Genetická predispozice - Chronická nefrotoxicita od příjemců transplantace jater CI - Potenciální korelace - Močové biomarkery

Studovat design:

Tato studie bude průřezovým šetřením příjemců transplantátu jater, kteří podstoupili transplantaci jater a mají alespoň 6 měsíců sledování. Tato studie bude provedena v Northwestern Memorial Hospital, Northwestern Medical Faculty Foundation a Northwestern University.

Pacienti, kteří podstoupili transplantaci jater a byli sledováni alespoň 6 měsíců, dostávají udržovací imunosupresi (která se skládá z inhibitorů kalcineurinu (CI), cyklosporinu (CsA) nebo takrolimu (Tac)) během celého období sledování po transplantaci budou zahrnuty do analýzy.

Pro každého pacienta budou shromážděny následující informace:

• Datum transplantace, věk, pohlaví, rasa, příčiny selhání jater, anamnéza včetně výskytu hypertenze, diabetes mellitus, pooperační komplikace, pooperační infekce, počet epizod akutní rejekce jater, úmrtí, minimální hladiny CsA a Tac v různých časových bodech po transplantaci a hladiny sCr před transplantací jater, 1, 6, 12, 24 měsíců a ročně po transplantaci.
• GFR (Glomerular Filtration Rate) s rovnicí MDRD před transplantací jater, 1, 6, 12, 24 měsíců a každý rok po transplantaci.
• Ve snaze vyloučit všechny pacienty s již existujícím CRF před transplantací jater, pouze pacienti s sCr < 1,0 mg/dl před transplantací jater budou zahrnuty do naší analýzy.

Genotypizace:

• DNA bude extrahována pomocí krevních buffy coat od příjemců transplantátu jater.
• Určení genotypů ACE bude provedeno pomocí primerů specifických pro sekvenci polymerázové řetězové reakce (PCR-SSP) a polymorfismu délky restrikčních fragmentů polymerázové řetězové reakce (PCR-RFLP).
• Na základě výpočtu GRF pomocí rovnice MDRD budou pacienti po transplantaci jater rozděleni do tří skupin na základě NKF stadia chronického onemocnění ledvin:

Skupina I->normální GFR (>90ml/min/1,73m2). Fáze I CKD Skupina II->GFR mezi 30-59 ml/min/1,73 m2. Stupeň III CKD Skupina III->GFR mezi 15-29 ml/min/1,72 m2. Stádium IV CKD

• Všem pacientům ve 3 skupinách bude odebrána moč (80 ccm) a analyzována na biomarkery intersticiální fibrózy a poškození proximálního tubulu. Specifické biomarkery, které budou testovány, jsou: močový TGF-beta1, molekula-1 poškození ledvin a angiotenzinogen. Močové biomarkery budou normalizovány na kreatinin a analyzovány pomocí testu ELISA.
• Krev (20cc) bude odebrána při jedné návštěvě.
• Od všech subjektů bude požadován další odběr krve (18 ccm). Tato krev bude použita ke studiu tolerance transplantovaných orgánů u subjektů, které v současné době užívají imunosupresivní léky.

Statistický plán-Statistické testy, které mají být provedeny:

Jakmile jsou u pacientů po transplantaci jater genotypizovány a odebrány vzorky moči, porovnáme vývoj CKD po transplantaci jater pro asociace s močovými biomarkery a polymorfismy genu ACE. K porovnání rozdílů v spojitých proměnných mezi jaterními pacienty s různým stupněm CKD budou použity dva výběrové t testy; K porovnání rozdílů v diskrétních proměnných budou použity testy chi kvadrátu. Bude také provedena multivariabilní logistická regresní analýza k identifikaci kombinace klinických variabilních a genových polymorfismů, které jsou významně spojeny s rozvojem renální dysfunkce po transplantaci jater.

Tato studie nám umožní zjistit a zhodnotit potenciální genetickou predispozici pro rozvoj renální dysfunkce po expozici CI. Pokud je naše hypotéza správná, testování složky genotypů RAS může pomoci identifikovat pacienty s rizikem nefrotoxicity CI a pomoci při předvýběru kandidátů na transplantaci jater, u kterých je třeba se vyhnout použití CI jako primární imunosuprese.

Kromě toho mohou data získaná z této studie sloužit jako silný základ pro prospektivní projekt založený na NIH, který by se zabýval úlohou látek, které blokují systém renin-angiotenzin pro prevenci chronické nefrotoxicity vyvolané CI.