Verband tussen visceraal vet en geassocieerde cytokines met vroege cardiovasculaire complicaties bij diabetes type 1. (VISCERA)

Doelstelling: Onderzoeken of visceraal vetweefsel (VAT) en zijn adipokines bijdragen aan vroege tekenen van hart- en vaatziekten, dat wil zeggen verkalkingen van de kransslagader (CAC) en diastolische disfunctie bij diabetes type 1 (T1DM).

Patiënten & methoden:

Volwassen T1DM-patiënten tussen 18 en 75 jaar die regelmatig de polikliniek diabetes van het Universitair Ziekenhuis Antwerpen bezoeken, worden aangeworven vanaf juni 2011. Patiënten moeten een diabetesduur van ≥5 jaar hebben en over het algemeen in goede gezondheid verkeren om te worden opgenomen. Uitsluitingscriteria zijn een voorgeschiedenis van een ernstige cardiovasculaire bijwerking (myocardinfarct, beroerte), andere cardiovasculaire klachten, zwangerschap of een glomerulaire filtratiesnelheid ≤30 ml/min/1,73 m².

Alle deelnemers ondertekenen een geïnformeerd toestemmingsformulier. Deze studie wordt uitgevoerd in overeenstemming met de gewijzigde Verklaring van Helsinki. Het onderzoeksprotocol is goedgekeurd door de ethische commissie van het Universitair Ziekenhuis Antwerpen (UZA 31/11/224, Belgisch registratienummer: B30020111874).

Antropometrische metingen:

Alle metingen worden 's ochtends uitgevoerd na een nacht vasten. De lengte wordt gemeten tot op 0,5 cm nauwkeurig met behulp van een aan de muur gemonteerde stadiometer en het gewicht wordt gemeten met behulp van een evenwichtsbalkschaal met proefpersonen in hun ondergoed. De tailleomtrek wordt gemeten op het middenniveau tussen de onderste ribrand en de crista iliaca. De lichaamssamenstelling wordt beoordeeld door middel van bio-impedantieanalyse (BIA) en het vetmassapercentage wordt berekend met behulp van de formule van Deurenberg. Visceraal abdominaal vetweefsel (VAT) en subcutaan abdominaal vetweefsel (SAT) worden bepaald door een 64-slice computertomografie (CT)-scan op L4-L5-niveau (slicedikte 0,6 mm).

De bloeddruk wordt gemeten met een gestandaardiseerde methode (Dynamap) na een rustperiode van 10 minuten en er wordt een gemiddelde van vier metingen gebruikt. Hypertensie wordt gedefinieerd als bloeddruk ≥130/85 mmHg of inname van antihypertensiva door de patiënt.

De aanwezigheid van het metabool syndroom wordt beoordeeld aan de hand van de criteria van de International Diabetes Federation. Proefpersonen worden geclassificeerd als lijdend aan het metabool syndroom als aan ≥3 van de volgende criteria wordt voldaan: (1) grotere tailleomtrek (mannen ≥94 cm, vrouwen ≥80 cm), (2) hypertriglyceridemie (≥150 mg/dl=1,7 mmol/ l), (3) laag HDL-cholesterol (<40 mg/dl=1,03 mmol/l bij mannen en <50 mg/dl=1,29 mmol/l bij vrouwen), (4) hoge bloeddruk (≥130/85 mmHg), (5) hoge nuchtere glucose (≥100 mg/dl).

De insulineresistentie wordt bepaald aan de hand van de inverse van de geschatte glucoseverwijderingssnelheid (eGDR), berekend met de formule: : eGDR= 21,158 + (- 0,09 * middelomtrek) + (- 3,407 * hypertensie) + (- 0,551 * HbA1c).

