Fortifikace železem a prebiotiky u keňských kojenců (Iro'n'Pre)

Padesát kojenců na skupinu bude zapsáno (n=150) a náhodně rozděleno do tří skupin, z těch identifikovaných ve vybraných vesnicích ve spádové oblasti Kikoneni Health Clinic v jižní pobřežní Keni, asi 2 hodiny jižně od Mombasy. U všech dětí, jejichž pečovatelé souhlasí s účastí ve studii, bude jejich stav železa hodnocen měřením hemoglobinu (Hb), erytrocytárního zinkového protoporfyrinu (ZPP), sérového feritinu (SF) a sérového transferinového receptoru (TfR). Zapsané subjekty budou náhodně rozděleny do tří skupin. Skupina 1 dostane samotný MNP, skupina 2 dostane identický MNP se železem (2,5 mg Fe jako NaFeEDTA a 2,5 mg jako fumarát železnatý) a skupina 3 dostane MNP se železem (2,5 mg Fe jako NaFeEDTA a 2,5 mg jako fumarát železnatý) a 7,5 mg galaktooligosacharidů jako GOS-75. Každá domácnost dostane 2 kg kukuřičného šrotu týdně a pečovatelům zúčastněných dětí bude ukázáno, jak připravit kukuřičnou kaši, která je nejrozšířenější místní doplňkovou potravinou. Toto kukuřičné jídlo bude poskytováno všem zúčastněným rodinám zdarma. Ošetřovatel přidá každý den jeden sáček MNP do porce kukuřičné kaše a celou porcí nakrmí dítě. Klinika Kikoneni bude sloužit jako odběrné místo pro MNP, monitorovací centrum pro dohled nad zdravím kojenců a také jako odběrné místo krve a stolice.

Na začátku a na konci intervence (po 4 měsících) bude kojencům odebrán vzorek krve pro měření Hb, SF, TfR a ZPP k určení anémie a stavu železa a C-reaktivního proteinu (CRP) k definování systémového stav zánětu. Kromě toho bude měřen sérový IgG proti spalničkám, protože kojenci dostanou své první očkování proti spalničkám v 9 měsících podle pokynů keňského ministerstva zdravotnictví. Na začátku, po 3 týdnech a po 4 měsících, bude odebrán vzorek stolice jak od kojence, tak od jeho matky za účelem měření střevní mikroflóry a střevního zánětu. Matky budou vyškoleny k odběru vzorků stolice doma. dodávaná nádoba s těsným šroubovacím víčkem, která obsahuje sáček Anerocult® pro vytvoření anaerobního prostředí. V těchto 3 časových bodech (základní stav, po 3 týdnech a po 4 měsících) matka přinese dva vzorky stolice ve stejný den, kde budou označeny a uchovávány při 4 °C. Vzorky budou poté přeneseny do centrální laboratoře, naplněny do 2ml Eppendorfových zkumavek, označeny a zmraženy při -20°C.

Během distribuce MNP bude navíc týdně hodnocena compliance a nemocnost. Děti budou zkontrolovány a odeslány ke zdravotníkům zdravotního střediska, kdykoli to bude indikováno klinickou anamnézou. V případě horečky bude podle místních směrnic proveden rychlý test na malárii (RTD). Pokud jsou výsledky testu pozitivní, bude dítě léčeno na předpokládanou malárii, mírné případy malárie budou léčeny na klinice Kikoneni podle pokynů WHO pro integrovaný management dětských nemocí (IMCI). Případy průjmu budou léčeny podle místního standardu péče včetně perorální rehydratační soli a v případě potřeby antibiotiky. Pokud to klinický management Kikoneni bude považovat za nutné, studijní tým podpoří kliniku v doplnění zásob ORS, doplňků železa a antimalarických léků po dobu trvání studie.

Antropometrie (hmotnost, výška, věk a pohlaví) bude zaznamenávána ve výchozím a koncovém bodě pomocí standardizovaných postupů pro výpočet prevalence zakrnění dětí. Měření se provedou dvakrát a průměr se použije pro analýzu dat. K výpočtu prevalence zakrnění u této kojenecké populace bude použit software pro analýzu dat WHO Anthro (WHO, Ženeva, Švýcarsko).

Abychom prozkoumali účinek perorálních antibiotik na střevní mikroflóru kojenců, vybereme prvních 12 kojenců z každé ze tří studijních skupin, kteří během studie onemocní a dostanou širokospektrální antibiotickou léčbu. Vybereme také 6 neléčených kontrol z každé studijní skupiny odpovídajících pohlaví a týdnům konzumace MNP. Do této dílčí studie bude zahrnuto celkem n=54 dětí a od vybraných dětí odebereme pět dalších vzorků stolice, abychom určili složení střevní mikroflóry. První vzorek stolice bude odebrán před zahájením antibiotické léčby (den 0). Poté bude vzorek stolice odebrán v den 5, 10, 20 a 40. Vzorky stolice budou odebírány, jak je popsáno výše. Kromě těchto dodatečných vzorků stolice děti pokračují v intervenci podle hlavního protokolu.

Vzorek mateřského mléka bude odebrán od 90 matek ve dvou časových bodech (3. týden a 16. týden). Tyto vzorky budou analyzovány na koncentraci oligosacharidů lidského mléka, potenciálního zdroje přírodních prebiotik.

Tři roky po ukončení studie bychom rádi prozkoumali stav železa a střevní mikrobiotu těchto dětí a určili, zda rozdíly pozorované po intervenci přetrvávají, nebo zda se všechny sbližují a mají podobný mikrobiomový profil. Kromě toho budeme měřit IgG proti spalničkám v séru, protože kojenci dostali druhou vakcínu proti spalničkám v 18 měsících podle pokynů keňského ministerstva zdravotnictví.