Relação da gordura visceral e citocinas associadas com complicações cardiovasculares precoces no diabetes tipo 1. (VISCERA)

Objetivo: Investigar se o tecido adiposo visceral (TAV) e suas adipocinas contribuem para os sinais precoces de doença cardiovascular, ou seja, calcificações da artéria coronária (CAC) e disfunção diastólica no diabetes tipo 1 (DM1).

Pacientes e Métodos:

Pacientes adultos com DM1, com idades entre 18 e 75 anos, que frequentam regularmente o ambulatório de diabetes do Hospital Universitário de Antuérpia, são recrutados a partir de junho de 2011. Os pacientes devem ter uma duração de diabetes ≥ 5 anos e estar em boa saúde geral para serem incluídos. Os critérios de exclusão são história de evento cardiovascular adverso importante (infarto do miocárdio, acidente vascular cerebral), outras queixas cardiovasculares, gravidez ou taxa de filtração glomerular ≤30 ml/min/1,73 m².

Todos os participantes assinam um termo de consentimento informado. Este estudo é conduzido de acordo com a Declaração emendada de Helsinque. O protocolo de pesquisa foi aprovado pelo comitê de ética do Antwerp University Hospital (UZA 31/11/224, número de registro belga: B30020111874).

Medidas antropométricas:

Todas as medições são realizadas pela manhã após um jejum noturno. A altura é medida com precisão de 0,5 cm usando um estadiômetro montado na parede, e o peso é medido usando uma balança de trave de equilíbrio com os indivíduos em suas roupas íntimas. A circunferência da cintura é medida no nível médio entre a margem inferior da costela e a crista ilíaca. A composição corporal é avaliada por análise de bioimpedância (BIA) e o percentual de massa gorda é calculado usando a fórmula de Deurenberg. O tecido adiposo abdominal visceral (VAT) e o tecido adiposo abdominal subcutâneo (SAT) são determinados por uma tomografia computadorizada (CT) de 64 cortes no nível L4-L5 (espessura do corte 0,6 mm).

A pressão arterial é medida com um método padronizado (Dynamap) após um repouso de 10 minutos, e uma média de quatro medições é usada. A hipertensão é definida como pressão arterial ≥130/85 mmHg ou ingestão de medicamentos anti-hipertensivos pelo paciente.

A presença da síndrome metabólica é avaliada usando os critérios da Federação Internacional de Diabetes. Os indivíduos são classificados como tendo a síndrome metabólica se ≥3 dos seguintes critérios forem atendidos: (1) aumento da circunferência da cintura (homens ≥94 cm, mulheres ≥80 cm), (2) hipertrigliceridemia (≥150 mg/dl=1,7 mmol/ l), (3) colesterol HDL baixo (<40 mg/dl=1,03 mmol/l em homens e <50 mg/dl=1,29 mmol/l em mulheres), (4) hipertensão arterial (≥130/85 mmHg), (5) glicemia de jejum elevada (≥100 mg/dl).

A resistência à insulina é determinada usando o inverso da taxa estimada de eliminação de glicose (eGDR), calculada pela fórmula: : eGDR= 21,158 + (- 0,09 * circunferência da cintura) + (- 3,407 * hipertensão) + (- 0,551 * HbA1c).

Medições laboratoriais:

A HbA1C é determinada por cromatografia líquida de alta eficiência em um instrumento Adams™ A1c HA-8160 8180 , Arkray - Menarini (Zaventem, Bélgica; faixa de referência: 4,8-6,0%). Uma média de quatro determinações anuais de A1C é usada para avaliar o controle metabólico geral nos últimos dois anos. Os níveis séricos plasmáticos de creatinina, colesterol total, colesterol HDL e triglicerídeos são medidos em um Sistema Vitros 750 XRC (Ortho Clinical Diagnostic, Johnson & Johnson, Buckinghamshire, Reino Unido) Dimension Vista 1500 (Siemens Healthcare Diagnostics, Huizingen, Bélgica) com reagentes do mesmo fabricante (REF K1270A para creatinina, REF K1027 para colesterol total, REF K3048A para HDL-colesterol, REF K2069 para triglicerídeos). O HDL-C é medido em um Hitachi 912 (Roche Diagnostics, Mannheim, Alemanha). A creatinina sérica é medida por um método enzimático em um Vitros 750 (Ortho Clinical Diagnostic, Beerse, Bélgica). A taxa de filtração glomerular (eGFR) é estimada usando a fórmula abreviada de MDRD, incluindo um fator de correção de 0,742 para mulheres. As concentrações plasmáticas de adiponectina HMW são medidas por um ensaio imunoenzimático (ELISA) (EZHMWA-64K, Millipore, sensibilidade analítica 0,5 ng/ml, coeficiente de variação intra-ensaio [CV] 7,47%). A leptina é medida usando um kit ELISA (kit HU Leptin, KAC2281, Life Technologies, sensibilidade 3,5 pg/ml, intra-ensaio CV 5,75%). O TNF-α é testado usando ELISA (kit HU TNF alpha, KHC3011, Life Technologies, sensibilidade 1,7 pg/ml, intra-ensaio CV 6,38%) e as concentrações de IL-6 são medidas usando ELISA (kit HU IL-6 Chemiluminescence Elisa, KHC0069 , Life Technologies, sensibilidade 0,25 pg/ml, CV intra-ensaio 5,37%).

Avaliação de complicações:

Cada sujeito é avaliado quanto à presença e gravidade das complicações. A albumina urinária de 24h é medida por nefelometria Dimension Vista 1500 System (Siemens Healthcare Diagnostics, Huizingen, Bélgica) com reagentes do mesmo fabricante (REF K7062). usando um Nefelômetro Behring II (Siemens Healthcare Diagnostics Products, Marburg, Alemanha). A microalbuminúria é definida como uma excreção urinária de albumina superior a 20 µg/min. Ambas as artérias carótidas são examinadas usando um scanner duplex carotídeo (General Electrics, Vivid 7 Pro), equipado com uma sonda de alta resolução de 8 Mhz.

Uma tomografia computadorizada multidetector de 64 cortes sem contraste das artérias coronárias é realizada para medir as calcificações da artéria coronária (CAC) (Lightspeed, VCT; General Electric Medical Systems, Waukesha, Wis, Milwaukee, EUA). A pontuação é feita por um radiologista qualificado (R. Salgado), que não conhece os arquivos de casos do paciente. Os parâmetros de imagem típicos são: voltagem do tubo 100 kv; intensidade de corrente 310 mA; tempo de rotação 500 ms; e colimação do detector 64 x 0,625 mm. Os dados da varredura são reconstruídos em 75% do ciclo cardíaco após o complexo QRS. A dose de radiação para pontuação de cálcio varia de 1,3-1,7 mSv. O CAC é quantificado (pontuação de Agatston) por meio de um aplicativo de software dedicado (SmartScore, AW). A pontuação Agatston é o produto da área CAC vezes a densidade. Uma pontuação <10 é considerada normal. Uma pontuação >200 é um forte preditor de risco de DCV.

A ecocardiografia bidimensional e Doppler padrão (iE-33 Philips, Holanda) é realizada por um único cardiologista cego para o estado clínico dos participantes do estudo. Resumidamente, a função ventricular esquerda é avaliada pelo modo M paraesternal de eixo longo e pelo método de Simpson biplano modificado. A função diastólica é determinada levando em conta todos os seguintes parâmetros: influxo mitral, sinal de influxo da veia pulmonar e Doppler tissular do anel mitral (tD) velocidades de ciclos expiratórios finais de acordo com as recomendações da ASE.