Multicenterundersøgelse for at validere niPGT-A (niPGT-A)
En prospektiv, observationel, multicenter, international undersøgelse for at validere en ikke-invasiv præimplantationsgenetisk test for embryoaneuploidi i de brugte kulturmedier (niPGT-A).
Unormalt kromosomtal eller aneuploidi er almindeligt hos menneskelige embryoner. Det er ansvarligt for mere end halvdelen af alle aborter, og det er den førende årsag til medfødte fødselsdefekter. Desuden er det blevet beskrevet, at aneuploidi også kan påvirke embryoimplantation. Derfor er udvælgelsen af embryoner, der har den bedste chance for at implantere og vokse til en sund baby, et af de vigtigste trin inden for assisteret reproduktion.
Nylige fremskridt inden for genetiske teknologier, såsom Next-Generation Sequencing (NGS), har gjort det muligt at opdage aneuploidi med større følsomhed. Anvendelsen af denne teknik til trophectoderm biopsier, taget fra embryoner før overførsel til livmoderen, har givet indsigt i den kliniske virkning af kromosomstatus. Denne proces med screening af embryoner for at sikre, at de har det rigtige antal kromosomer og for at lede efter eventuelle strukturelle abnormiteter i kromosomerne, kaldes præimplantationsgenetisk testning for aneuploidi (PGT-A). Det kræver specifikt udstyr og uddannet personale, der vil tilføje omkostninger og risici, så ikke-invasive teknikker søges som et alternativ. Disse ikke-invasive procedurer er blevet undersøgt af nogle grupper, der analyserer det brugte kulturmedium, hvor embryoet inkuberes op til tidspunktet for overførsel eller frysning. I den daglige rutine kasseres dette medie efter endt embryokultur, men det er blevet rapporteret, at det indeholder spor af embryonisk cellefrit DNA (cfDNA), der kan repræsentere den genetiske belastning af embryoet. Men i øjeblikket er der en høj variation i resultaterne på tværs af undersøgelser, med en procentdel af overensstemmende resultater mellem mediet og trophectoderm-biopsien fra 3,5 til 85,7 %.
Hovedformålet med dette projekt er således at validere en ny ikke-invasiv metode for PGT-A (niPGT-A), baseret på forbedret indsamling og analyse af dyrkningsmedierne for at opnå højere grad af sensitivitet og specificitet og for at mindske effekten af nogle iboende vanskeligheder såsom lavt embryonalt cfDNA-input, mosaicisme og maternel kontaminering.
Studieoversigt
Status
Betingelser
Intervention / Behandling
Detaljeret beskrivelse
Menneskelige embryoner har højere aneuploidier (20-80%) end andre arter. En betydelig del af disse aneuploide embryoner har evnen til at nå blastocyststadiet. Afhængigt af typen af aneuploidi vil nogle dog undlade at implantere i livmoderen, mens andre vil implantere, men vil ikke være i stand til at udføre tidlig embryonal udvikling (abort), eller meget sjældent resultere i levendefødte børn med specifikke abnormiteter. Det er derfor vigtigt at identificere aneuploide embryoner. Det er vigtigt at identificere embryoner med risiko for aneuploide kromosomer hos patienter med fremskreden maternal alder (AMA), recidiverende implantationsfejl (RIF) eller recidiverende abort (RM).
Identifikationen af aneuploidier er især vigtig i embryoner fra patienter med højere aneuploidirisiko, såsom dem med fremskreden moderalder (AMA), recidiverende implantationsfejl (RIF) eller recidiverende abort (RM). Derfor er normal embryomorfologi og -udvikling afhængig af det kromosomale komplement.
PGT-A-teknik analyserer det fulde kromosomindhold i en enkelt celle med høj sensitivitet og specificitet, men kræver en invasiv biopsi for at opnå embryonalt materiale til den genetiske analyse. Således vil ikke-invasive metoder til at erstatte den eksisterende invasive testmetode være nyttige til forbedring af mødre- og fostersikkerhed.
På det seneste har der været mange forskningsmæssige fremskridt inden for genetisk testning. Cellefrit DNA (cfDNA) er blevet observeret i brugte embryokulturmedier. Oprindelsen af cfDNA'et på blastocyststadiet kunne tilskrives apoptotiske hændelser, som kan forekomme under normal udvikling. Dette har tilskyndet forskellige forskergrupper til at udføre analyser brugte kulturmedier.
