Relación de la grasa visceral y las citoquinas asociadas con las complicaciones cardiovasculares tempranas en la diabetes tipo 1. (VISCERA)

Objetivo: investigar si el tejido adiposo visceral (TAV) y sus adipoquinas contribuyen a los primeros signos de enfermedad cardiovascular, es decir, calcificaciones de las arterias coronarias (CAC) y disfunción diastólica en la diabetes tipo 1 (DM1).

Pacientes y Métodos:

Los pacientes adultos con DM1, de 18 a 75 años de edad, que asisten regularmente a la clínica ambulatoria de diabetes del Hospital Universitario de Amberes son reclutados a partir de junio de 2011. Los pacientes deben tener una duración de la diabetes de ≥5 años y gozar de buena salud en general para ser incluidos. Los criterios de exclusión son antecedentes de un evento cardiovascular adverso mayor (infarto de miocardio, accidente cerebrovascular), otras molestias cardiovasculares, embarazo o una tasa de filtración glomerular ≤30 ml/min/1,73 m².

Todos los participantes firman un formulario de consentimiento informado. Este estudio se lleva a cabo de acuerdo con la Declaración de Helsinki enmendada. El protocolo de investigación está aprobado por el comité de ética del Hospital Universitario de Amberes (UZA 31/11/224, número de registro belga: B30020111874).

Medidas antropométricas:

Todas las mediciones se realizan por la mañana después de un ayuno nocturno. La altura se mide con una precisión de 0,5 cm usando un estadiómetro montado en la pared, y el peso se mide usando una balanza de barra de equilibrio con los sujetos en ropa interior. La circunferencia de la cintura se mide en el nivel medio entre el margen inferior de la costilla y la cresta ilíaca. La composición corporal se evalúa mediante análisis de bioimpedancia (BIA) y el porcentaje de masa grasa se calcula utilizando la fórmula de Deurenberg. El tejido adiposo abdominal visceral (VAT) y el tejido adiposo abdominal subcutáneo (SAT) se determinan mediante una tomografía computarizada (TC) de 64 cortes en el nivel L4-L5 (grosor de corte 0,6 mm).

La presión arterial se toma con un método estandarizado (Dynamap) después de un descanso de 10 min y se utiliza una media de cuatro mediciones. La hipertensión se define como una presión arterial ≥130/85 mmHg o ingesta de medicación antihipertensiva por parte del paciente.

La presencia del síndrome metabólico se evalúa utilizando los criterios de la Federación Internacional de Diabetes. Los sujetos se clasifican con síndrome metabólico si se cumplen ≥3 de los siguientes criterios: (1) aumento de la circunferencia de la cintura (hombres ≥94 cm, mujeres ≥80 cm), (2) hipertrigliceridemia (≥150 mg/dl=1,7 mmol/ l), (3) colesterol HDL bajo (<40 mg/dl=1,03 mmol/l en hombres y <50 mg/dl=1,29 mmol/l en mujeres), (4) hipertensión arterial (≥130/85 mmHg), (5) glucosa en ayunas elevada (≥100 mg/dl).

La resistencia a la insulina se determina mediante el inverso de la tasa estimada de eliminación de glucosa (eGDR), calculada mediante la fórmula: eGDR= 21,158 + (- 0,09 * circunferencia de la cintura) + (- 3,407 * hipertensión) + (- 0,551 * HbA1c).

