Fortyfikacja żelaza i prebiotyków u kenijskich niemowląt (Iro'n'Pre)

Pięćdziesiąt niemowląt na grupę zostanie zapisanych (n = 150) i losowo podzielonych na trzy grupy, spośród tych zidentyfikowanych w wybranych wioskach w obszarze zlewni Kliniki Zdrowia Kikoneni na południowym wybrzeżu Kenii, około 2 godzin na południe od Mombasy. U wszystkich dzieci, których opiekunowie wyrażą zgodę na udział w badaniu, zostanie zbadany poziom żelaza poprzez pomiar stężenia hemoglobiny (Hb), protoporfiryny cynku w erytrocytach (ZPP), ferrytyny w surowicy (SF) oraz receptora transferyny w surowicy (TfR). Zarejestrowani uczestnicy zostaną losowo podzieleni na trzy grupy. Grupa 1 otrzyma sam MNP, grupa 2 otrzyma identyczny MNP z żelazem (2,5 mg Fe jako NaFeEDTA i 2,5 mg jako fumaran żelazawy), a grupa 3 otrzyma MNP z żelazem (2,5 mg Fe jako NaFeEDTA i 2,5 mg jako fumaran żelazawy) i 7,5 mg galaktooligosacharydów jako GOS-75. Każde gospodarstwo domowe otrzyma 2 kg mąki kukurydzianej tygodniowo, a opiekunowie uczestniczących dzieci zostaną poinstruowani, jak przygotować kaszkę kukurydzianą, która jest najczęściej stosowaną lokalną żywnością uzupełniającą. Ta mączka kukurydziana zostanie przekazana bezpłatnie wszystkim uczestniczącym rodzinom. Opiekun codziennie będzie dodawać jedną saszetkę MNP do porcji kaszki kukurydzianej i podawać całą porcję niemowlęciu. Klinika Kikoneni będzie pełniła funkcję punktu pobrań dla MNP, centrum monitoringu stanu zdrowia niemowląt oraz punktu pobrań krwi i stolca.

Na początku i w punkcie końcowym interwencji (po 4 miesiącach) od niemowląt zostanie pobrana próbka krwi do pomiaru Hb, SF, TfR i ZPP w celu określenia niedokrwistości i poziomu żelaza oraz białka C-reaktywnego (CRP) w celu określenia ogólnoustrojowych stan zapalny. Ponadto będzie mierzona surowica IgG przeciwko odrze, ponieważ niemowlęta otrzymują pierwsze szczepienie przeciwko odrze w wieku 9 miesięcy, zgodnie z wytycznymi Ministerstwa Zdrowia Kenii. Na początku badania, po 3 tygodniach i po 4 miesiącach, zarówno od niemowlęcia, jak i jego matki zostanie pobrana próbka kału w celu pomiaru mikroflory jelitowej i stanu zapalnego jelit. Matki zostaną przeszkolone w zakresie pobierania próbek kału w domu w dostarczony pojemnik ze szczelną, zakręcaną pokrywką, który zawiera saszetkę Anerocult® do stworzenia środowiska beztlenowego. W tych 3 punktach czasowych (linia wyjściowa, po 3 tygodniach i po 4 miesiącach) matka przyniesie dwie próbki kału z tego samego dnia, gdzie zostaną one oznaczone i będą przechowywane w temperaturze 4°C. Próbki zostaną następnie przeniesione do centralnego laboratorium, napełnione 2 ml probówkami Eppendorfa, oznakowane i zamrożone w temperaturze -20°C.

Ponadto zgodność i zachorowalność będą oceniane co tydzień podczas dystrybucji MNP. Dzieci zostaną sprawdzone i skierowane do klinicystów ośrodka zdrowia, ilekroć będzie na to wskazywała historia kliniczna. W przypadku gorączki zostanie wykonany szybki test na malarię (RTD) zgodnie z lokalnymi wytycznymi. Jeśli wynik testu będzie pozytywny, dziecko będzie leczone na podejrzenie malarii, przypadki łagodnej malarii będą leczone w klinice Kikoneni zgodnie z wytycznymi WHO Integrated Management of Child Diseases (IMCI). Przypadki biegunki będą leczone zgodnie z lokalnymi standardami opieki, w tym doustną solą nawadniającą i, jeśli to konieczne, antybiotykami. Jeśli kierownictwo kliniki Kikoneni uzna to za konieczne, zespół badawczy będzie wspierał klinikę w uzupełnianiu zapasów ORS, suplementów żelaza i leków przeciwmalarycznych na czas trwania badania.

Antropometria (waga, wzrost, wiek i płeć) zostanie zarejestrowana na początku iw punkcie końcowym przy użyciu standardowych procedur w celu obliczenia częstości występowania karłowatości u dzieci. Pomiary zostaną wykonane dwukrotnie, a średnia posłuży do analizy danych. Oprogramowanie do analizy danych WHO Anthro (WHO, Genewa, Szwajcaria) zostanie wykorzystane do obliczenia rozpowszechnienia zahamowania wzrostu wśród tej populacji niemowląt.

Aby zbadać wpływ doustnych antybiotyków na mikroflorę jelitową niemowląt, wybierzemy pierwszych 12 niemowląt z każdej z trzech grup badawczych, które zachorują podczas badania i otrzymają antybiotykoterapię o szerokim spektrum działania. Wybierzemy również 6 nietraktowanych kontroli z każdej grupy badawczej dopasowanej do płci i tygodni spożycia MNP. W sumie n=54 dzieci zostanie włączonych do tego badania cząstkowego i pobierzemy od wybranych dzieci pięć dodatkowych próbek kału w celu określenia składu mikroflory jelitowej. Pierwsza próbka kału zostanie pobrana przed rozpoczęciem antybiotykoterapii (dzień 0). Następnie próbka kału zostanie pobrana w dniu 5, 10, 20 i 40. Próbki kału zostaną pobrane w sposób opisany powyżej. Oprócz tych dodatkowych próbek kału dzieci kontynuują interwencję zgodnie z głównym protokołem.

Próbka mleka matki zostanie pobrana od 90 matek w dwóch punktach czasowych (tydzień 3 i tydzień 16). Próbki te zostaną poddane analizie pod kątem stężenia oligosacharydów mleka kobiecego, potencjalnego źródła naturalnych prebiotyków.

Trzy lata po zakończeniu badania chcielibyśmy zbadać stan żelaza i mikroflorę jelitową tych dzieci i ustalić, czy różnice obserwowane po interwencji utrzymują się, czy też wszystkie zbiegają się i mają podobny profil mikrobiomu. Ponadto będziemy mierzyć przeciwciała przeciw odrze w surowicy IgG, ponieważ niemowlęta otrzymały drugą szczepionkę przeciw odrze w wieku 18 miesięcy zgodnie z wytycznymi Ministerstwa Zdrowia Kenii.