Relazione tra grasso viscerale e citochine associate con complicanze cardiovascolari precoci nel diabete di tipo 1. (VISCERA)

Obiettivo: indagare se il tessuto adiposo viscerale (VAT) e le sue adipochine contribuiscono ai primi segni di malattia cardiovascolare, ovvero calcificazioni dell'arteria coronaria (CAC) e disfunzione diastolica nel diabete di tipo 1 (T1DM).

Pazienti e metodi:

I pazienti adulti con T1DM, di età compresa tra 18 e 75 anni, che frequentano regolarmente la clinica ambulatoriale per il diabete dell'ospedale universitario di Anversa vengono reclutati a partire da giugno 2011. I pazienti devono avere una durata del diabete di ≥5 anni ed essere in buona salute generale per essere inclusi. I criteri di esclusione sono una storia di un evento cardiovascolare avverso maggiore (infarto del miocardio, ictus), altri disturbi cardiovascolari, gravidanza o una velocità di filtrazione glomerulare ≤30 ml/min/1,73 mq.

Tutti i partecipanti firmano un modulo di consenso informato. Questo studio è condotto in conformità con la Dichiarazione di Helsinki modificata. Il protocollo di ricerca è approvato dal comitato etico dell'ospedale universitario di Anversa (UZA 31/11/224, numero di registrazione belga: B30020111874).

Misure antropometriche:

Tutte le misurazioni vengono eseguite al mattino dopo un digiuno notturno. L'altezza viene misurata con l'approssimazione di 0,5 cm utilizzando uno stadiometro montato a parete e il peso viene misurato utilizzando una bilancia a trave di equilibrio con soggetti in mutande. La circonferenza della vita è misurata a livello medio tra il margine costale inferiore e la cresta iliaca. La composizione corporea viene valutata mediante analisi di bioimpedenza (BIA) e la percentuale di massa grassa viene calcolata utilizzando la formula di Deurenberg. Il tessuto adiposo addominale viscerale (VAT) e il tessuto adiposo addominale sottocutaneo (SAT) sono determinati mediante una tomografia computerizzata (TC) a 64 sezioni a livello L4-L5 (spessore della sezione 0,6 mm).

La pressione sanguigna viene rilevata con un metodo standardizzato (Dynamap) dopo 10 minuti di riposo e viene utilizzata una media di quattro misurazioni. L'ipertensione è definita come pressione arteriosa ≥130/85 mmHg o assunzione di farmaci antipertensivi da parte del paziente.

La presenza della sindrome metabolica viene valutata utilizzando i criteri della International Diabetes Federation. I soggetti sono classificati come affetti da sindrome metabolica se sono soddisfatti ≥3 dei seguenti criteri: (1) aumento della circonferenza della vita (uomini ≥94 cm, donne ≥80 cm), (2) ipertrigliceridemia (≥150 mg/dl=1,7 mmol/ l), (3) colesterolo HDL basso (<40 mg/dl=1,03 mmol/l negli uomini e <50 mg/dl=1,29 mmol/l nelle donne), (4) ipertensione arteriosa (≥130/85 mmHg), (5) elevata glicemia a digiuno (≥100 mg/dl).

La resistenza all'insulina è determinata utilizzando l'inverso del tasso di smaltimento del glucosio stimato (eGDR), calcolato utilizzando la formula: : eGDR= 21,158 + (- 0,09 * circonferenza vita) + (- 3,407 * ipertensione) + (- 0,551 * HbA1c).