Mediciones de laboratorio:

La HbA1C se determina mediante cromatografía líquida de alta resolución en un instrumento Adams™ A1c HA-8160 8180, Arkray - Menarini (Zaventem, Bélgica; rango de referencia: 4,8-6,0%). Se utiliza una media de cuatro determinaciones anuales de A1C para evaluar el control metabólico general durante los últimos dos años. Los niveles séricos plasmáticos de creatinina, colesterol total, colesterol HDL y triglicéridos se miden en un Vitros 750 XRC (Ortho Clinical Diagnostic, Johnson & Johnson, Buckinghamshire, Reino Unido) Dimension Vista 1500 System (Siemens Healthcare Diagnostics, Huizingen, Bélgica) con reactivos de la mismo fabricante (REF K1270A para creatinina, REF K1027 para colesterol total, REF K3048A para colesterol HDL, REF K2069 para triglicéridos). HDL-C se mide en un Hitachi 912 (Roche Diagnostics, Mannheim, Alemania). La creatinina sérica se mide mediante un método enzimático en un Vitros 750 (Ortho Clinical Diagnostic, Beerse, Bélgica). La tasa de filtración glomerular (eGFR) se estima mediante la fórmula MDRD abreviada, que incluye un factor de corrección de 0,742 para mujeres. Las concentraciones de adiponectina HMW en plasma se miden mediante un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) (EZHMWA-64K, Millipore, sensibilidad analítica 0,5 ng/ml, coeficiente de variación intraensayo [CV] 7,47%). La leptina se mide usando un kit ELISA (HU Leptin kit, KAC2281, Life Technologies, sensibilidad 3,5 pg/ml, intraensayo CV 5,75%). El TNF-α se analiza mediante ELISA (kit HU TNF alfa, KHC3011, Life Technologies, sensibilidad 1,7 pg/ml, CV intraensayo 6,38 %) y las concentraciones de IL-6 se miden mediante ELISA (kit HU IL-6 Chemiluminescence Elisa, KHC0069 , Life Technologies, sensibilidad 0,25 pg/ml, intraensayo CV 5,37%).

Evaluación de las complicaciones:

Cada sujeto es evaluado por la presencia y severidad de las complicaciones. La albúmina en orina de 24 h se mide mediante nefelometría Dimension Vista 1500 System (Siemens Healthcare Diagnostics, Huizingen, Bélgica) con reactivos del mismo fabricante (REF K7062). utilizando un nefelómetro Behring II (Siemens Healthcare Diagnostics Products, Marburg, Alemania). La microalbuminuria se define como una excreción urinaria de albúmina superior a 20 µg/min. Ambas arterias carótidas se examinan utilizando un escáner dúplex carotídeo (General Electrics, Vivid 7 Pro), equipado con una sonda de alta resolución de 8 Mhz.

Se realiza una tomografía computarizada multidetector sin contraste de 64 cortes de las arterias coronarias para medir las calcificaciones de las arterias coronarias (CAC) (Lightspeed, VCT; General Electric Medical Systems, Waukesha, Wis, Milwaukee, EE. UU.). La puntuación la realiza un radiólogo experto (R. Salgado), que no conoce los expedientes de los casos de los sujetos. Los parámetros de imagen típicos son: voltaje del tubo 100 kv; intensidad de corriente 310 mA; tiempo de rotación 500 ms; y detector de colimación 64 x 0,625 mm. Los datos de escaneo se reconstruyen al 75% del ciclo cardíaco después del complejo QRS. La dosis de radiación para el rango de puntuación de calcio es de 1,3 a 1,7 mSv. El CAC se cuantifica (puntuación de Agatston) mediante una aplicación de software dedicada (SmartScore, AW). La puntuación de Agatston es el producto del área CAC por la densidad. Una puntuación <10 se considera normal. Una puntuación > 200 es un fuerte predictor de riesgo de ECV.

La ecocardiografía bidimensional y Doppler estándar (iE-33 Philips, Países Bajos) la realiza un solo cardiólogo que desconoce el estado clínico de los participantes del estudio. Brevemente, la función del ventrículo izquierdo se evalúa mediante el modo M del eje largo paraesternal y el método de Simpson biplano modificado. La función diastólica se determina teniendo en cuenta todos los siguientes parámetros: flujo de entrada mitral, señal de flujo de entrada de la vena pulmonar y velocidades Doppler del tejido anular mitral (tD) de los ciclos espiratorios finales de acuerdo con las recomendaciones de la ASE.