Związek tłuszczu trzewnego i związanych z nim cytokin z wczesnymi powikłaniami sercowo-naczyniowymi w cukrzycy typu 1. (VISCERA)

Cel: Zbadanie, czy trzewna tkanka tłuszczowa (VAT) i jej adipokiny przyczyniają się do wczesnych objawów choroby sercowo-naczyniowej, tj. zwapnień tętnic wieńcowych (CAC) i dysfunkcji rozkurczowej w cukrzycy typu 1 (T1DM).

Pacjenci i metody:

Dorośli pacjenci z cukrzycą typu 1 w wieku 18-75 lat, regularnie uczęszczający do poradni diabetologicznej Szpitala Uniwersyteckiego w Antwerpii, są rekrutowani od czerwca 2011 roku. Pacjenci muszą mieć cukrzycę trwającą co najmniej 5 lat i być ogólnie w dobrym stanie zdrowia, aby zostali włączeni do badania. Kryteria wykluczenia to historia poważnego niepożądanego zdarzenia sercowo-naczyniowego (zawał mięśnia sercowego, udar mózgu), inne dolegliwości sercowo-naczyniowe, ciąża lub wskaźnik przesączania kłębuszkowego ≤30 ml/min/1,73 m².

Wszyscy uczestnicy podpisują formularz świadomej zgody. Niniejsze badanie jest prowadzone zgodnie ze zmienioną Deklaracją Helsińską. Protokół badania został zatwierdzony przez Komisję Etyki Szpitala Uniwersyteckiego w Antwerpii (UZA 11/31/224, belgijski numer rejestracyjny: B30020111874).

Pomiary antropometryczne:

Wszystkie pomiary wykonuje się rano po całonocnym poście. Wzrost mierzono z dokładnością do 0,5 cm za pomocą zamontowanego na ścianie stadiometru, a wagę mierzono za pomocą równoważni z osobami w bieliźnie. Obwód talii mierzony jest na poziomie środkowym między dolnym brzegiem żebra a grzebieniem biodrowym. Skład ciała ocenia się za pomocą analizy bioimpedancji (BIA), a procent masy tkanki tłuszczowej oblicza się za pomocą wzoru Deurenberga. Trzewną tkankę tłuszczową brzucha (VAT) i podskórną tkankę tłuszczową brzucha (SAT) określa się za pomocą 64-rzędowej tomografii komputerowej (CT) na poziomie L4-L5 (grubość warstwy 0,6 mm).

Ciśnienie tętnicze mierzy się standardową metodą (Dynamap) po 10-minutowym odpoczynku i stosuje się średnią z czterech pomiarów. Nadciśnienie tętnicze definiuje się jako ciśnienie krwi ≥130/85 mmHg lub przyjmowanie przez pacjenta leków hipotensyjnych.

Obecność zespołu metabolicznego ocenia się na podstawie kryteriów Międzynarodowej Federacji Diabetologicznej. Pacjentów klasyfikuje się jako cierpiących na zespół metaboliczny, jeśli spełnione są ≥3 z następujących kryteriów: (1) zwiększony obwód talii (mężczyźni ≥94 cm, kobiety ≥80 cm), (2) hipertriglicerydemia (≥150 mg/dl=1,7 mmol/ l), (3) niski poziom cholesterolu HDL (<40 mg/dl=1,03 mmol/l u mężczyzn i <50 mg/dl=1,29 mmol/l u kobiet), (4) nadciśnienie tętnicze (≥130/85 mmHg), (5) wysoki poziom glukozy na czczo (≥100 mg/dl).

Insulinooporność określa się za pomocą odwrotności oszacowanego wskaźnika usuwania glukozy (eGDR), obliczonego według wzoru:

Pomiary laboratoryjne:

