Zusammenhang von viszeralem Fett und damit verbundenen Zytokinen mit frühen kardiovaskulären Komplikationen bei Typ-1-Diabetes. (VISCERA)

Ziel: Untersuchung, ob viszerales Fettgewebe (VAT) und seine Adipokine zu frühen Anzeichen einer Herz-Kreislauf-Erkrankung beitragen, d. h. zu Koronararterienverkalkungen (CAC) und diastolischer Dysfunktion bei Typ-1-Diabetes (T1DM).

Patienten & Methoden:

Ab Juni 2011 werden erwachsene T1DM-Patienten im Alter von 18 bis 75 Jahren rekrutiert, die regelmäßig die ambulante Diabetesklinik des Universitätsklinikums Antwerpen aufsuchen. Um in die Studie aufgenommen zu werden, müssen die Patienten eine Diabetesdauer von ≥ 5 Jahren haben und sich in einem guten allgemeinen Gesundheitszustand befinden. Ausschlusskriterien sind ein schweres kardiovaskuläres Ereignis (Myokardinfarkt, Schlaganfall), andere kardiovaskuläre Beschwerden, eine Schwangerschaft oder eine glomeruläre Filtrationsrate ≤ 30 ml/min/1,73 m².

Alle Teilnehmer unterzeichnen eine Einverständniserklärung. Diese Studie wird in Übereinstimmung mit der geänderten Deklaration von Helsinki durchgeführt. Das Forschungsprotokoll wurde von der Ethikkommission des Universitätsklinikums Antwerpen genehmigt (UZA 31.11.224, belgische Registrierungsnummer: B30020111874).

Anthropometrische Messungen:

Alle Messungen werden morgens nach einer Fastennacht über Nacht durchgeführt. Die Körpergröße wird mit einem an der Wand montierten Stadiometer auf 0,5 cm genau gemessen und das Gewicht wird mit einer Schwebebalkenwaage bei Probanden in Unterwäsche gemessen. Der Taillenumfang wird in der Mitte zwischen dem unteren Rippenrand und dem Beckenkamm gemessen. Die Körperzusammensetzung wird durch Bioimpedanzanalyse (BIA) beurteilt und der Fettmassenanteil wird nach der Formel von Deurenberg berechnet. Das viszerale Bauchfettgewebe (VAT) und das subkutane Bauchfettgewebe (SAT) werden durch einen 64-Schicht-Computertomographie-Scan (CT) auf L4-L5-Ebene (Schichtdicke 0,6 mm) bestimmt.

Der Blutdruck wird nach einer 10-minütigen Pause mit einer standardisierten Methode (Dynamap) gemessen und als Mittelwert aus vier Messungen verwendet. Als Hypertonie gilt ein Blutdruck von ≥ 130/85 mmHg oder die Einnahme blutdrucksenkender Medikamente durch den Patienten.

Das Vorliegen des metabolischen Syndroms wird anhand der Kriterien der International Diabetes Federation beurteilt. Probanden werden als Patienten mit metabolischem Syndrom eingestuft, wenn ≥3 der folgenden Kriterien erfüllt sind: (1) vergrößerter Taillenumfang (Männer ≥94 cm, Frauen ≥80 cm), (2) Hypertriglyceridämie (≥150 mg/dl=1,7 mmol/ l), (3) niedriges HDL-Cholesterin (<40 mg/dl=1,03). mmol/l bei Männern und <50 mg/dl=1,29 mmol/l bei Frauen), (4) hoher Blutdruck (≥130/85 mmHg), (5) hohe Nüchternglukose (≥100 mg/dl).

Die Insulinresistenz wird anhand des Kehrwerts der geschätzten Glukose-Entsorgungsrate (eGDR) bestimmt, berechnet nach der Formel: eGDR= 21,158 + (- 0,09 * Taillenumfang) + (- 3,407 * Bluthochdruck) + (- 0,551 * HbA1c).

