验证 niPGT-A 的多中心研究 (niPGT-A)

人类胚胎的非整倍体率 (20-80%) 高于其他物种。 这些非整倍体胚胎中有相当一部分能够达到囊胚阶段。 然而，根据非整倍体类型的不同，有些会无法植入子宫，而有些则会植入但无法进行早期胚胎发育（流产），或者在极少数情况下会导致活产婴儿出现特定异常。 因此，鉴定非整倍体胚胎很重要 在高龄产妇 (AMA)、复发性着床失败 (RIF) 或复发性流产 (RM) 患者中鉴定有非整倍体染色体风险的胚胎很重要。

非整倍体的鉴定对于非整倍体风险较高的患者（例如高龄产妇 (AMA)、复发性植入失败 (RIF) 或复发性流产 (RM) 的患者）的胚胎尤为重要。 因此，正常的胚胎形态和发育依赖于染色体补体。

PGT-A 技术以高灵敏度和特异性分析单个细胞的完整染色体内容，但需要侵入性活检以获得用于遗传分析的胚胎材料。 因此，替代现有侵入性检测方法的非侵入性方法将有助于提高母婴安全。

近来，基因检测领域出现了许多研究进展。 在用过的胚胎培养基中观察到游离 DNA (cfDNA)。 囊胚期 cfDNA 的起源可归因于正常发育过程中可能发生的细胞凋亡事件。 这鼓励了不同的研究小组对用过的培养基进行分析。

最初进行了各种研究以检测与单基因疾病相关的特定基因（MTHFR9、HBA1/HBA210、SRY11）。 最近，开发了非侵入性 PGT-A，其一致性率结果差异很大（3.5%、59.1%、 和 85.7%、30.6%）。 将来自用过的培养基中存在的 DNA 的胚胎染色体状态与使用滋养外胚层活检按照标准方案获得的染色体状态进行比较。 报告结果的差异可能与应用的不同方法有关，因为使用了不同的扩增和检测方法——aCGH 或 NGS。 此外，每项研究的一致性率定义不同，即尽管显示不同的非整倍体染色体，但用过的培养基和滋养外胚层活检中的非整倍体结果可以被认为是一致的。

Hammond 等人 (2016) 研究了培养条件对非侵入性方法效率的影响。 他们发现，在三种不同类型的商业培养基中，未接触胚胎的培养基对照中始终存在非常低水平的 DNA 污染（线粒体和核 DNA）。 观察到的低基线 DNA 污染水平被认为源于培养基的蛋白质补充。

最后，两个相关因素可能对 PGT-A 产生影响：颗粒细胞 (MCC) 的母体 DNA 污染和嵌合体。

为了提高 IVF（体外受精）计划的结果，需要确定具有最高植入潜力的胚胎。 胚胎染色体分析允许选择具有更高植入成功率的整倍体胚胎。

非侵入性 PGT-A 协议的发展将改进目前用于识别那些整倍体胚胎的方法，避免活检对胚胎的不利影响并降低经济成本。

考虑到 30% 的辍学率，计算的初始估计样本量为 3245 个胚胎（每个胚胎都被视为研究对象）。

数据将在研究的三个时间点在 Igenomix 进行分组和分析：一旦处理了每个中心的 25 个胚胎（以评估方法的实施），在处理了 30% 的样本之后（作为临时检查结果），并在研究结束时进行最终分析，包括临床结果的跟进。

在招聘完成 30% 时进行中期分析后，根据中期分析期间观察到的退出率，考虑 5% 的退出率，重新计算总样本量为 2620 个样本。 中期分析结果发表于 Rubio 等人，AJOG 2020。