Multicentrická studie k ověření niPGT-A (niPGT-A)
Prospektivní, observační, multicentrická, mezinárodní studie k ověření neinvazivního preimplantačního genetického testu na embryonální aneuploidii ve vyčerpaných kultivačních médiích (niPGT-A).
Abnormální počet chromozomů neboli aneuploidie je u lidských embryí běžná. Je zodpovědná za více než polovinu všech potratů a je hlavní příčinou vrozených vrozených vad. Kromě toho bylo popsáno, že aneuploidie může také ovlivnit implantaci embrya. Proto je výběr embryí, která mají největší šanci na implantaci a vyrůst ve zdravé miminko, jedním z nejdůležitějších kroků v oblasti asistované reprodukce.
Nedávné pokroky v genetických technologiích, jako je Next-Generation Sequencing (NGS), umožnily detekci aneuploidie s větší citlivostí. Aplikace této techniky na biopsie trofektodermu, odebrané z embryí před přenosem do dělohy, poskytla pohled na klinický dopad chromozomálního stavu. Tento proces screeningu embryí, abychom se ujistili, že mají správný počet chromozomů a hledali jakékoli strukturální abnormality v chromozomech, se nazývá preimplantační genetické testování aneuploidie (PGT-A). Vyžaduje specifické vybavení a vyškolený personál, který bude zvyšovat náklady a rizika, proto se jako alternativa hledají neinvazivní techniky. Tyto neinvazivní postupy byly zkoumány některými skupinami analyzujícími použité kultivační médium, kde je embryo inkubováno až do doby přenosu nebo zmrazení. V každodenní rutině se toto médium po ukončení kultivace embrya zlikviduje, ale bylo hlášeno, že obsahuje stopy DNA bez embryonálních buněk (cfDNA), která může představovat genetickou zátěž embrya. V současnosti však existuje vysoká variabilita výsledků napříč studiemi, přičemž procento shodných výsledků mezi médiem a biopsií trofektodermu se pohybuje od 3,5 do 85,7 %.
Hlavním cílem tohoto projektu je tedy validovat novou neinvazivní metodu pro PGT-A (niPGT-A), založenou na zlepšeném sběru a analýze kultivačních médií, aby se dosáhlo vyšší míry senzitivity a specificity a snížil se účinek. některých vnitřních potíží, jako je nízký vstup embryonální cfDNA, mozaika a mateřská kontaminace.
Přehled studie
Postavení
Intervence / Léčba
Detailní popis
Lidská embrya mají vyšší míru aneuploidie (20-80 %) než jiné druhy. Značná část těchto aneuploidních embryí má schopnost dosáhnout stadia blastocysty. V závislosti na typu aneuploidie se však některé nepodaří implantovat do dělohy, zatímco jiné se implantují, ale nebudou schopny provést časný embryonální vývoj (potrat) nebo velmi zřídka povedou k živě narozeným dětem se specifickými abnormalitami. Je proto důležité identifikovat aneuploidní embrya Je důležité identifikovat embrya s rizikem aneuploidních chromozomů u pacientek s pokročilým věkem matky (AMA), rekurentním selháním implantace (RIF) nebo opakovaným potratem (RM).
Identifikace aneuploidií je zvláště důležitá u embryí od pacientů s vyšším rizikem aneuploidie, jako jsou pacienti s pokročilým věkem matky (AMA), opakovaným selháním implantace (RIF) nebo opakovaným potratem (RM). Normální morfologie a vývoj embrya jsou proto závislé na chromozomálním komplementu.
Technika PGT-A analyzuje celý obsah chromozomů jedné buňky s vysokou citlivostí a specificitou, ale vyžaduje invazivní biopsii k získání embryonálního materiálu pro genetickou analýzu. Neinvazivní metody, které by nahradily stávající invazivní testovací metodu, by tedy byly užitečné pro zlepšení bezpečnosti matky a plodu.
