Očekává se, že kombinovaná léčba isotretinoinem a tamoxifenem poskytne kompletní ochranu proti těžkému akutnímu respiračnímu syndromu Coronavirus (Combination)

Studie je randomizovaná intervenční srovnávací studie fáze II. Očekává se, že trvání studie pro každý subjekt bude 3 měsíce.160 Do studie budou zařazeni dospělí pacienti mužského a ženského pohlaví s pozitivní diagnózou COVID-19 a splňující níže uvedená kritéria pro zařazení. Zkušební populace se bude skládat z obou pohlaví.

Typ studie:Intervenční [Změnit...]

Primární účel: Léčba

Fáze studie: Fáze 2 Model intervenční studie: Sekvenční přiřazení

Počet ramen: 3

Maskování: Žádné (otevřený štítek)

Alokace: Náhodné

Zápis: 160 [předpokládá se]

Isotretinoin (13cis RA) může být schopen inhibovat vstup COVID 2019 prostřednictvím down-regulace ACE2, proteinu AT1 a uvolňování intracelulárního vápníku zprostředkovaného Ang II spíše než inhibicí interleukinu-6 (IL-6), a to je diskutováno následovně:

Pandemie COVID-19 způsobená SARS-COV-2 nakazila více než 2 000 000 lidí a způsobila více než 150 000 úmrtí. Klíčovým hostitelským buněčným proteinem potřebným pro vstup viru je angiotensin-konvertující enzym 2 (ACE2), jehož exprese byla prokázána v mnoha tkáních včetně alveolárních epiteliálních buněk typu II v plicích, ústní sliznici a střevě, srdci, ledvinách, endotelu a kůži. Buňky exprimující ACE2 mohou fungovat jako domácí buňky a jsou náchylné k infekci SARS-CoV-2, protože receptor ACE2 usnadňuje vstup a replikaci buněčného viru. Studie prokázala, že pacienti s hypertenzí a diabetes mellitus mohou být vystaveni vyššímu riziku infekce SARS-CoV-2, protože tito pacienti jsou často léčeni ACE inhibitory (ACEI) nebo blokátory receptorů angiotenzinu II typu I (ARB), které byly dříve navrhoval zvýšit expresi ACE2. V další studii Sinha et al, kteří analyzovali veřejně dostupný soubor dat Connectivity Map (CMAP) před/po transkriptomických profilů pro léčbu léků v buněčných liniích pro více než 20 000 malých molekul, byl isotretinoin nejsilnějším down-regulátorem ACE 2 receptorů. Na druhou stranu našli v CMAP 6 léků, které jsou v současné době zkoumány v klinických studiích pro léčbu COVID-19 (chlorochin, thalidomid, methylprednisolon, losartan, lopinavir a ritonavir, z Clinictrials.gov), u žádného z nich nebylo zjištěno, že by významně měnilo expresi ACE2 (P>0,1) Další studie navíc prokázala, že isotretinoin je potenciální inhibitor proteázy podobné papainu (PLpro), což je protein kódovaný geny SARS-CoV-2 a považovaný za jeden z proteinů, na který by se měla zaměřit léčba COVID-19 prováděním virtuálních screening ligandů. Jak již dříve diskutoval hlavní řešitel, (13cRA) je nejsilnější down-regulátor ACE2. a hlavní výzkumník očekává, že 13cRA může inhibovat nebo dowenrgulat ACE2 přímou interakcí a vazbou s transmembránovým ACE2, což naznačuje jeho terapeutický potenciál při prevenci vstupu COVID 2019 do hostitelské buňky.

Předchozí studie související s koronavirem těžkého akutního respiračního syndromu (SARS-CoV) a SARS-CoV FP FP ukázaly, že vápník (Ca2+) hraje důležitou roli pro fuzogenní aktivitu prostřednictvím vazebné kapsy Ca2+ s konzervovanou kyselinou glutamovou (E) a kyselinou asparagovou. (D) zbytky prokázaly, že intracelulární Ca2+ zvyšuje infekci MERS-CoV WT PPs přibližně dvojnásobně a že E891 je rozhodujícím zbytkem pro interakci Ca2+. Elektronová spinová rezonance odhalila, že toto zlepšení lze připsat Ca2+ zvyšujícímu uspořádání membrány relevantní pro fúzi MERS-CoV FP. Je zajímavé, že izotermická kalorimetrická titrace ukázala, že MERS-CoV FP váže jeden Ca2+, na rozdíl od SARS-CoV FP, který se váže na dva ionty Ca2+.

