Sérová hladina proteinu vázajícího lipopolysacharidy (LBP) a ateroskleróza u hemodialyzovaných pacientů

Design studie a populace

Populace pacientů

Aby byli pacienti zařazeni do studie, musí jim být alespoň 20 let a musí být na ambulantní hemodialýze (HD) po dobu alespoň 3 měsíců. Pacienti jsou vyloučeni, pokud měli akutní infekci nebo malignitu. Celkem 360 dlouhodobých HD pacientů je náhodně pozváno a souhlasí s účastí ve studii. Zdravotní záznam je u každého subjektu důkladně přezkoumán spolupracujícím lékařem ve studii. Informace, jako je základní onemocnění ledvin, historie kardiovaskulárních onemocnění a další komorbidní onemocnění, budou abstrahovány.

Parametry studie

Vzorky krve před dialýzou se odebírají v den uprostřed týdne. Do 30 minut po odběru vzorků se zbývající krev odstřeďuje při 3000 g po dobu 10 minut, okamžitě se rozdělí na alikvoty a zmrazí se při -70 °C do další analýzy. Celkový cholesterol v séru se měří reakcí cholesterolesterázy/cholesteroloxidázy/peroxidázy za použití Hitachi 747 (Hitachi, Bohemia, NY, USA). HDL cholesterol se kvantifikuje po vysrážení polyethylenglykolem při teplotě místnosti. Koncentrace glukózy v séru se měří glukózooxidázovou metodou. Nízkohustotní lipoproteinový cholesterol se vypočítá pomocí Friedewaldova vzorce. Celkové sérové ​​triglyceridy se měří reakcí glycerolu/fosfátu/oxidázy a peroxidázy. Sérové ​​hladiny vysoce citlivého C-reaktivního proteinu (hsCRP) se měří pomocí Behringova nephelometru II (Dade Behring, Tokio, Japonsko). Plazmatické hladiny interleukinu-6 (IL-6) a rozpustného CD14 (sCD14) se měří komerčně dostupným enzymovým imunosorbentním testem (ELISA) (Quantikine HS Immunoassay kit, R&D System, Minneapolis, MN). Koncentrace Interleukin-6 (IL-10) a tumor nekrotizující faktor-alfa (TNF-a) jsou současně stanoveny pomocí Multiplex® (R&D Systems, Minnesota, MN, USA). Sérové ​​hladiny LBP budou měřeny pomocí komerčního enzymového imunosorbentního testu (HK315-02, HyCult Biotech Inc., Uden, Nizozemí) podle pokynů výrobce. Intra- a inter-testové koeficienty variace LBP jsou <5 a <10 %, v daném pořadí. Kromě toho bude pro variaci mezi testy použito sérum od 40 normálních kontrolních subjektů. Jak intra-, tak inter-testové variační koeficienty byly < 8,0 %. Všechny vzorky budou měřeny v duplikátech a střední hodnota je uvedena v μg/ml

Procento tuku se měří pomocí bioelektrické impedanční spektroskopie

Měření celotělové bioelektrické impedanční spektroskopie (BIS) pomocí monitoru tělesného složení (BCM: Fresenius Medical Care, Bad Homburg, Německo) se provádí u každého z účastníků zařazených do studie, jak bylo popsáno dříve [28]. Stručně řečeno, měření byla provedena den před dialýzou s pacientem v klidu, vleže na zádech a uvolněný na dialyzačním lůžku po dobu 10 minut. Čtyři elektrody byly umístěny na pacientovu ruku a nohu na straně kontralaterálně k jejich arteriovenózní píštěli. Základním principem tohoto stroje je použití bioimpedanční spektroskopie, která určuje obsah tekutiny v těle měřením sériových hodnot elektrické impedance aplikací malých mikroampérových elektrických proudů o 50 různých frekvencích mezi 5 a 1000 kHz. Tyto údaje o impedanci se používají k získání množství celkové tělesné vody, intracelulární vody a extracelulární vody prostřednictvím speciálního modelu tekutin a informací o dalších tělesných složeních, jako je tuková tkáň nebo libová tkáň, prostřednictvím modelu fyziologického složení těla [29]. Hlavní odhady tělesného složení měřené BCM-BIS jsou následující: (1) hmota netukové tkáně (LTM – hlavně svaly), tuková hmota (FAT) a hmota tukové tkáně (ATM – hlavně tuk s příslušnou hydratací)

Měření tuhosti tepen

Arteriální tuhost se vyhodnocuje měřením PWV v segmentu srdce a stehenní kosti pomocí automatického analyzátoru křivek.