HbA1C oznacza się metodą wysokosprawnej chromatografii cieczowej na aparacie Adams™ A1c HA-8160 8180, Arkray - Menarini (Zaventem, Belgia; zakres odniesienia: 4,8-6,0%). Średnia z czterech oznaczeń HbA1c w ciągu roku jest wykorzystywana do oceny ogólnej kontroli metabolicznej w ciągu ostatnich dwóch lat. Stężenie kreatyniny, cholesterolu całkowitego, cholesterolu HDL i triglicerydów w osoczu mierzono na aparacie Vitros 750 XRC (Ortho Clinical Diagnostic, Johnson & Johnson, Buckinghamshire, Wielka Brytania) Dimension Vista 1500 System (Siemens Healthcare Diagnostics, Huizingen, Belgia) z odczynnikami z tego samego producenta (REF K1270A dla kreatyniny, REF K1027 dla całkowitego cholesterolu, REF K3048A dla cholesterolu HDL, REF K2069 dla trójglicerydów). HDL-C mierzy się na Hitachi 912 (Roche Diagnostics, Mannheim, Niemcy). Stężenie kreatyniny w surowicy oznacza się metodą enzymatyczną na Vitros 750 (Ortho Clinical Diagnostic, Beerse, Belgia). Współczynnik przesączania kłębuszkowego (eGFR) szacuje się za pomocą skróconego wzoru MDRD z uwzględnieniem współczynnika korygującego wynoszącego 0,742 dla kobiet. Stężenia HMW adiponektyny w osoczu mierzy się za pomocą testu immunoenzymatycznego (ELISA) (EZHMWA-64K, Millipore, czułość analityczna 0,5 ng/ml, współczynnik zmienności wewnątrz testu [CV] 7,47%). Leptynę mierzy się stosując zestaw ELISA (zestaw HU Leptin, KAC2281, Life Technologies, czułość 3,5 pg/ml, CV wewnątrz testu 5,75%). TNF-α oznacza się za pomocą testu ELISA (zestaw HU TNF alfa, KHC3011, Life Technologies, czułość 1,7 pg/ml, CV wewnątrz testu 6,38%), a stężenia IL-6 mierzy się za pomocą testu ELISA (zestaw HU IL-6 Chemiluminescence Elisa, KHC0069 , Life Technologies, czułość 0,25 pg/ml, CV wewnątrz testu 5,37%).

Ocena powikłań:

Każdy osobnik jest oceniany pod kątem obecności i ciężkości powikłań. 24h-Albumina w moczu jest mierzona za pomocą nefelometrii System Dimension Vista 1500 (Siemens Healthcare Diagnostics, Huizingen, Belgia) z odczynnikami tego samego producenta (REF K7062). przy użyciu Nephelometer II firmy Behring (Siemens Healthcare Diagnostics Products, Marburg, Niemcy). Mikroalbuminuria jest definiowana jako wydalanie albumin z moczem przekraczające 20 µg/min. Obie tętnice szyjne są badane za pomocą dwustronnego skanera tętnic szyjnych (General Electrics, Vivid 7 Pro), wyposażonego w sondę o wysokiej rozdzielczości 8 MHz.

64-rzędowy wielorzędowy tomografia komputerowa tętnic wieńcowych bez kontrastu jest wykonywana w celu pomiaru zwapnień tętnic wieńcowych (CAC) (Lightspeed, VCT; General Electric Medical Systems, Waukesha, Wis, Milwaukee, USA). Punktacja jest dokonywana przez jednego wykwalifikowanego radiologa (R. Salgado), który jest ślepy na akta pacjentów. Typowe parametry obrazowania to: napięcie lampy 100 kv; natężenie prądu 310 mA; czas obrotu 500 ms; i kolimacja detektora 64 x 0,625 mm. Dane skanowania są rekonstruowane w 75% cyklu pracy serca po zespole QRS. Dawka promieniowania dla oceny wapnia mieści się w zakresie 1,3-1,7 mSv. CAC jest określany ilościowo (wynik Agatstona) za pomocą dedykowanej aplikacji (SmartScore, AW). Wynik Agatstona jest iloczynem powierzchni CAC pomnożonej przez gęstość. Wynik <10 jest uważany za normalny. Wynik >200 jest silnym predyktorem ryzyka CVD.

Standardowa echokardiografia 2-wymiarowa i dopplerowska (iE-33 Philips, Holandia) jest wykonywana przez jednego kardiologa, który nie zna stanu klinicznego uczestników badania. Pokrótce, czynność lewej komory ocenia się za pomocą przymostkowej osi długiej M-mode i zmodyfikowanej dwupłaszczyznowej metody Simpsona. Czynność rozkurczową określa się biorąc pod uwagę wszystkie następujące parametry: napływ mitralny, sygnał napływu do żyły płucnej oraz prędkości tkankowe pierścienia mitralnego metodą Dopplera (tD) z cykli końcowo-wydechowych zgodnie z zaleceniami ASE.