Сывороточный уровень липополисахарид-связывающего белка (LBP) и атеросклероз у пациентов, находящихся на гемодиализе

Дизайн исследования и популяция

Популяция пациентов

Для включения в исследование пациенты должны быть не моложе 20 лет и находиться на амбулаторном гемодиализе (ГД) не менее 3 месяцев. Пациенты исключаются, если у них была острая инфекция или злокачественное новообразование. В общей сложности 360 пациентов с длительной ГБ были случайным образом приглашены и согласились участвовать в исследовании. Медицинская карта тщательно просматривается для каждого субъекта врачом, сотрудничающим в исследовании. Будет извлечена такая информация, как основное заболевание почек, история сердечно-сосудистых заболеваний и другие сопутствующие заболевания.

Параметры исследования

Образцы крови перед диализом получают в середине рабочего дня. В течение 30 мин после забора оставшуюся кровь центрифугируют при 3000 g в течение 10 мин, сразу делят на аликвоты и замораживают при -70°С до дальнейшего анализа. Общий холестерин в сыворотке измеряют посредством реакции холестеринэстеразы/холестериноксидазы/пероксидазы с использованием Hitachi 747 (Hitachi, Bohemia, NY, USA). Холестерин ЛПВП определяют количественно после осаждения полиэтиленгликолем при комнатной температуре. Концентрацию глюкозы в сыворотке измеряют глюкозооксидазным методом. Холестерин липопротеинов низкой плотности рассчитывают по формуле Фридевальда. Общие триглицериды сыворотки измеряют с помощью реакции глицерин/фосфат/оксидаза и пероксидаза. Уровни высокочувствительного С-реактивного белка (hsCRP) в сыворотке крови измеряют с помощью нефелометра II Беринга (Dade Behring, Токио, Япония). Уровни интерлейкина-6 (IL-6) и растворимого CD14 (sCD14) в плазме измеряют с помощью имеющегося в продаже иммуноферментного анализа (ELISA) (набор для иммуноферментного анализа Quantikine HS, R&D System, Minneapolis, MN). Концентрации интерлейкина-6 (IL-10) и фактора некроза опухоли-альфа (TNF-α) одновременно определяют с помощью Multiplex® (R&D Systems, Миннесота, Миннесота, США). Уровни LBP в сыворотке будут измеряться с использованием коммерческого иммуноферментного анализа (HK315-02, HyCult Biotech Inc., Уден, Нидерланды) в соответствии с инструкциями производителя. Внутри- и межтестовые коэффициенты вариации LBP составляют <5 и <10% соответственно. Кроме того, для вариации между анализами будет использоваться сыворотка от 40 нормальных контрольных субъектов. Как внутри-, так и между анализами коэффициенты вариации были <8,0%. Все образцы будут измерены в двух экземплярах, а среднее значение указано в мкг/мл.

Процентное содержание жира измеряется с помощью биоэлектрической импедансной спектроскопии.

Измерение спектроскопии биоэлектрического импеданса всего тела (BIS) с использованием монитора состава тела (BCM: Fresenius Medical Care, Бад-Хомбург, Германия) проводится каждому из участников, включенных в исследование, как описано ранее [28]. Вкратце, измерения проводились за день до диализа, когда пациент был спокоен, лежал на спине и расслаблялся на диализной койке в течение 10 минут. Четыре электрода накладывали на руку и ногу пациента на стороне, противоположной артериовенозной фистуле. Основным принципом этой машины является использование спектроскопии биоимпеданса, которая определяет содержание жидкости в организме путем измерения последовательных значений электрического импеданса путем подачи малых электрических токов микроампер на 50 различных частотах от 5 до 1000 кГц. Эти данные импеданса используются для получения общего количества воды в организме, внутриклеточной воды и внеклеточной воды с помощью специальной жидкостной модели и информации о других составах тела, таких как жировая ткань или мышечная ткань, с помощью модели физиологического состава тела [29]. Основные оценки состава тела, измеренные BCM-BIS, следующие: (1) масса мышечной ткани (LTM - в основном мышцы), масса жира (FAT) и масса жировой ткани (ATM - в основном жир с соответствующей гидратацией)

Измерение артериальной жесткости

Артериальную жесткость оценивают путем измерения PWV в сердечно-бедренном сегменте с помощью автоматического анализатора формы волны.