Vztah viscerálního tuku a souvisejících cytokinů s časnými kardiovaskulárními komplikacemi u diabetu 1. typu. (VISCERA)

Cíl: Zjistit, zda viscerální tuková tkáň (VAT) a její adipokiny přispívají k časným známkám kardiovaskulárního onemocnění, tj. kalcifikace koronárních tepen (CAC) a diastolické dysfunkce u diabetu 1. typu (T1DM).

Pacienti a metody:

Od června 2011 jsou přijímáni dospělí pacienti s T1DM ve věku 18-75 let, kteří pravidelně navštěvují diabetologickou ambulanci Fakultní nemocnice v Antverpách. Aby byli pacienti zahrnuti, musí mít trvání diabetu ≥ 5 let a být celkově v dobrém zdravotním stavu. Kritéria pro vyloučení jsou anamnéza závažné nežádoucí kardiovaskulární příhody (infarkt myokardu, cévní mozková příhoda), jiné kardiovaskulární potíže, těhotenství nebo rychlost glomerulární filtrace ≤30 ml/min/1,73 m².

Všichni účastníci podepíší informovaný souhlas. Tato studie je provedena v souladu s pozměněnou Helsinskou deklarací. Výzkumný protokol je schválen Etickou komisí Fakultní nemocnice v Antverpách (UZA 11/31/224, belgické registrační číslo: B30020111874).

Antropometrická měření:

Všechna měření se provádějí ráno po celonočním hladovění. Výška se měří s přesností na 0,5 cm pomocí nástěnného stadiometru a hmotnost se měří pomocí váhy s vyvažovacími paprsky se subjekty ve spodním prádle. Obvod pasu se měří ve střední úrovni mezi dolním okrajem žebra a hřebenem kyčelní kosti. Složení těla se hodnotí bioimpedanční analýzou (BIA) a procento tuku se vypočítá pomocí Deurenbergova vzorce. Viscerální abdominální tuková tkáň (VAT) a subkutánní abdominální tuková tkáň (SAT) jsou stanoveny skenováním 64 řezů počítačovou tomografií (CT) na úrovni L4-L5 (tloušťka řezu 0,6 mm).

Krevní tlak se měří standardizovanou metodou (Dynamap) po 10minutovém odpočinku a používá se průměr ze čtyř měření. Hypertenze je definována jako krevní tlak ≥130/85 mmHg nebo příjem antihypertenzních léků pacientem.

Přítomnost metabolického syndromu je hodnocena pomocí kritérií Mezinárodní diabetologické federace. Subjekty jsou klasifikovány jako osoby s metabolickým syndromem, pokud jsou splněna ≥3 z následujících kritérií: (1) zvýšený obvod pasu (muži ≥94 cm, ženy ≥80 cm), (2) hypertriglyceridémie (≥150 mg/dl=1,7 mmol/ l), (3) nízký HDL cholesterol (<40 mg/dl=1,03 mmol/l u mužů a <50 mg/dl=1,29 mmol/l u žen), (4) vysoký krevní tlak (≥130/85 mmHg), (5) vysoká hladina glukózy nalačno (≥100 mg/dl).

Inzulinová rezistence se stanoví pomocí převrácené hodnoty odhadované rychlosti likvidace glukózy (eGDR), vypočtené pomocí vzorce: : eGDR= 21,158 + (- 0,09 * obvod pasu) + (- 3,407 * hypertenze) + (- 0,551 * HbA1c).

