Genetische Veranlagung – chronische Nephrotoxizität von CI-Lebertransplantationsempfängern – potenzielle Korrelation – Urin-Biomarker

Studiendesign:

Bei dieser Studie handelt es sich um eine Querschnittsuntersuchung von Lebertransplantatempfängern, die eine Lebertransplantation erhalten haben und über eine Nachbeobachtungszeit von mindestens 6 Monaten verfügen. Diese Studie wird am Northwestern Memorial Hospital, der Northwestern Medical Faculty Foundation und der Northwestern University durchgeführt.

Patienten, die sich einer Lebertransplantation unterzogen haben und über eine Nachbeobachtungszeit von mindestens 6 Monaten verfügen und während der gesamten Nachbeobachtungszeit nach der Transplantation eine Erhaltungsimmunsuppression (die aus Calcineurin-Inhibitoren (CI), Cyclosporin (CsA) oder Tacrolimus (Tac) besteht) erhalten werden in die Analyse einbezogen.

Für jeden Patienten werden folgende Informationen erhoben:

• Datum der Transplantation, Alter, Geschlecht, Rasse, Ursachen von Leberversagen, medizinische Vorgeschichte einschließlich Auftreten von Bluthochdruck, Diabetes mellitus, postoperativen Komplikationen, postoperativen Infektionen, Anzahl der akuten Leberabstoßungsepisoden, Tod, CsA- und Tac-Talspiegel zu verschiedenen Zeitpunkten nach der Transplantation und sCr-Werte vor der Lebertransplantation, 1, 6, 12, 24 Monate und jährlich nach der Transplantation.
• GFR (glomeruläre Filtrationsrate) mit MDRD-Gleichung vor der Lebertransplantation, 1, 6, 12, 24 Monate und jährlich nach der Transplantation.
• Bei dem Versuch, alle Patienten mit vorbestehender CNI vor der Lebertransplantation auszuschließen, wurden nur die Patienten mit einem sCr < 1,0 mg/dl berücksichtigt vor einer Lebertransplantation werden in unsere Analyse einbezogen.

Genotypisierung:

• Die DNA wird mithilfe von Blut-Buffy-Coat von Lebertransplantatempfängern extrahiert.
• Die Bestimmung der ACE-Genotypen erfolgt unter Verwendung von sequenzspezifischen Polymerase-Kettenreaktions-Primern (PCR-SSP) und Restriktionsfragmentlängenpolymorphismus der Polymerase-Kettenreaktion (PCR-RFLP).
• Basierend auf der GRF-Berechnung anhand der MDRD-Gleichung werden Lebertransplantationspatienten basierend auf dem NKF-Stadium der chronischen Nierenerkrankung in drei Gruppen eingeteilt:

Gruppe I->normale GFR (>90 ml/min/1,73 m2). Stadium I CKD Gruppe II->GFR zwischen 30-59 ml/min/1,73 m2. Stadium III CKD Gruppe III->GFR zwischen 15-29 ml/min/1,72 m2. CKD im Stadium IV

• Urin (80 ml) wird von allen Patienten in den 3 Gruppen gesammelt und auf Biomarker für interstitielle Fibrose und Verletzung des proximalen Tubulus analysiert. Spezifische Biomarker, die getestet werden, sind: Urin-TGF-beta1, Nierenschädigungsmolekül-1 und Angiotensinogen. Urinbiomarker werden auf Kreatinin normalisiert und mithilfe eines ELISA-Assays analysiert.
• Bei einem Besuch wird Blut (20 ml) entnommen.
• Von allen Probanden wird eine zusätzliche Blutentnahme (18 ml) verlangt. Dieses Blut wird verwendet, um die Organtransplantationstoleranz bei Probanden zu untersuchen, die derzeit immunsuppressive Medikamente einnehmen.

Statistischer Plan – Durchzuführende statistische Tests:

Sobald Lebertransplantationspatienten genotypisiert und Urinproben entnommen sind, werden wir die Entwicklung von CKD nach Lebertransplantation auf Zusammenhänge mit Urinbiomarkern und Polymorphismen des ACE-Gens vergleichen. Zwei Stichproben-t-Tests werden verwendet, um Unterschiede in kontinuierlichen Variablen zwischen Leberpatienten mit unterschiedlichem CKD-Grad zu vergleichen; Chi-Quadrat-Tests werden verwendet, um Unterschiede in diskreten Variablen zu vergleichen. Außerdem wird eine multivariable logistische Regressionsanalyse durchgeführt, um die Kombination aus klinischen Variablen und Genpolymorphismen zu identifizieren, die signifikant mit der Entwicklung einer Nierenfunktionsstörung nach Lebertransplantation assoziiert sind.

Diese Studie wird es uns ermöglichen, die potenzielle genetische Veranlagung für die Entwicklung einer Nierenfunktionsstörung nach CI-Exposition zu ermitteln und zu bewerten. Wenn unsere Hypothese richtig ist, kann das Testen der Komponente des RAS-Genotyps dazu beitragen, Patienten mit einem Risiko für CI-Nephrotoxizität zu identifizieren und bei der Vorauswahl von Lebertransplantationskandidaten zu helfen, bei denen die Verwendung von CI als primäre Immunsuppression vermieden werden sollte.

Darüber hinaus könnten die aus dieser Studie generierten Daten als solide Grundlage für ein zukünftiges NIH-gegründetes Projekt dienen, das die Rolle von Wirkstoffen untersucht, die das Renin-Angiotensin-System bei der Prävention von CI-induzierter chronischer Nephrotoxizität blockieren.