Forskellige undersøgelser blev oprindeligt udført for at påvise specifikke gener forbundet med monogene lidelser (MTHFR9, HBA1/HBA210, SRY11). For nylig er ikke-invasiv PGT-A blevet udviklet med meget varierende resultater på konkordansraten (3,5 %, 59,1 %, og 85,7 %, 30,6 %). Den kromosomale status af embryonet fra DNA'et til stede i det brugte dyrkningsmedium blev sammenlignet med den, der blev opnået ved at følge standardprotokollen under anvendelse af trophectoderm biopsi. Forskellen i de rapporterede resultater kan relateres til de forskellige anvendte metoder, fordi forskellige amplifikations- og detektionsmetoder -aCGH eller NGS- blev brugt. Desuden blev konkordanshastighederne defineret forskelligt på hver undersøgelse, dvs. aneuploide resultater i brugte dyrkningsmedier og trophectoderm biopsi kunne betragtes som overensstemmelse på trods af, at de ikke viste de samme aneuploide kromosomer.
Virkningen af dyrkningsbetingelser i effektiviteten af den ikke-invasive tilgang er blevet undersøgt af Hammond et al, (2016). De fandt ud af, at der konsekvent var et meget lavt niveau af DNA-kontamination (mitokondriel og nuklear DNA) i mediekontroller fra tre forskellige typer kommercielle medier, som ikke var blevet eksponeret for embryoner. Det lave basislinjeniveau af observeret DNA-kontamination menes at stamme fra dyrkningsmediets proteintilskud.
Endelig kunne der være indflydelse af to relevante faktorer på PGT-A: kontaminering med maternal DNA fra granulosaceller (MCC) og mosaicisme.
For at forbedre resultaterne af IVF-programmer (in vitro fertilisering) er der behov for at identificere embryoet med det højeste implantationspotentiale. Embryo-kromosomanalyse muliggør udvælgelse af euploide embryoner, som har en højere implantationssuccesrate.
Udviklingen af en ikke-invasiv PGT-A-protokol vil forbedre de nuværende metoder, der bruges til at identificere disse euploide embryoner, og undgå den skadelige virkning af biopsien på embryonet og reducere de økonomiske omkostninger.
Den oprindelige beregnede prøvestørrelse var 3245 embryoner (hvert embryo betragtes som et emne i undersøgelsen), idet man tager en frafaldsrate på 30 % i betragtning.
Data vil blive grupperet og analyseret hos Igenomix på tre tidspunkter af undersøgelsen: når 25 embryoner fra hvert center er blevet behandlet (for at vurdere implementeringen af metoden), efter at de 30 % af prøverne er blevet behandlet (som et mellemrum til kontrollere resultaterne) og i slutningen af undersøgelsen for den endelige analyse, herunder opfølgning af det kliniske resultat.
Efter den foreløbige analyse udført ved 30 % af rekrutteringen, er den samlede stikprøvestørrelse blevet genberegnet til 2620 prøver under hensyntagen til en frafaldsrate på 5 % i henhold til frafaldsprocenten observeret under den foreløbige analyse. Resultaterne af den foreløbige analyse offentliggjort i Rubio et al., AJOG 2020.
Undersøgelsestype
Tilmelding (Faktiske)
Kontakter og lokationer
Studiesteder
-
-
-
Buenos Aires, Argentina, C1425DGQ
- Pregna Medicina Reproductiva
-
-
-
-
Porto Alegre
-
Boa Vista, Porto Alegre, Brasilien, 91330-002
- Nilo Frantz - Centro de Reprodução Humana
-
-
-
-
California
-
San Diego, California, Forenede Stater, 92130
- San Diego Fertility Center
-
-
Massachusetts
-
Boston, Massachusetts, Forenede Stater, 02109
- Boston IVF Fertility Clinic
-
-
Washington
-
Arlington, Washington, Forenede Stater, 22203
- Dominion Fertility
-
-
-
-
Roma
-
Rome, Roma, Italien, 00197
- Genera Rome
-
-
-
-
-
Istanbul, Kalkun, 07720
- Bahçeci Group
-
-
-
-
Cdmx
-
Mexico City, Cdmx, Mexico, 05120
- NASCERE
-
-
-
-
-
Lima, Peru, 15036
- Inmater - Clínica de Fertilidad
-
-
-
-
-
Madrid, Spanien, 28036
- ProcreaTec
-
-
Deltagelseskriterier
Berettigelseskriterier
Aldre berettiget til at studere
Tager imod sunde frivillige
Prøveudtagningsmetode
Studiebefolkning
Beskrivelse
Inklusionskriterier:
- PGT-A tilfælde med trophectoderm biopsi og SET for enhver medicinsk indikation og underskrevet skriftlig informeret samtykke formular godkendt af EC/IRB efter at være blevet behørigt informeret om forskningens art og frivilligt accepteret at deltage i undersøgelsen.
- ICSI (Intra Cytoplasmic Sperm Injection), IVF (In Vitro Fertilization) eller ICSI/IVF udført i friske oocytter fra par er tilladt.
Bemærk: Donorsæd er tilladt.
- Kun friske oocytter tilladt.
- Frisk og udskudt embryooverførsel er tilladt. Bemærk: I tilfælde af udskudt embryooverførsel skal embryoner altid forglasses efter blastocystbiopsien.
- Alder: 20-44 år (begge inkluderet).
Ekskluderingskriterier:
- En kendt unormal karyotype hos et medlem af parret.
- Præimplantation genetisk testning for monogene sygdomme (PGT-M) eller præimplantation genetisk testning for strukturelle omlejringer (PGT-SR) tilfælde udelukket.
Studieplan
Hvordan er undersøgelsen tilrettelagt?
Design detaljer
- Observationsmodeller: Andet
- Tidsperspektiver: Fremadrettet
Kohorter og interventioner
Gruppe / kohorte |
Intervention / Behandling |
|---|---|
|
Embryoer, der gennemgår PGT-A/niPGT-A
Embryoer fra IVF-patienter mellem 20 og 44 år, der gennemgår PGT-A for enhver medicinsk indikation, med egne oocytter eller ægdonationscyklusser og med enkelt embryooverførsel (SET)
|
PGT-A vil blive udført efter den sædvanlige kliniske praksis: Trophectoderm biopsiprøver fra blastocyster analyseres af NGS for at screene for numeriske kromosomale abnormiteter.
Ikke-invasiv præimplantations genetisk test for embryoaneuploidi, der analyserer det brugte kulturmedie, hvor embryoet inkuberes op til tidspunktet for forglasning.
Dette medie indeholder spor af embryonisk cellefrit DNA (cfDNA), der kan repræsentere embryonets genetiske belastning.
|
Hvad måler undersøgelsen?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Embryonernes kromosomale status
Tidsramme: 6 til 7 dages embryoudvikling
|
Overensstemmelse med antallet og strukturen af kromosomerne mellem analyseresultater af biopsi og brugte blastocystmedieprøver.
|
6 til 7 dages embryoudvikling
|
Sekundære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Levende fødselsrate
Tidsramme: 40 uger
|
Antal fødte babyer pr. embryooverførsel
|
40 uger
|
|
Graviditetsrate
Tidsramme: 20 uger
|
Antal graviditeter pr. embryooverførsel
|
20 uger
|
|
Klinisk abortrate
Tidsramme: 20 uger
|
Antal kliniske aborter pr. samlet antal graviditeter
|
20 uger
|
|
Analyse af Conception Products (POC)
Tidsramme: Op til 20 uger
|
Placenta- og/eller fostervæv, der forbliver i livmoderen efter et spontant graviditetstab
|
Op til 20 uger
|
Samarbejdspartnere og efterforskere
Sponsor
Efterforskere
- Studiestol: Carlos Simón, MD PhD, Igenomix
- Ledende efterforsker: Carmen Rubio, BSc PhD, Igenomix
Datoer for undersøgelser
Studer store datoer
Studiestart (Faktiske)
Primær færdiggørelse (Faktiske)
Studieafslutning (Faktiske)
Datoer for studieregistrering
Først indsendt
Først indsendt, der opfyldte QC-kriterier
Først opslået (Faktiske)
Opdateringer af undersøgelsesjournaler
Sidste opdatering sendt (Faktiske)
Sidste opdatering indsendt, der opfyldte kvalitetskontrolkriterier
Sidst verificeret
Mere information
Begreber relateret til denne undersøgelse
Nøgleord
Yderligere relevante MeSH-vilkår
Andre undersøgelses-id-numre
- IGX1-NIP-CS-18-02-SUB1
Plan for individuelle deltagerdata (IPD)
Planlægger du at dele individuelle deltagerdata (IPD)?
Lægemiddel- og udstyrsoplysninger, undersøgelsesdokumenter
Studerer et amerikansk FDA-reguleret lægemiddelprodukt
Studerer et amerikansk FDA-reguleret enhedsprodukt
Disse oplysninger blev hentet direkte fra webstedet clinicaltrials.gov uden ændringer. Hvis du har nogen anmodninger om at ændre, fjerne eller opdatere dine undersøgelsesoplysninger, bedes du kontakte register@clinicaltrials.gov. Så snart en ændring er implementeret på clinicaltrials.gov, vil denne også blive opdateret automatisk på vores hjemmeside .