Labormessungen:

HbA1C wird durch Hochleistungsflüssigkeitschromatographie auf einem Adams™ A1c HA-8160 8180, Arkray – Menarini-Gerät (Zaventem, Belgien; Referenzbereich: 4,8–6,0 %) bestimmt. Zur Beurteilung der gesamten Stoffwechselkontrolle der letzten zwei Jahre wird ein Mittelwert aus vier jährlichen A1C-Bestimmungen herangezogen. Plasma-Serumspiegel von Kreatinin, Gesamtcholesterin, HDL-Cholesterin und Triglyceriden werden auf einem Vitros 750 XRC (Ortho Clinical Diagnostic, Johnson & Johnson, Buckinghamshire, UK) Dimension Vista 1500 System (Siemens Healthcare Diagnostics, Huizingen, Belgien) mit Reagenzien von gemessen gleichen Herstellers (REF K1270A für Kreatinin, REF K1027 für Gesamtcholesterin, REF K3048A für HDL-Cholesterin, REF K2069 für Triglyceride). HDL-C wird auf einem Hitachi 912 (Roche Diagnostics, Mannheim, Deutschland) gemessen. Serumkreatinin wird durch eine enzymatische Methode auf einem Vitros 750 (Ortho Clinical Diagnostic, Beerse, Belgien) gemessen. Die glomeruläre Filtrationsrate (eGFR) wird anhand der abgekürzten MDRD-Formel geschätzt, einschließlich eines Korrekturfaktors von 0,742 für Frauen. Die Plasma-HMW-Adiponektinkonzentrationen werden durch einen Enzymimmunoassay (ELISA) (EZHMWA-64K, Millipore, analytische Empfindlichkeit 0,5 ng/ml, Intra-Assay-Variationskoeffizient [CV] 7,47 %) gemessen. Leptin wird mit einem ELISA-Kit gemessen (HU Leptin Kit, KAC2281, Life Technologies, Empfindlichkeit 3,5 pg/ml, Intra-Assay-CV 5,75 %). TNF-α wird mit ELISA (HU TNF alpha Kit, KHC3011, Life Technologies, Empfindlichkeit 1,7 pg/ml, Intra-Assay CV 6,38 %) getestet und IL-6-Konzentrationen werden mit ELISA (HU IL-6 Chemilumineszenz Elisa Kit, KHC0069) gemessen , Life Technologies, Sensitivität 0,25 pg/ml, Intra-Assay-VK 5,37 %).

Beurteilung von Komplikationen:

Bei jedem Probanden wird das Vorhandensein und die Schwere von Komplikationen beurteilt. Das 24-Stunden-Urinalbumin wird mittels Nephelometrie Dimension Vista 1500 System (Siemens Healthcare Diagnostics, Huizingen, Belgien) mit Reagenzien desselben Herstellers (REF K7062) gemessen. unter Verwendung eines Behring Nephelometer II (Siemens Healthcare Diagnostics Products, Marburg, Deutschland). Mikroalbuminurie ist definiert als eine Albuminausscheidung im Urin von mehr als 20 µg/min. Beide Halsschlagadern werden mit einem Karotis-Duplex-Scanner (General Electrics, Vivid 7 Pro) untersucht, der mit einer hochauflösenden 8-MHz-Sonde ausgestattet ist.

Zur Messung der Verkalkung der Koronararterien (Lightspeed, VCT; General Electric Medical Systems, Waukesha, Wis, Milwaukee, USA) wird ein kontrastfreier Multidetektor-CT-Scan mit 64 Schichten der Koronararterien durchgeführt. Die Bewertung erfolgt durch einen erfahrenen Radiologen (R. Salgado), der keinen Einblick in die Fallakten des Probanden hat. Typische Bildgebungsparameter sind: Röhrenspannung 100 kV; Stromstärke 310 mA; Rotationszeit 500 ms; und Detektorkollimation 64 x 0,625 mm. Scandaten werden bei 75 % des Herzzyklus nach dem QRS-Komplex rekonstruiert. Die Strahlendosis für die Kalziumbewertung liegt bei 1,3–1,7 mSv. Der CAC wird mithilfe einer speziellen Softwareanwendung (SmartScore, AW) quantifiziert (Agatston-Score). Der Agatston-Score ist das Produkt aus CAC-Fläche mal Dichte. Ein Wert <10 gilt als normal. Ein Wert von >200 ist ein starker Prädiktor für das CVD-Risiko.

Die standardmäßige zweidimensionale und Doppler-Echokardiographie (iE-33 Philips, Niederlande) wird von einem einzelnen Kardiologen durchgeführt, der keinen Einblick in den klinischen Status der Studienteilnehmer hat. Kurz gesagt, die linksventrikuläre Funktion wird mit dem parasternalen Längsachsen-M-Modus und der modifizierten Biplane-Simpson-Methode beurteilt. Die diastolische Funktion wird unter Berücksichtigung aller folgenden Parameter bestimmt: Mitraleinfluss, Pulmonalvenen-Einflusssignal und Dopplergeschwindigkeiten (tD) des Mitralringgewebes aus endexspiratorischen Zyklen gemäß den ASE-Empfehlungen.