Seerumin lipopolysakkaridia sitovan proteiinin (LBP) ja ateroskleroosin taso hemodialyysipotilailla

Tutkimussuunnittelu ja väestö

Potilaspopulaatio

Tutkimukseen osallistuvien potilaiden on oltava vähintään 20-vuotiaita ja avohoito hemodialyysissä (HD) vähintään 3 kuukautta. Potilaat suljetaan pois, jos heillä oli akuutti infektio tai pahanlaatuinen kasvain. Yhteensä 360 pitkäaikaista HD-potilasta kutsutaan satunnaisesti ja suostuvat osallistumaan tutkimukseen. Tutkimuksessa yhteistyössä toimiva lääkäri tarkistaa jokaisen henkilön sairauskertomuksen perusteellisesti. Tiedot, kuten taustalla oleva munuaissairaus, sydän- ja verisuonitautihistoria ja muut samanaikaiset sairaudet, otetaan pois.

Tutkimusparametrit

Dialyysiä edeltävät verinäytteet otetaan keskellä viikkoa. 30 minuutin kuluessa näytteenoton jälkeen jäljelle jäänyt veri sentrifugoidaan 3 000 g:llä 10 minuutin ajan, jaetaan välittömästi eriin ja pakastetaan -70 °C:seen lisäanalyysiin asti. Seerumin kokonaiskolesteroli mitataan kolesteroliesteraasi/kolesterolioksidaasin/peroksidaasin reaktiolla käyttämällä Hitachi 747:ää (Hitachi, Bohemia, NY, USA). HDL-kolesteroli kvantifioidaan sen jälkeen, kun se on saostettu polyetyleeniglykolilla huoneenlämpötilassa. Seerumin glukoosipitoisuudet mitataan glukoosioksidaasimenetelmällä. Matalatiheyksinen lipoproteiinikolesteroli lasketaan Friedewaldin kaavalla. Seerumin kokonaistriglyseridit mitataan glyseroli/fosfaatti/oksidaasin ja peroksidaasin reaktiolla. Korkean herkkyyden C-reaktiivisen proteiinin (hsCRP) seerumitasot mitataan käyttämällä Behring Nephelometer II -laitetta (Dade Behring, Tokio, Japani). Interleukiini-6:n (IL-6) ja liukoisen CD14:n (sCD14) plasmatasot mitataan kaupallisesti saatavilla olevalla entsyymikytkentäisellä immunosorbenttimäärityksellä (ELISA) (Quantikine HS Immunoassay Kit, R&D System, Minneapolis, MN). Multiplex® (R&D Systems, Minnesota, MN, USA) määrittää samanaikaisesti interleukiini-6:n (IL-10) ja tuumorinekroositekijä-alfan (TNF-a) pitoisuudet. LBP-tasot seerumissa mitataan käyttämällä kaupallista entsyymi-immunosorbenttimääritystä (HK315-02, HyCult Biotech Inc., Uden, Alankomaat) valmistajan ohjeiden mukaisesti. LBP-vaihtelun sisäiset ja määritysten väliset kertoimet ovat <5 ja <10 %. Lisäksi 40 normaalin kontrollihenkilön seerumia käytetään kokeiden väliseen vaihteluun. Sekä kokeiden sisäiset että interanalyysit olivat <8,0 %. Kaikki näytteet mitataan kahtena kappaleena ja keskiarvo ilmoitetaan yksikössä μg/ml

Rasvaprosentti mitataan bioelektrisellä impedanssispektroskopialla

Koko kehon biosähköisen impedanssispektroskopian (BIS) mittaus kehonkoostumusmonitorilla (BCM: Fresenius Medical Care, Bad Homburg, Saksa) suoritetaan jokaiselle tutkimukseen osallistuneelle aiemmin kuvatulla tavalla [28]. Lyhyesti sanottuna mittaukset tehtiin dialyysihoitoa edeltävänä päivänä potilaan ollessa rauhallinen, selällään ja rentoutunut dialyysivuoteessa 10 minuuttia. Neljä elektrodia asetettiin potilaan käteen ja jalkaan valtimo-laskimofistelin vastakkaiselle puolelle. Tämän koneen perusperiaate on bioimpedanssispektroskopian käyttö, joka määrittää kehon nestepitoisuuden mittaamalla sähköimpedanssin sarjaarvot käyttämällä pieniä microAmp sähkövirtoja 50 eri taajuudella välillä 5 - 1000 kHz. Näitä impedanssitietoja käytetään kehon kokonaisveden, solunsisäisen ja solunulkoisen veden määrän saamiseksi erityisen nestemallin avulla ja tietoa muista kehon koostumuksista, kuten rasvakudoksesta tai laihasta kudoksesta, fysiologisen kehonkoostumusmallin avulla [29]. Tärkeimmät arviot BCM-BIS:llä mitatusta kehon koostumuksesta ovat seuraavat: (1) vähärasvainen kudosmassa (LTM-pääasiassa lihasmassa), rasvamassa (FAT) ja rasvakudosmassa (ATM-pääasiassa rasva ja sen hydraatio)

Valtimoiden jäykkyyden mittaus

Valtimon jäykkyys arvioidaan mittaamalla PWV sydän-reisiluun segmentissä käyttämällä automaattista aaltomuoto-analysaattoria.