Laboratorní měření:

HbA1C se stanoví vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií na zařízení Adams™ A1c HA-8160 8180, Arkray - Menarini (Zaventem, Belgie; referenční rozmezí: 4,8-6,0 %). K posouzení celkové metabolické kontroly za poslední dva roky se používá průměr ze čtyř ročních stanovení A1C. Plazmatické hladiny kreatininu, celkového cholesterolu, HDL cholesterolu a triglyceridů v séru se měří na systému Vitros 750 XRC (Ortho Clinical Diagnostic, Johnson & Johnson, Buckinghamshire, UK) Dimension Vista 1500 System (Siemens Healthcare Diagnostics, Huizingen, Belgie) s reagenciemi od stejného výrobce (REF K1270A pro kreatinin, REF K1027 pro celkový cholesterol, REF K3048A pro HDL-cholesterol, REF K2069 pro triglyceridy). HDL-C se měří na Hitachi 912 (Roche Diagnostics, Mannheim, Německo). Sérový kreatinin se měří enzymatickou metodou na Vitros 750 (Ortho Clinical Diagnostic, Beerse, Belgie). Rychlost glomerulární filtrace (eGFR) se odhaduje pomocí zkráceného vzorce MDRD, včetně korekčního faktoru 0,742 pro ženy. Plazmatické koncentrace HMW adiponektinu jsou měřeny enzymatickým imunosorbentním testem (ELISA) (EZHMWA-64K, Millipore, analytická citlivost 0,5 ng/ml, variační koeficient v rámci testu [CV] 7,47 %). Leptin se měří pomocí soupravy ELISA (HU Leptin kit, KAC2281, Life Technologies, citlivost 3,5 pg/ml, intra-test CV 5,75 %). TNF-a se testuje pomocí ELISA (HU TNF alfa kit, KHC3011, Life Technologies, citlivost 1,7 pg/ml, intra-assay CV 6,38 %) a koncentrace IL-6 se měří pomocí ELISA (HU IL-6 Chemiluminescence Elisa kit, KHC0069 , Life Technologies, citlivost 0,25 pg/ml, intra-assay CV 5,37 %).

Hodnocení komplikací:

Každý subjekt je hodnocen na přítomnost a závažnost komplikací. 24h-Urinary albumin se měří pomocí nefelometrie Dimension Vista 1500 System (Siemens Healthcare Diagnostics, Huizingen, Belgie) s činidly od stejného výrobce (REF K7062). pomocí Behring Nephelometer II (Siemens Healthcare Diagnostics Products, Marburg, Německo). Mikroalbuminurie je definována jako vylučování albuminu močí přesahující 20 µg/min. Obě krční tepny se vyšetřují pomocí duplexního skeneru karotid (General Electrics, Vivid 7 Pro), vybaveného 8-MHz sondou s vysokým rozlišením.

Pro měření kalcifikací koronárních arterií (CAC) se provádí nekontrastní multidetektorový CT sken s 64 řezy (Lightspeed, VCT; General Electric Medical Systems, Waukesha, Wis, Milwaukee, USA). Bodování provádí jeden zkušený radiolog (R. Salgado), který je zaslepený ke spisům subjektů. Typické zobrazovací parametry jsou: napětí elektronky 100 kv; intenzita proudu 310 mA; doba otáčení 500 ms; a kolimace detektoru 64 x 0,625 mm. Skenovaná data jsou rekonstruována v 75 % srdečního cyklu po komplexu QRS. Dávka záření pro vápníkové skóre se pohybuje v rozmezí 1,3-1,7 mSv. CAC se kvantifikuje (Agatstonovo skóre) pomocí speciální softwarové aplikace (SmartScore, AW). Agatstonovo skóre je součin plochy CAC krát hustota. Skóre <10 se považuje za normální. Skóre > 200 je silným prediktorem rizika KVO.

Standardní 2-rozměrná a dopplerovská echokardiografie (iE-33 Philips, Nizozemsko) je prováděna jediným kardiologem zaslepeným vůči klinickému stavu účastníků studie. Stručně řečeno, funkce levé komory je hodnocena pomocí parasternální dlouhé osy M-mode a modifikované biplane Simpsonovy metody. Diastolická funkce je stanovena s přihlédnutím ke všem následujícím parametrům: mitrální přítok, signál přítoku z plicní žíly a rychlosti dopplerovské (tD) mitrální prstencové tkáně z koncových výdechových cyklů podle doporučení ASE.