Misure di laboratorio:

L'HbA1C è determinata mediante cromatografia liquida ad alta prestazione su uno strumento Adams™ A1c HA-8160 8180, Arkray - Menarini (Zaventem, Belgio; intervallo di riferimento: 4,8-6,0%). Una media di quattro determinazioni annuali di A1C viene utilizzata per valutare il controllo metabolico complessivo negli ultimi due anni. I livelli sierici plasmatici di creatinina, colesterolo totale, colesterolo HDL e trigliceridi vengono misurati su un Vitros 750 XRC (Ortho Clinical Diagnostic, Johnson & Johnson, Buckinghamshire, UK) Dimension Vista 1500 System (Siemens Healthcare Diagnostics, Huizingen, Belgio) con reagenti provenienti dal stesso produttore (REF K1270A per creatinina, REF K1027 per colesterolo totale, REF K3048A per colesterolo HDL, REF K2069 per trigliceridi). L'HDL-C viene misurato su un Hitachi 912 (Roche Diagnostics, Mannheim, Germania). La creatinina sierica viene misurata con un metodo enzimatico su Vitros 750 (Ortho Clinical Diagnostic, Beerse, Belgio). La velocità di filtrazione glomerulare (eGFR) viene stimata utilizzando la formula MDRD abbreviata, includendo un fattore di correzione di 0,742 per le donne. Le concentrazioni plasmatiche di adiponectina HMW sono misurate mediante un saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) (EZHMWA-64K, Millipore, sensibilità analitica 0,5 ng/ml, coefficiente di variazione intra-dosaggio [CV] 7,47%). La leptina viene misurata utilizzando un kit ELISA (kit HU Leptin, KAC2281, Life Technologies, sensibilità 3,5 pg/ml, CV intra-dosaggio 5,75%). Il TNF-α viene dosato utilizzando ELISA (kit HU TNF alpha, KHC3011, Life Technologies, sensibilità 1,7 pg/ml, CV intra-dosaggio 6,38%) e le concentrazioni di IL-6 vengono misurate utilizzando ELISA (kit HU IL-6 Chemiluminescence Elisa, KHC0069 , Life Technologies, sensibilità 0,25 pg/ml, CV intra-dosaggio 5,37%).

Valutazione delle complicanze:

Ogni soggetto viene valutato per la presenza e la gravità delle complicanze. L'albumina urinaria delle 24 ore viene misurata mediante nefelometria Dimension Vista 1500 System (Siemens Healthcare Diagnostics, Huizingen, Belgio) con reagenti dello stesso produttore (REF K7062). utilizzando un nefelometro Behring II (Siemens Healthcare Diagnostics Products, Marburg, Germania). La microalbuminuria è definita come un'escrezione urinaria di albumina superiore a 20 µg/min. Entrambe le arterie carotidi vengono esaminate utilizzando uno scanner duplex carotideo (General Electrics, Vivid 7 Pro), dotato di una sonda ad alta risoluzione da 8 Mhz.

Viene eseguita una scansione TC multidetettore senza contrasto a 64 sezioni delle arterie coronarie per misurare le calcificazioni delle arterie coronarie (CAC) (Lightspeed, VCT; General Electric Medical Systems, Waukesha, Wis, Milwaukee, USA). Il punteggio viene eseguito da un esperto radiologo (R. Salgado), che è accecato dai fascicoli dei soggetti. I tipici parametri di imaging sono: tensione del tubo 100 kv; intensità di corrente 310 mA; tempo di rotazione 500 ms; e collimazione del rivelatore 64 x 0,625 mm. I dati di scansione vengono ricostruiti al 75% del ciclo cardiaco dopo il complesso QRS. La dose di radiazioni per il punteggio del calcio è compresa tra 1,3 e 1,7 mSv. Il CAC viene quantificato (punteggio Agatston) mediante un'applicazione software dedicata (SmartScore, AW). Il punteggio Agatston è il prodotto dell'area CAC per la densità. Un punteggio <10 è considerato normale. Un punteggio >200 è un forte predittore di rischio CVD.

L'ecocardiografia standard bidimensionale e Doppler (iE-33 Philips, Paesi Bassi) viene eseguita da un singolo cardiologo in cieco rispetto allo stato clinico dei partecipanti allo studio. In breve, la funzione ventricolare sinistra viene valutata mediante la modalità M dell'asse lungo parasternale e il metodo Simpson biplanare modificato. La funzione diastolica viene determinata tenendo conto di tutti i seguenti parametri: afflusso mitralico, segnale di afflusso venoso polmonare e velocità Doppler del tessuto anulare mitralico (tD) dai cicli espiratori finali secondo le raccomandazioni ASE.