung, die höhere Ansprechraten aufweisen, wird die Power größer sein. Wir erwarten, HBsAg-Isoformen in einer Untergruppe von 80 Personen gemessen zu haben, daher wird die Power für diese Analyse für ORs im Bereich von 1,8-2,8 begrenzt sein, abhängig von der Rate der Einschreibung neuer Initiierender.

Teilnehmerauswahl Einschlusskriterien

Um für die Einschreibung berechtigt zu sein, müssen Teilnehmer:

Älter als 18 Jahre sein Eine informierte Einwilligung unterschreiben Eine Diagnose einer HDV-Infektion mit oder ohne kompensierte Zirrhose haben Begonnen haben mit BLV-Monotherapie 2mg/Tag gemäß den in den kürzlich veröffentlichten klinischen Praxisleitlinien zur HDV-Infektion, gefördert von EASL (EASL CPG 2023), berichteten Kriterien Unter effektiver Behandlung mit Nukleosidanaloga mit HBV-DNA <20 IU/ml zum Zeitpunkt des Beginns von BLV stehen Ausschlusskriterien Dekompensierte Lebererkrankung BLV kombiniert mit pegIFN Frühere Behandlung mit BLV