V poslední době došlo k mnoha výzkumným pokrokům v oblasti genetického testování. V kultivačních médiích vyčerpaných embryí byla pozorována bezbuněčná DNA (cfDNA). Původ cfDNA ve stadiu blastocysty lze připsat apoptotickým událostem, které se mohou vyskytnout během normálního vývoje. To povzbudilo různé výzkumné skupiny, aby provedly analýzu použitých kultivačních médií.
Nejprve byly provedeny různé studie k detekci specifických genů spojených s monogenními poruchami (MTHFR9, HBA1/HBA210, SRY11). Nedávno byla vyvinuta neinvazivní PGT-A s vysoce variabilními výsledky v míře shody (3,5 %, 59,1 %, a 85,7 %, 30,6 %). Chromozomální stav embrya z DNA přítomné v použitém kultivačním médiu byl porovnán se stavem získaným podle standardního protokolu pomocí biopsie trofektodermu. Rozdíl v uvedených výsledcích může souviset s různými použitými metodikami, protože byly použity různé metody amplifikace a detekce - aCGH nebo NGS. Míry shody byly navíc v každé studii definovány odlišně, tj. aneuploidní výsledky ve vyčerpaném kultivačním médiu a biopsii trofektodermu mohly být považovány za souhlasné, přestože nevykazovaly stejné aneuploidní chromozomy.
Vliv kultivačních podmínek na účinnost neinvazivního přístupu zkoumali Hammond et al, (2016). Zjistili, že v kontrolních médiích ze tří různých typů komerčních médií, která nebyla vystavena embryím, byla trvale velmi nízká úroveň kontaminace DNA (mitochondriální a jaderná DNA). Předpokládá se, že pozorovaná nízká základní hladina kontaminace DNA pochází z proteinového doplňku kultivačního média.
Konečně na PGT-A mohou mít vliv dva relevantní faktory: kontaminace mateřskou DNA z granulózních buněk (MCC) a mozaika.
Pro zlepšení výsledků programů IVF (In vitro Fertilization) je potřeba identifikovat embryo s nejvyšším implantačním potenciálem. Chromozomální analýza embryí umožňuje selekci euploidních embryí, která mají vyšší úspěšnost implantace.
Vývoj neinvazivního protokolu PGT-A zlepší současné metodiky používané k identifikaci těchto euploidních embryí, čímž se zabrání škodlivému účinku biopsie na embryo a sníží se ekonomické náklady.
Počáteční odhadovaná velikost vzorku byla 3245 embryí (každé embryo je ve studii považováno za subjekt), přičemž se bere v úvahu 30% míra odpadnutí.
Data budou seskupena a analyzována v Igenomixu ve třech časových bodech studie: jakmile bude zpracováno 25 embryí z každého centra (pro posouzení implementace metodiky), poté, co bude zpracováno 30 % vzorků (jako prozatímní zkontrolovat výsledky) a na konci studie pro konečnou analýzu včetně sledování klinického výsledku.
Po průběžné analýze provedené u 30 % náboru byla celková velikost vzorku přepočtena na 2 620 vzorků, přičemž byla uvažována míra opuštění 5 % podle míry opuštění pozorované během průběžné analýzy. Výsledky průběžné analýzy publikované v Rubio et al., AJOG 2020.
Typ studie
Zápis (Aktuální)
Kontakty a umístění
Studijní místa
-
-
-
Buenos Aires, Argentina, C1425DGQ
- Pregna Medicina Reproductiva
-
-
-
-
Porto Alegre
-
Boa Vista, Porto Alegre, Brazílie, 91330-002
- Nilo Frantz - Centro de Reprodução Humana
-
-
-
-
Roma
-
Rome, Roma, Itálie, 00197
- Genera Rome
-
-
-
-
-
Istanbul, Krocan, 07720
- Bahçeci Group
-
-
-
-
Cdmx
-
Mexico City, Cdmx, Mexiko, 05120
- NASCERE
-
-
-
-
-
Lima, Peru, 15036
- Inmater - Clínica de Fertilidad
-
-
-
-
California
-
San Diego, California, Spojené státy, 92130
- San Diego Fertility Center
-
-
Massachusetts
-
Boston, Massachusetts, Spojené státy, 02109
- Boston IVF Fertility Clinic
-
-
Washington
-
Arlington, Washington, Spojené státy, 22203
- Dominion Fertility
-
-
-
-
-
Madrid, Španělsko, 28036
- ProcreaTec
-
-
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
Přijímá zdravé dobrovolníky
Metoda odběru vzorků
Studijní populace
Popis
Kritéria pro zařazení:
- Případy PGT-A s biopsií trofektodermu a SET pro jakoukoli zdravotní indikaci a podepsaný písemný informovaný souhlas schválený EK/IRB poté, co byl řádně informován o povaze výzkumu a dobrovolně přijat k účasti ve studii.