Angiotensin II zvyšuje aktivitu intracelulárního vápníku v podocytech intaktního glomerulu. Blokátor Ca2+ kanálů nikardipin typu L neovlivnil zvýšení [Ca2+] zprostředkované Ang II a předpokládá se, že vazba SARS-CoV-2 na ACE2 může zeslabit reziduální aktivitu ACE2, čímž se rovnováha ACE/ACE2 vychýlí do stavu zvýšená aktivita angiotenzinu II vedoucí k plicní vazokonstrikci a zánětlivému a oxidativnímu poškození orgánů, což zvyšuje riziko akutního poškození plic (ALI). AngII prostřednictvím AT1 receptorů upreguluje mnoho prozánětlivých genů, jako je vaskulární buněčná adhezní molekula-1 (VCAM-1), intercelulární adhezní molekula-1 (ICAM-1), interleukin-6 (IL-6).30 ale 13cis RA specificky down-regulovala protein AT1 způsobem závislým na dávce a čase. Down-regulace exprese AT1 vede ke sníženému AngII-zprostředkovanému intracelulárnímu uvolňování vápníku Podobně jako u down-regulace receptoru, léčba 13cRA vedla k významnému snížení AT1 mRNA. AT1,

Isotretinoin (13cis RA) může být schopen inhibovat infekci COVID 2019 zvrácením androgenního indukčního a aktivačního účinku (DHT) na expresi TMPRSS2 a pomáhá předcházet štěpení a aktivaci jak spike proteinu (S) COVID 2019, tak virového receptoru, a diskutuje se o tom takto:

TMPRSS2 je jak nejčastěji pozměněný gen u primární rakoviny prostaty, tak kritický faktor umožňující buněčnou infekci koronaviry, včetně SARS-CoV-2. Modulace jeho exprese steroidy by mohla přispět k mužské převaze závažných infekcí a vzhledem k tomu, že TMPRSS2 nemá žádné známé nepostradatelné funkce a jsou dostupné inhibitory, je atraktivním cílem pro prevenci nebo léčbu respiračních virových infekcí.

TMPRSS2, klíčový regulátor rakoviny prostatyTMPRSS2 byl poprvé identifikován u rakoviny prostaty krátce poté, co byl gen původně klonován. Buněčné linie rakoviny prostaty silně upregulovaly expresi TMPRSS2 v reakci na androgeny. TMPRSS2 je exprimován na luminální straně epitelu prostaty a jeho exprese je zvýšena ve tkáni karcinomu prostaty ve srovnání s nerakovinnou tkání prostaty. Je pozoruhodné, že gen TMPRSS2 je partnerem v jedné z nejběžnějších událostí genové fúze u solidních nádorů: somatické genové přeuspořádání zahrnující TMPRSS2 s členem rodiny onkogenních transkripčních faktorů ETS, nejčastěji ERG. Tato fúze se vyskytuje u přibližně 50 % primárních karcinomů prostaty u mužů evropského původu. Zatímco ERG není normálně regulována androgenem, genová fúze staví vedle sebe regulační prvky androgenního receptoru TMPRSS2 s genem ERG. ERG gen je následně řízen signalizací androgenního receptoru a je vysoce exprimován v rakovinách prostaty obsahujících fúzi TMPRSS2:ERG. Je zajímavé, že prevalence fúze TMPRSS2:ERG je nižší u nádorů prostaty jak černochů, tak asijských mužů. Význam toho pro současnou pandemii COVID-19 je nejasný. TMPRSS2: ERG fúzní rakoviny mají také odlišný soubor rizikových faktorů souvisejících s hormonální signalizací. Například muži s vyšší geneticky podmíněnou transkripční aktivitou androgenního receptoru mají vyšší riziko TMPRSS2: ERG fúzně-pozitivní karcinom prostaty, ale ne fúzně-negativní karcinom prostaty

TMPRSS2 je signální cílový gen androgenního receptoru a androgenem regulovaná buněčná povrchová serinová proteáza exprimovaná převážně v prostatických a plicních epiteliálních buňkách. ) zůstává neznámý. Důležité je, že na rozdíl od jiných TTSP je transkripce TMPRSS2 regulována androgenními ligandy a androgenním receptorem (AR). Existuje pozitivní korelace mezi AR a TMPRSS2 v mikrodisekovaném epitelu primárního nádoru (r2 = 0,39; p

Dihydrotestosteron (DHT) významně a dramaticky indukoval expresi proteinu TMPRSS2 se dvěma molekulovými hmotnostmi 60 (plná délka) a 38 kDa (N-konec) způsobem závislým na dávce

Údaje z čínské epidemie ukazují, že úmrtnost mužů je téměř o 50 procent vyšší než u žen, ukazují, že raný výzkum z Číny naznačuje, že ženy a děti zemřou méně než muži, pokud se nakazí koronavirem. Úmrtnost na Covid-19, onemocnění, které se u lidí nakažených koronavirem vyvíjí, je pro všechny nízká: zemřelo pouze 2,4 procenta ze 44 672 lidí v čínské studii. Ale ačkoli se touto nemocí nakazí zhruba stejný počet mužů a žen, u mužů je pravděpodobnější, že se u nich vyvine tak závažný případ COVID-19, že zemřou.

