Poziom białka wiążącego lipopolisacharydy (LBP) w surowicy i miażdżyca tętnic u pacjentów hemodializowanych

Projekt badania i populacja

Populacja pacjentów

Aby wziąć udział w badaniu, pacjenci muszą mieć co najmniej 20 lat i być poddawani hemodializie ambulatoryjnej (HD) przez co najmniej 3 miesiące. Pacjenci są wykluczeni, jeśli mieli ostrą infekcję lub nowotwór złośliwy. W sumie 360 ​​długoterminowych pacjentów HD zostało losowo zaproszonych i wyraziło zgodę na udział w badaniu. Dokumentacja medyczna jest dokładnie przeglądana dla każdego pacjenta przez lekarza współpracującego w badaniu. Informacje, takie jak podstawowa choroba nerek, historia chorób sercowo-naczyniowych i inne choroby współistniejące, zostaną wyodrębnione.

Parametry badania

Próbki krwi przed dializą pobiera się w środku tygodnia. W ciągu 30 minut po pobraniu próbki pozostałą krew odwirowuje się przy 3000 g przez 10 minut, natychmiast dzieli na porcje i zamraża w temperaturze -70°C do dalszej analizy. Całkowity cholesterol w surowicy mierzy się w reakcji esterazy cholesterolowej/oksydazy cholesterolowej/peroksydazy, stosując Hitachi 747 (Hitachi, Bohemia, NY, USA). Cholesterol HDL oznacza się ilościowo po wytrąceniu glikolem polietylenowym w temperaturze pokojowej. Stężenia glukozy w surowicy mierzy się metodą oksydazy glukozowej. Cholesterol lipoprotein o małej gęstości oblicza się za pomocą wzoru Friedewalda. Całkowite triglicerydy w surowicy są mierzone poprzez reakcję glicerolu/fosforanu/oksydazy i peroksydazy. Poziomy białka C-reaktywnego o wysokiej czułości (hsCRP) w surowicy mierzy się za pomocą Behring Nephelometer II (Dade Behring, Tokio, Japonia). Poziomy interleukiny-6 (IL-6) i rozpuszczalnego CD14 (sCD14) w osoczu mierzy się dostępnym w handlu testem immunoenzymatycznym (ELISA) (zestaw Quantikine HS Immunoassay, R&D System, Minneapolis, MN). Stężenia interleukiny-6(IL-10) i czynnika martwicy nowotworu-alfa (TNF-α) są jednocześnie oznaczane przez Multiplex® (R&D Systems, Minnesota, MN, USA). Poziomy LBP w surowicy będą mierzone przy użyciu komercyjnego testu immunoenzymatycznego (HK315-02, HyCult Biotech Inc., Uden, Holandia) zgodnie z instrukcjami producenta. Wewnątrz- i między-testowe współczynniki zmienności LBP wynoszą odpowiednio <5 i <10%. Poza tym surowica od 40 normalnych osobników kontrolnych zostanie użyta do zmienności między testami. Zarówno wewnątrz-, jak i między testami współczynniki zmienności wynosiły <8,0%. Wszystkie próbki zostaną zmierzone w dwóch powtórzeniach, a średnia wartość zostanie podana w μg/ml

Procent tłuszczu mierzy się za pomocą bioelektrycznej spektroskopii impedancyjnej

Pomiar impedancji bioelektrycznej całego ciała (BIS) za pomocą monitora składu ciała (BCM: Fresenius Medical Care, Bad Homburg, Niemcy) jest wykonywany na każdym z uczestników włączonych do badania, jak opisano wcześniej [28]. Pokrótce, pomiary wykonywano w dniu poprzedzającym dializę, gdy pacjent był spokojny, leżał na wznak i był zrelaksowany w łóżku dializacyjnym przez 10 minut. Cztery elektrody umieszczono na dłoni i stopie pacjenta po stronie przeciwnej do przetoki tętniczo-żylnej. Podstawową zasadą tego urządzenia jest wykorzystanie spektroskopii bioimpedancji, która określa zawartość płynów w organizmie poprzez pomiar wartości seryjnych impedancji elektrycznej poprzez zastosowanie małych prądów elektrycznych w mikroamperach przy 50 różnych częstotliwościach od 5 do 1000 kHz. Te dane dotyczące impedancji są wykorzystywane do uzyskiwania całkowitej ilości wody w organizmie, wody wewnątrzkomórkowej i pozakomórkowej za pomocą specjalnego modelu płynów oraz informacji o innym składzie ciała, takim jak tkanka tłuszczowa lub tkanka beztłuszczowa, za pomocą fizjologicznego modelu składu ciała [29]. Główne szacunki składu ciała mierzone za pomocą BCM-BIS są następujące: (1) masa tkanki beztłuszczowej (LTM – głównie mięśnie), masa tłuszczu (FAT) i masa tkanki tłuszczowej (ATM – głównie tłuszcz z odpowiednim nawodnieniem)

Pomiar sztywności tętnic

Sztywność tętnic ocenia się, mierząc PWV w odcinku serce-ud, za pomocą automatycznego analizatora krzywych.