Laboratoriummetingen:

HbA1C wordt bepaald door hogedrukvloeistofchromatografie op een Adams™ A1c HA-8160 8180, Arkray - Menarini-instrument (Zaventem, België; referentiebereik: 4,8-6,0%). Een gemiddelde van vier jaarlijkse A1C-bepalingen wordt gebruikt om de algehele metabole controle over de afgelopen twee jaar te beoordelen. Plasmaserumspiegels van creatinine, totaal cholesterol, HDL-cholesterol en triglyceriden worden gemeten op een Vitros 750 XRC (Ortho Clinical Diagnostic, Johnson & Johnson, Buckinghamshire, UK) Dimension Vista 1500 System (Siemens Healthcare Diagnostics, Huizingen, België) met reagentia van de dezelfde fabrikant (REF K1270A voor creatinine, REF K1027 voor totaal cholesterol, REF K3048A voor HDL-cholesterol, REF K2069 voor triglyceriden). HDL-C wordt gemeten op een Hitachi 912 (Roche Diagnostics, Mannheim, Duitsland). Serumcreatinine wordt gemeten met een enzymatische methode op een Vitros 750 (Ortho Clinical Diagnostic, Beerse, België). De glomerulaire filtratiesnelheid (eGFR) wordt geschat met behulp van de afgekorte MDRD-formule, inclusief een correctiefactor van 0,742 voor vrouwen. Plasma-HMW-adiponectineconcentraties worden gemeten met een enzymgekoppelde immunosorbentassay (ELISA) (EZHMWA-64K, Millipore, analytische gevoeligheid 0,5 ng/ml, intra-assay variatiecoëfficiënt [CV] 7,47%). Leptine wordt gemeten met behulp van een ELISA-kit (HU Leptin-kit, KAC2281, Life Technologies, gevoeligheid 3,5 pg/ml, intra-assay CV 5,75%). TNF-α wordt getest met behulp van ELISA (HU TNF alpha kit, KHC3011, Life Technologies, gevoeligheid 1,7 pg/ml, intra-assay CV 6,38%) en IL-6-concentraties worden gemeten met behulp van ELISA (HU IL-6 Chemiluminescentie Elisa-kit, KHC0069 , Life Technologies, gevoeligheid 0,25 pg/ml, intra-assay CV 5,37%).

Beoordeling van complicaties:

Elk onderwerp wordt beoordeeld op aanwezigheid en ernst van complicaties. 24-uurs urine-albumine wordt gemeten met nefelometrie Dimension Vista 1500 System (Siemens Healthcare Diagnostics, Huizingen, België) met reagentia van dezelfde fabrikant (REF K7062). met behulp van een Behring Nephelometer II (Siemens Healthcare Diagnostics Products, Marburg, Duitsland). Microalbuminurie wordt gedefinieerd als een excretie van albumine in de urine van meer dan 20 µg/min. Beide halsslagaders worden onderzocht met behulp van een halsslagader-duplexscanner (General Electrics, Vivid 7 Pro), uitgerust met een 8-Mhz-sonde met hoge resolutie.

Een 64-delige niet-contrast multidetector CT-scan van de kransslagaders wordt uitgevoerd om kransslagaderverkalkingen (CAC) te meten (Lightspeed, VCT; General Electric Medical Systems, Waukesha, Wis, Milwaukee, VS). Scoren wordt gedaan door een bekwame radioloog (R. Salgado), die blind is voor de dossiers van de proefpersonen. Typische beeldvormingsparameters zijn: buisspanning 100 kv; stroomsterkte 310 mA; rotatietijd 500 ms; en detectorcollimatie 64 x 0,625 mm. Scangegevens worden gereconstrueerd op 75% van de hartcyclus na het QRS-complex. De stralingsdosis voor calciumscoring varieert van 1,3-1,7 mSv. CAC wordt gekwantificeerd (Agatston-score) door middel van een speciale softwaretoepassing (SmartScore, AW). De Agatston-score is het product van het CAC-oppervlak maal de dichtheid. Een score <10 wordt als normaal beschouwd. Een score >200 is een sterke voorspeller van CVD risico.

Standaard 2-dimensionale en Doppler-echocardiografie (iE-33 Philips, Nederland) wordt uitgevoerd door een enkele cardioloog die blind is voor de klinische status van de studiedeelnemers. In het kort wordt de linkerventrikelfunctie beoordeeld door de parasternale M-modus met lange as en de gemodificeerde biplane Simpson-methode. De diastolische functie wordt bepaald rekening houdend met alle volgende parameters: mitralisklepinstroom, longaderinstroomsignaal en mitralisringweefsel Doppler (tD) snelheden vanaf het einde van de expiratoire cycli volgens de ASE-aanbevelingen.