Více než 70 procent úmrtí na koronaviry v Itálii bylo mezi muži, ale tamní vědci přiznávají, že jsou zmateni genderovou propastí. Nejméně 3 400 lidí v Itálii zemřelo na zničující nemoc - včera oznámila, že má vyšší počet obětí než Čína - ale méně než 1 000 z nich byly ženy. Podle italské agentury pro výzkum veřejného zdraví je také pravděpodobnější, že se infekce nakazí v první řadě muži a tvoří 60 procent potvrzených případů. Dřívější analýza zjistila, že 80 procent úmrtí bylo u mužů a pouze 20 procent u žen – ale rozdíl se postupem času zmenšil

Podle těchto údajů se hlavní výzkumník domnívá, že existuje silný vztah mezi vysokou úmrtností u mužů a androgenním účinkem, konkrétně účinkem DHT na protein TMPRSS2, který je používán covidem 2019 při buněčné invazi a vstupu a v závislosti na těchto údajích se vztahuje k šesti hormonům konkrétně (DHT) , Výzkumník byl schopen objevit syrovátkové ženy a děti s menší pravděpodobností zemřít na nemoc než muži. Výzkumník tedy rozdělil infikované pacienty podle jejich šesti hormonů, protože TMPRSS2 je androgenem regulovaná serinová proteáza buněčného povrchu exprimovaná převážně v prostatických a plicních epiteliálních buňkách TMPRSS2.

Potenciální účinek androgenu (DHT) na expresi TMPRSS2 u dětí je menší než jeho účinek u žen a mužů, po kterém následuje virová závažnost a vitalita u mužů ve srovnání s dětmi a ženami. .

Potenciální účinek androgenu (DHT) na expresi TMPRSS2 u žen je menší než u mužů a následuje virová závažnost a vitalita u mužů ve srovnání se ženami.

Hlavní výzkumník si tedy myslí, že když někteří výzkumníci zkoumali roli pohlavních steroidů v patogenezi SARS-CoV srovnáním gonadektomizovaných a kontrolních protějšků po infekci. Gonadektomie nebo léčba flutamidem, nesteroidním antiandrogenem, neovlivnily morbiditu a mortalitu myších samců po letální infekci MA15, mohou se mýlit ve svých závěrech, když naznačují, že androgeny nehrají roli v patogenezi SARS-CoV, protože Gonadektomie nebo léčba flutamidem zcela neovlivní ani neinhibuje koncentraci DHT a jeho derivátů (5α-Androstan-3α,17β-Diol) ve tkáních a krvi, protože po inhibici testosteronu flutamidem. dráha tvorby DHT bude aktivována pro kompenzaci inhibovaných hladin testosteronu, takže exprese TMPRSS2 bude významně indukována DHT a léčená zvířata nebudou ovlivněna v případě léčby flutamidem, ale v případě gonadektomie bude exprese TMPRSS2 snížena o Inhibice DHT pouze v případě, že po určité době uplynula gonadektomie, aby se zajistilo, že DHT a jeho deriváty zcela poklesly na hladiny, které mu nedovolí ovlivnit expresi TMPRSS2 a u samic myší po zablokování estrogenových receptorů uhynulo kvůli zvýšené tvorbě androgenních hormony.

Studie prokázala, že kyselina 13-cis-retinová kompetitivně a reverzibilně inhibuje dihydrotestosteron, takže hlavní výzkumník očekává významnou modulaci exprese TMPRSS2 po léčbě kyselinou 13-cis-retinovou prostřednictvím dočasného zabránění účinku dihydrotestosteronu (DHT) na podporu a podporu TMPRSS2. výraz. A transmembránové serinové proteázy typu II TMPRSS2, které mohou štěpit a aktivovat spike protein (S) koronaviru těžkého akutního respiračního syndromu (SARS-CoV) pro membránovou fúzi. Kromě toho tyto proteázy štěpí virový receptor, karboxypeptidáza angiotenzin-konvertující enzym 2 (ACE2), a bylo navrženo, že štěpení ACE2 zvyšuje virovou infekčnost.

Studie prokázala, že COVID-19 snižuje hladinu testosteronu u mužů změnou fungování gonád. Takže zvýšená závažnost onemocnění u mužů může být způsobena sníženým testosteronem. Ale podle vysvětlení hlavního výzkumníka COVID-19 snižuje hladiny testosteronu, protože u pacientů infikovaných COVID 19 dochází k dramatickému snížení hladiny cholesterolu ve srovnání se zdravými kontrolami. Hladiny cholesterolu poměrně rychle klesají během raných fází infekce a zvyšují se, když se pacient začíná zotavovat. Z toho vyplývá, že cholesterol může hrát důležitou roli při obraně těla proti takovým infekcím a v závislosti na vysvětlení hlavního výzkumníka je testosteron syntetizován. počínaje cholesterolem přes dobře charakterizovanou steroidní biosyntetickou dráhu zahrnující sekvenční působení více enzymů Takže, když jsou hladiny cholesterolu sníženy, tento pokles bude následovat snížení hladiny testosteronu a podle tohoto vysvětlení se testosteronová terapie v COVID 2019 nedoporučuje, ale je dočasná Doporučuje se inhibitor DHT, jako je Isotretinoin, protože tato léčba testosteronem inhibuje syntézu cholesterolu zpětnovazební inhibicí a snižuje vychytávání cholesterolu Leydigovými buňkami ve varlatech, což také povede k nadměrnému zvýšení hladin DHT a jeho derivátů v různých tkáních, což vyvolá TMPR SS2. protože DHT je účinným aktivátorem TMPRSS2 a bude následovat zpracování a aktivace spike proteinu COVID2019, aby navázal své receptory ACE2 v plicích a ledvinách, což vede k jejich poškození konkrétně ve varlatech, protože obsahuje vysoké hladiny proteáz a ACE2. Serinové proteázy se objevují jako důležité přispěvatele k produkci, zrání a funkční způsobilosti spermií.

Tamoxifen může být schopen inhibovat COVID 2019 inhibicí acidifikace endozomů a lysozomů spíše než inhibicí lysozomálních enzymů.

Studie prokázala, že tamoxifen způsobuje redistribuci slabě zásaditých chemoterapeutik z kyselých organel do jádra v buňkách odolných vůči lékům. Činidla, která narušují okyselení organel (např. monensin, bafilomycin A1), způsobují podobnou redistribuci. Měření buněčného pH v několika buněčných liniích ukazuje, že tamoxifen inhibuje acidifikaci endozomů a lysozomů bez ovlivnění cytoplazmatického pH. Podobně jako monensin snižoval tamoxifen rychlost vezikulárního transportu recyklačními a sekrečními cestami. Organelární acidifikace je nutná pro mnoho buněčných funkcí a její narušení by mohlo být příčinou mnoha vedlejších účinků tamoxifenu. Studie prokázala, že fagocytóza je osídlena tamoxifenem a chlorochinem v epiteliálních buňkách sítnice. Studie prokázala, že tamoxifen má slabou bazickou vlastnost a zvyšuje endolysozomální pH a mění endozomální dynamiku. Důležité je, že léčba TAM zlepšila přežití myší, kterým byla injikována letální dávka STx1 nebo STx2. Ochranný účinek byl nezávislý na estrogenových receptorech, ale závisel na slabé bazické vlastnosti TAM, což umožnilo TAM zvýšit endolysozomální pH a změnit endozomální dynamiku. Studie prokázala, že tamoxifen má antimalarický účinek prostřednictvím léčby myší infikovaných P. berghei, které vykazují nižší hladiny parazitémie a nevyvíjejí známky mozkové malárie, bylo zjištěno, že tamoxifen zabraňuje plicní fibróze a snižuje hladiny TGFβ-1 v séru. Studie prokázala, že tamoxifen má lepší inhibiční účinek na endozomální a lysozomální cysteinové proteázy než chlorochin. Katepsiny jsou endozomální a lysozomální cysteinové proteázy, které hrají důležitou roli při degradaci proteinů v různých buněčných procesech včetně endocytické dráhy a autofagie. Role katepsinů ve virové infekci byla poprvé identifikována Huangem a kol. a zjistili, že jeden inhibitor cysteinových proteáz E64d a specifický inhibitor katepsinu L Z-FY(t-Bu)-DMK jsou schopny blokovat infekci SARS-CoV. Katepsin D byl citlivější na tamoxifen než na chlorochin. Expozice tamoxifenu snižovaly aktivitu kathepsinu D při koncentracích nižších než 10 pM. Účinek chlorochinu začal při 15 pM

.