- ICSI (intracytoplazmatická injekce spermií), IVF (in vitro fertilizace) nebo ICSI/IVF prováděné v čerstvých oocytech od párů jsou povoleny.
Poznámka: Dárcovské spermie jsou povoleny.
- Povoleny jsou pouze čerstvé oocyty.
- Přenos čerstvého a odloženého embrya je povolen. Poznámka: V případě odloženého přenosu embryí musí být embrya vždy po biopsii blastocysty vitrifikována.
- Věk: 20-44 let (oba včetně).
Kritéria vyloučení:
- Známý abnormální karyotyp u člena páru.
- Preimplantační genetické testování na monogenní onemocnění (PGT-M) nebo preimplantační genetické testování na strukturální přestavby (PGT-SR) vyloučeny.
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
- Observační modely: Jiný
- Časové perspektivy: Budoucí
Kohorty a intervence
Skupina / kohorta |
Intervence / Léčba |
|---|---|
|
Embrya podstupující PGT-A / niPGT-A
Embrya od pacientek IVF ve věku 20 až 44 let, které podstoupily PGT-A z jakékoli zdravotní indikace, s vlastními cykly darování oocytů nebo vajíček a s transferem jednoho embrya (SET)
|
PGT-A bude prováděna v souladu s obvyklou klinickou praxí: Vzorky biopsie trophektodermu z blastocyst jsou analyzovány NGS pro screening na numerické chromozomální abnormality.
Neinvazivní preimplantační genetický test na aneuploidii embryí analyzující vyčerpané kultivační médium, kde je embryo inkubováno až do doby vitrifikace.
Toto médium obsahuje stopy DNA bez embryonálních buněk (cfDNA), která může představovat genetickou zátěž embrya.
|
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Chromozomální stav embryí
Časové okno: 6 až 7 dnů vývoje embrya
|
Shoda počtu a struktury chromozomů mezi výsledky analýzy vzorků biopsie a použitého média blastocyst.
|
6 až 7 dnů vývoje embrya
|
Sekundární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Živá porodnost
Časové okno: 40 týdnů
|
Počet narozených dětí na jeden embryotransfer
|
40 týdnů
|
|
Míra těhotenství
Časové okno: 20 týdnů
|
Počet těhotenství na přenos embrya
|
20 týdnů
|
|
Míra klinického potratu
Časové okno: 20 týdnů
|
Počet klinických potratů na celkový počet těhotenství
|
20 týdnů
|
|
Analýza produktů koncepce (POC)
Časové okno: Až 20 týdnů
|
Placentární a/nebo fetální tkáň, která zůstává v děloze po spontánní ztrátě těhotenství
|
Až 20 týdnů
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Sponzor
Vyšetřovatelé
- Studijní židle: Carlos Simón, MD PhD, Igenomix
- Vrchní vyšetřovatel: Carmen Rubio, BSc PhD, Igenomix
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia (Aktuální)
Primární dokončení (Aktuální)
Dokončení studie (Aktuální)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (Aktuální)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Klíčová slova
Další relevantní podmínky MeSH
Další identifikační čísla studie
- IGX1-NIP-CS-18-02-SUB1
Plán pro data jednotlivých účastníků (IPD)
Plánujete sdílet data jednotlivých účastníků (IPD)?
Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty
Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA
Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .