Многоцентровое исследование для проверки niPGT-A (niPGT-A)
Проспективное обсервационное многоцентровое международное исследование по валидации неинвазивного преимплантационного генетического теста на анеуплоидию эмбрионов в отработанных питательных средах (niPGT-A).
Аномальное число хромосом, или анеуплоидия, часто встречается у эмбрионов человека. Он является причиной более половины всех выкидышей и основной причиной врожденных пороков развития. Кроме того, было описано, что анеуплоидия также может влиять на имплантацию эмбриона. Таким образом, выбор эмбрионов, имеющих наилучшие шансы на имплантацию и превращение в здорового ребенка, является одним из наиболее важных шагов в области вспомогательной репродукции.
Недавние достижения в области генетических технологий, такие как секвенирование следующего поколения (NGS), позволили обнаруживать анеуплоидию с большей чувствительностью. Применение этого метода к биоптатам трофэктодермы, взятым у эмбрионов перед переносом в матку, позволило понять клиническое влияние хромосомного статуса. Этот процесс скрининга эмбрионов, чтобы убедиться, что у них правильное число хромосом, и найти какие-либо структурные аномалии в хромосомах, называется преимплантационным генетическим тестированием на анеуплоидию (PGT-A). Для этого требуется специальное оборудование и обученный персонал, что увеличивает затраты и риски, поэтому в качестве альтернативы ищут неинвазивные методы. Эти неинвазивные процедуры были изучены некоторыми группами, анализирующими отработанную культуральную среду, в которой эмбрион инкубируется до момента переноса или замораживания. В повседневной жизни эта среда выбрасывается после завершения культивирования эмбриона, но сообщалось, что она содержит следы эмбриональной бесклеточной ДНК (вкДНК), которые могут представлять генетическую нагрузку эмбриона. Однако в настоящее время результаты разных исследований сильно различаются, при этом процент конкордантных результатов между биопсией трофэктодермы и среды колеблется от 3,5 до 85,7%.
Таким образом, основной целью этого проекта является валидация нового неинвазивного метода PGT-A (niPGT-A), основанного на улучшенном сборе и анализе питательных сред для достижения более высоких показателей чувствительности и специфичности и снижения эффекта. некоторых внутренних трудностей, таких как низкий ввод вкДНК эмбриона, мозаицизм и материнское заражение.
Обзор исследования
Статус
Условия
Вмешательство/лечение
Подробное описание
Эмбрионы человека имеют более высокие показатели анеуплоидии (20-80%), чем другие виды. Значительная часть этих анеуплоидных эмбрионов способна достичь стадии бластоцисты. Однако, в зависимости от типа анеуплоидии, некоторые из них не смогут имплантироваться в матку, в то время как другие имплантируются, но не смогут осуществить раннее эмбриональное развитие (выкидыш) или очень редко приводят к рождению живорожденных детей с определенными аномалиями. Поэтому важно идентифицировать анеуплоидные эмбрионы. Важно идентифицировать эмбрионы с риском анеуплоидных хромосом у пациенток с пожилым материнским возрастом (AMA), рецидивирующей неудачей имплантации (RIF) или привычным невынашиванием беременности (RM).
Выявление анеуплоидий особенно важно у эмбрионов от пациентов с более высоким риском анеуплоидии, таких как пациенты с поздним материнским возрастом (AMA), рецидивирующей неудачей имплантации (RIF) или привычным невынашиванием беременности (RM). Следовательно, нормальная морфология и развитие эмбриона зависят от набора хромосом.
Метод PGT-A анализирует полное хромосомное содержимое отдельной клетки с высокой чувствительностью и специфичностью, но требует инвазивной биопсии для получения эмбрионального материала для генетического анализа. Таким образом, неинвазивные методы, заменяющие существующий инвазивный метод тестирования, будут полезны для повышения безопасности матери и плода.
В последнее время в области генетического тестирования было сделано много научных достижений. В отработанных средах для культивирования эмбрионов была обнаружена бесклеточная ДНК (вкДНК). Происхождение вкДНК на стадии бластоцисты может быть связано с апоптотическими событиями, которые могут происходить во время нормального развития. Это побудило различные исследовательские группы провести анализ отработанных питательных сред.
Первоначально были проведены различные исследования для выявления специфических генов, связанных с моногенными нарушениями (MTHFR9, HBA1/HBA210, SRY11). Недавно была разработана неинвазивная PGT-A с сильно различающимися результатами по степени соответствия (3,5%, 59,1%, и 85,7%, 30,6%). Хромосомный статус эмбриона по ДНК, присутствующей в отработанной культуральной среде, сравнивали со статусом, полученным по стандартному протоколу с использованием биопсии трофэктодермы. Различия в опубликованных результатах могут быть связаны с применением разных методологий, поскольку использовались разные методы амплификации и обнаружения — aCGH или NGS. Более того, показатели конкордантности определялись по-разному в каждом исследовании, т. е. результаты анеуплоидии в отработанных питательных средах и биопсии трофэктодермы можно было считать конкордантными, несмотря на наличие разных анеуплоидных хромосом.
Влияние условий культивирования на эффективность неинвазивного подхода было исследовано Hammond et al (2016). Они обнаружили постоянно очень низкий уровень загрязнения ДНК (митохондриальной и ядерной ДНК) в контрольных средах из трех различных типов коммерческих сред, которые не подвергались воздействию эмбрионов. Считается, что наблюдаемый низкий базовый уровень загрязнения ДНК происходит из-за белковой добавки к культуральной среде.
Наконец, на PGT-A могут влиять два важных фактора: загрязнение материнской ДНК из клеток гранулезы (MCC) и мозаицизм.
Для улучшения результатов программ ЭКО (экстракорпоральное оплодотворение) необходимо выявить эмбрион с наивысшим имплантационным потенциалом. Хромосомный анализ эмбрионов позволяет выбрать эуплоидные эмбрионы, которые имеют более высокую вероятность успешной имплантации.
Разработка неинвазивного протокола PGT-A улучшит текущие методологии, используемые для идентификации этих эуплоидных эмбрионов, избегая вредного воздействия биопсии на эмбрион и снижая экономические затраты.
Первоначальный оценочный размер выборки составил 3245 эмбрионов (каждый эмбрион рассматривается как объект исследования), учитывая процент отсева 30%.
Данные будут сгруппированы и проанализированы в Igenomix в трех временных точках исследования: после обработки 25 эмбрионов каждого центра (для оценки реализации методологии), после обработки 30% образцов (в качестве промежуточного проверить результаты) и в конце исследования для окончательного анализа, включая последующее наблюдение за клиническим исходом.
После промежуточного анализа, проведенного при 30% пополнения, общий размер выборки был пересчитан как 2620 выборок с учетом коэффициента отсева 5% в соответствии с коэффициентом отсева, наблюдаемым во время промежуточного анализа. Результаты промежуточного анализа опубликованы в Rubio et al., AJOG 2020.
Тип исследования
Регистрация (Действительный)
Контакты и местонахождение
Места учебы
-
-
-
Buenos Aires, Аргентина, C1425DGQ
- Pregna Medicina Reproductiva
-
-
-
-
Porto Alegre
-
Boa Vista, Porto Alegre, Бразилия, 91330-002
- Nilo Frantz - Centro de Reprodução Humana
-
-
-
-
-
Madrid, Испания, 28036
- ProcreaTec
-
-
-
-
Roma
-
Rome, Roma, Италия, 00197
- Genera Rome
-
-
-
-
Cdmx
-
Mexico City, Cdmx, Мексика, 05120
- NASCERE
-
-
-
-
-
Lima, Перу, 15036
- Inmater - Clínica de Fertilidad
-
-
-
-
California
-
San Diego, California, Соединенные Штаты, 92130
- San Diego Fertility Center
-
-
Massachusetts
-
Boston, Massachusetts, Соединенные Штаты, 02109
- Boston IVF Fertility Clinic
-
-
Washington
-
Arlington, Washington, Соединенные Штаты, 22203
- Dominion Fertility
-
-
-
-
-
Istanbul, Турция, 07720
- Bahçeci Group
-
-
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Метод выборки
Исследуемая популяция
Описание
Критерии включения:
- Случаи PGT-A с биопсией трофэктодермы и SET по любому медицинскому показанию и подписанной письменной формой информированного согласия, одобренной EC / IRB после того, как они были должным образом проинформированы о характере исследования и добровольно приняли участие в исследовании.
- Разрешены ИКСИ (внутрицитоплазматическая инъекция сперматозоидов), ЭКО (экстракорпоральное оплодотворение) или ИКСИ/ЭКО со свежими ооцитами от пар.
Примечание. Допускается использование донорской спермы.
- Допускаются только свежие ооциты.
- Допускается перенос свежих и отложенных эмбрионов. Примечание. В случае отсроченного переноса эмбрионов эмбрионы необходимо витрифицировать всегда после биопсии бластоцисты.
- Возраст: 20-44 года (оба включены).
Критерий исключения:
- Известный аномальный кариотип у члена пары.
- Преимплантационное генетическое тестирование на моногенные заболевания (PGT-M) или преимплантационное генетическое тестирование на структурные перестройки (PGT-SR) исключены.
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
- Наблюдательные модели: Другой
- Временные перспективы: Перспективный
Когорты и вмешательства
Группа / когорта |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
Эмбрионы, проходящие PGT-A / niPGT-A
Эмбрионы от пациенток ЭКО в возрасте от 20 до 44 лет, прошедших PGT-A по любому медицинскому показанию, с собственными циклами донорства ооцитов или яйцеклеток и с переносом одного эмбриона (SET)
|
PGT-A будет проводиться в соответствии с обычной клинической практикой: образцы биопсии трофэктодермы из бластоцисты анализируются с помощью NGS для скрининга числовых хромосомных аномалий.
Неинвазивный преимплантационный генетический тест на анеуплоидию эмбриона с анализом отработанных питательных сред, в которых эмбрион инкубируется до момента витрификации.
Эта среда содержит следы эмбриональной бесклеточной ДНК (вкДНК), которые могут отражать генетическую нагрузку эмбриона.
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Хромосомный статус эмбрионов
Временное ограничение: 6-7 дней развития эмбриона
|
Конкордантность по количеству и структуре хромосом между результатами анализа биоптатов и отработанных сред бластоцисты.
|
6-7 дней развития эмбриона
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Живая рождаемость
Временное ограничение: 40 недель
|
Количество детей, рожденных за один перенос эмбрионов
|
40 недель
|
|
Уровень беременности
Временное ограничение: 20 недель
|
Количество беременностей на перенос эмбриона
|
20 недель
|
|
Частота клинических выкидышей
Временное ограничение: 20 недель
|
Количество клинических выкидышей на общее число беременностей
|
20 недель
|
|
Анализ продуктов зачатия (POC)
Временное ограничение: До 20 недель
|
Ткань плаценты и/или плода, оставшаяся в матке после самопроизвольного прерывания беременности
|
До 20 недель
|
Соавторы и исследователи
Спонсор
Следователи
- Учебный стул: Carlos Simón, MD PhD, Igenomix
- Главный следователь: Carmen Rubio, BSc PhD, Igenomix
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования (Действительный)
Первичное завершение (Действительный)
Завершение исследования (Действительный)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Действительный)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Действительный)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Дополнительные соответствующие термины MeSH
Другие идентификационные номера исследования
- IGX1-NIP-CS-18-02-SUB1
Планирование данных отдельных участников (IPD)
Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?
Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы
Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.
Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .