Oczekuje się, że terapia skojarzona z izotretynoiną i tamoksyfenem zapewni całkowitą ochronę przed koronawirusem zespołu ciężkiej ostrej niewydolności oddechowej (Combination)

Badanie jest randomizowanym interwencyjnym badaniem porównawczym fazy II. Oczekuje się, że czas trwania badania dla każdego podmiotu wyniesie 3 miesiące.160 dorośli pacjenci płci męskiej i żeńskiej z pozytywnym rozpoznaniem COVID-19 i spełniający poniższe kryteria włączenia zostaną włączeni do badania. Populacja badana będzie składać się z przedstawicieli obu płci.

Rodzaj badania:Interwencyjne [Zmień...]

Główny cel: leczenie

Faza badania: Model badania interwencyjnego fazy 2: przydział sekwencyjny

Liczba ramion: 3

Maskowanie: brak (otwarta etykieta)

Przydział: losowy

Zapisy: 160 [Przewidywane]

Izotretynoina (13cis RA) może być w stanie hamować wejście COVID 2019 poprzez regulację w dół ACE2, białka AT1 i wewnątrzkomórkowego uwalniania wapnia, w którym pośredniczy Ang II, zamiast hamowania interleukiny-6 (IL-6), co omówiono w następujący sposób:

Pandemia COVID-19 spowodowana przez SARS-COV-2 zainfekowała ponad 2 000 000 osób, powodując ponad 150 000 zgonów. Kluczowym białkiem komórkowym gospodarza wymaganym do wniknięcia wirusa jest enzym konwertujący angiotensynę 2 (ACE2), którego ekspresję wykazano w wielu tkankach, w tym w komórkach nabłonka pęcherzyków płucnych typu II w płucach, błonie śluzowej jamy ustnej i jelitach, sercu, nerkach, śródbłonku i skórze. Komórki wykazujące ekspresję ACE2 mogą działać jak komórki macierzyste i są podatne na zakażenie SARS-CoV-2, ponieważ receptor ACE2 ułatwia wnikanie i replikację wirusa komórkowego. Badanie wykazało, że pacjenci z nadciśnieniem i cukrzycą mogą być bardziej narażeni na zakażenie SARS-CoV-2, ponieważ ci pacjenci są często leczeni inhibitorami ACE (ACEI) lub blokerami receptora angiotensyny II typu I (ARB), które zostały wcześniej sugerowano zwiększenie ekspresji ACE2. W innym badaniu przeprowadzonym przez Sinha i wsp., którzy przeanalizowali publicznie dostępny zestaw danych Connectivity Map (CMAP) profili przed/potranskryptomicznych do leczenia farmakologicznego w liniach komórkowych dla ponad 20 000 małych cząsteczek, izotretynoina była najsilniejszym regulatorem w dół receptorów ACE 2. Z drugiej strony znaleźli 6 leków w CMAP, które są obecnie badane w badaniach klinicznych pod kątem leczenia COVID-19 (chlorochina, talidomid, metyloprednizolon, losartan, lopinawir i rytonawir, z Clinicaltrials.gov), żaden z nich nie zmienił znacząco ekspresji ACE2 (P>0,1) Co więcej, inne badanie wykazało, że izotretynoina jest potencjalnym inhibitorem proteazy papainopodobnej (PLpro), która jest białkiem kodowanym przez geny SARS-CoV-2 i jest uważana za jedno z białek, które powinny być celem leczenia COVID-19 poprzez wykonywanie wirtualnych skrining ligandów. Jak główny badacz omówił to wcześniej, (13cRA) jest najsilniejszym regulatorem w dół ACE2. a główny badacz spodziewa się, że 13cRA może hamować lub osłabiać ACE2 poprzez bezpośrednią interakcję i wiązanie z transbłonowym ACE2, co sugeruje jego potencjał terapeutyczny w zapobieganiu przedostawaniu się COVID 2019 do komórki gospodarza.

Poprzednie badania nad powiązanym koronawirusem zespołu ostrej niewydolności oddechowej (SARS-CoV) i SARS-CoV FP FP wykazały, że wapń (Ca2+) odgrywa ważną rolę w aktywności fuzogennej poprzez kieszeń wiążącą Ca2+ z konserwowanym kwasem glutaminowym (E) i kwasem asparaginowym (D) pozostałości wykazały, że wewnątrzkomórkowy Ca2+ zwiększa infekcję MERS-CoV WT PP około dwukrotnie i że E891 jest kluczową resztą dla interakcji Ca2+. Rezonans spinowy elektronów ujawnił, że to wzmocnienie można przypisać zwiększonemu uporządkowaniu błon MERS-CoV FP związanemu z fuzją Ca2+. Co ciekawe, izotermiczne miareczkowanie kalorymetryczne wykazało, że MERS-CoV FP wiąże jeden Ca2+, w przeciwieństwie do SARS-CoV FP, który wiąże się z dwoma jonami Ca2+.

Angiotensyna II zwiększa wewnątrzkomórkową aktywność wapnia w podocytach nienaruszonego kłębuszka. Nikardypina, bloker kanału Ca2+ typu L, nie wpływała na wzrost [Ca2+] za pośrednictwem Ang II i postulowano, że wiązanie SARS-CoV-2 z ACE2 może osłabiać resztkową aktywność ACE2, wypaczając równowagę ACE/ACE2 do stanu podwyższona aktywność angiotensyny II prowadząca do skurczu naczyń płucnych oraz zapalnych i oksydacyjnych uszkodzeń narządów, co zwiększa ryzyko ostrego uszkodzenia płuc (ALI). AngII poprzez receptory AT1 reguluje w górę wiele genów prozapalnych, takich jak cząsteczka adhezji komórek naczyniowych-1 (VCAM-1), cząsteczka adhezji międzykomórkowej-1 (ICAM-1), interleukina-6 (IL-6).30 ale 13cis RA specyficznie obniżał poziom białka AT1 w sposób zależny od dawki i czasu. Obniżenie ekspresji AT1 prowadzi do zmniejszenia wewnątrzkomórkowego uwalniania wapnia za pośrednictwem AngII. Podobnie w przypadku obniżenia poziomu receptora, leczenie 13cRA skutkowało znaczną redukcją mRNA AT1. 13cRA ma niezależny od glukozy i RAR/RXR mechanizm hamowania transkrypcji AT1,

Izotretynoina (13cis RA) może być zdolna do hamowania infekcji COVID 2019 poprzez odwrócenie efektu indukcji i aktywacji androgenów (DHT) na ekspresję TMPRSS2 i pomaga zapobiegać rozszczepianiu i aktywacji zarówno białka szczytowego (S) COVID 2019, jak i receptora wirusowego, i jest to omówione w następujący sposób:

TMPRSS2 jest zarówno genem najczęściej zmienianym w pierwotnym raku prostaty, jak i krytycznym czynnikiem umożliwiającym infekcję komórkową przez koronawirusy, w tym SARS-CoV-2. Modulacja jego ekspresji przez steroidy może przyczynić się do przewagi mężczyzn w ciężkich infekcjach, a biorąc pod uwagę, że TMPRSS2 nie ma znanych niezbędnych funkcji i dostępne są inhibitory, jest atrakcyjnym celem w zapobieganiu lub leczeniu wirusowych infekcji dróg oddechowych

TMPRSS2, kluczowy regulator w raku prostaty TMPRSS2 został po raz pierwszy zidentyfikowany w raku prostaty wkrótce po pierwotnym sklonowaniu genu. Linie komórkowe raka prostaty silnie zwiększały ekspresję TMPRSS2 w odpowiedzi na androgeny. TMPRSS2 ulega ekspresji po stronie światła nabłonka gruczołu krokowego, a jego ekspresja jest zwiększona w tkance raka gruczołu krokowego w porównaniu z tkanką nienowotworową gruczołu krokowego. Warto zauważyć, że gen TMPRSS2 jest partnerem w jednym z najczęstszych zdarzeń fuzji genów w guzach litych: rearanżacjach genów somatycznych obejmujących TMPRSS2 z członkiem rodziny onkogennych czynników transkrypcyjnych ETS, najczęściej ERG. Ta fuzja występuje w około 50% pierwotnych raków gruczołu krokowego u mężczyzn pochodzenia europejskiego. Podczas gdy ERG nie jest normalnie regulowana przez androgeny, fuzja genów zestawia elementy regulatorowe receptora androgenowego TMPRSS2 z genem ERG. Gen ERG jest w konsekwencji kontrolowany przez sygnalizację receptora androgenowego i ulega silnej ekspresji w raku prostaty niosącym fuzję TMPRSS2: ERG. Co ciekawe, częstość występowania fuzji TMPRSS2: ERG jest niższa w guzach prostaty zarówno u mężczyzn rasy czarnej, jak i azjatyckich. Związek tego z obecną pandemią COVID-19 jest niejasny.TMPRSS2: Nowotwory z fuzją ERG mają również odrębny zestaw czynników ryzyka związanych z sygnalizacją hormonalną. Na przykład mężczyźni z wyższą genetycznie uwarunkowaną aktywnością transkrypcyjną receptora androgenowego mają większe ryzyko raka prostaty z fuzją TMPRSS2: ERG, ale nie raka prostaty z ujemną fuzją

TMPRSS2 jest docelowym genem sygnalizacyjnym receptora androgenowego i regulowaną przez androgeny powierzchniową proteazą serynową, której ekspresja występuje głównie w prostacie i komórkach nabłonka płuc. ) pozostaje nieznany. Co ważne, w przeciwieństwie do innych TTSP, transkrypcja TMPRSS2 jest regulowana przez ligandy androgenne i receptor androgenowy (AR). Istnieje dodatnia korelacja między AR i TMPRSS2 w mikrodysekcyjnym nabłonku guza pierwotnego (r2 = 0,39; p

Dihydrotestosteron (DHT) znacząco i dramatycznie indukował ekspresję białka TMPRSS2 o dwóch masach cząsteczkowych 60 (pełna długość) i 38 kDa (N-koniec) w sposób zależny od dawki

Dane z chińskiej epidemii pokazują, że śmiertelność mężczyzn jest prawie o 50 procent wyższa niż kobiet. Wczesne badania z Chin sugerują, że kobiety i dzieci są mniej narażone na śmierć niż mężczyźni, jeśli złapią koronawirusa. Śmiertelność na Covid-19, chorobę wywoływaną przez osoby zakażone koronawirusem, jest niska dla wszystkich: zmarło tylko 2,4 procent z 44 672 osób objętych chińskim badaniem. Ale chociaż mniej więcej równa liczba mężczyzn i kobiet zapada na tę chorobę, mężczyźni są bardziej narażeni na tak poważny przypadek Covid-19, że umierają.

Ponad 70 procent zgonów z powodu koronawirusa we Włoszech dotyczyło mężczyzn, ale tamtejsi naukowcy przyznają, że są zdumieni różnicą płci. Co najmniej 3400 osób we Włoszech zmarło z powodu tej wyniszczającej choroby – wczoraj ogłosiło, że liczba ofiar śmiertelnych jest wyższa niż w Chinach – ale mniej niż 1000 z nich to kobiety. Według włoskiej agencji badań zdrowia publicznego mężczyźni są również bardziej narażeni na infekcję i stanowią 60 procent potwierdzonych przypadków. Wcześniejsza analiza wykazała, że ​​80 procent zgonów dotyczyło mężczyzn, a tylko 20 procent kobiet – ale różnica ta z czasem się zmniejszyła

Na podstawie tych danych główny badacz uważa, że ​​istnieje silny związek między wysoką śmiertelnością u mężczyzn a efektem androgennym, w szczególności wpływem DHT na białko TMPRSS2, które jest wykorzystywane przez covid 2019 w inwazji i wejściu komórek i w zależności od tych danych dotyczy sześciu hormonów konkretnie (DHT), badacz był w stanie odkryć, że kobiety i dzieci serwatki są mniej narażone na śmierć z powodu chorób niż mężczyźni. Tak więc badacz podzielił zakażonych pacjentów według ich sześciu hormonów, ponieważ TMPRSS2 jest regulowaną przez androgeny proteazą serynową na powierzchni komórki, wyrażaną głównie w komórkach nabłonka prostaty i płuc TMPRSS2.

Potencjalny wpływ androgenu (DHT) na ekspresję TMPRSS2 u dzieci jest mniejszy niż jego wpływ u kobiet i mężczyzn, a następnie nasilenie i wigor wirusowy u mężczyzn w porównaniu z dziećmi i kobietami. .

Potencjalny wpływ androgenu (DHT) na ekspresję TMPRSS2 u kobiet jest mniejszy niż u mężczyzn, a następnie nasilenie wirusa i wigor u mężczyzn w porównaniu z kobietami.

Tak więc główny badacz uważa, że ​​​​kiedy niektórzy badacze badali rolę steroidów płciowych w patogenezie SARS-CoV, porównując gonadektomizowane i kontrolne odpowiedniki po infekcji. Gonadektomia lub leczenie flutamidem, niesteroidowym antyandrogenem, nie wpłynęło na zachorowalność i śmiertelność u samców myszy po śmiertelnym zakażeniu MA15. Być może mylili się oni w swoich wnioskach, sugerując, że androgeny nie odgrywają roli w patogenezie SARS-CoV, ponieważ Gonadektomia lub leczenie flutamidem nie wpłynie całkowicie ani nie zahamuje stężenia DHT i jego pochodnych (5α-Androstan-3α,17β-Diol) w tkankach i krwi, ponieważ po zahamowaniu flutamidem testosteronu. szlak tworzenia DHT zostanie aktywowany, aby zrekompensować zahamowany poziom testosteronu, więc ekspresja TMPRSS2 będzie znacząco indukowana przez DHT, a leczone zwierzęta nie będą miały wpływu w przypadku leczenia flutamidem, ale w przypadku gonadektomii ekspresja TMPRSS2 będzie zmniejszona o Hamowanie DHT tylko wtedy, gdy upłynął czas od gonadektomii, aby upewnić się, że DHT i jego pochodne całkowicie spadły do ​​poziomów, które nie pozwolą mu wpływać na ekspresję TMPRSS2, a u samic myszy po zablokowaniu receptorów estrogenowych obumarł, ponieważ nasilające się tworzenie androgenów hormony.

Badanie wykazało, że kwas 13-cis-retinowy kompetycyjnie i odwracalnie hamuje dihydrotestosteron Tak więc główny badacz spodziewa się znaczącej modulacji ekspresji TMPRSS2 po leczeniu kwasem 13-cis-retinowym poprzez czasowe zapobieganie wpływowi dihydrotestosteronu (DHT) na promowanie TMPRSS2 i wyrażenie. Oraz transbłonowe proteazy serynowe typu II TMPRSS2, które mogą rozszczepiać i aktywować białko szczytowe (S) koronawirusa zespołu ostrej niewydolności oddechowej (SARS-CoV) w celu fuzji błon. Ponadto te proteazy rozszczepiają receptor wirusowy, enzym konwertujący angiotensynę karboksypeptydazę 2 (ACE2) i zaproponowano, że cięcie ACE2 zwiększa zakaźność wirusa.

Badanie wykazało, że COVID-19 obniża poziom testosteronu u mężczyzn poprzez zmianę funkcjonowania gonad. Czy zwiększone nasilenie choroby u mężczyzn może być spowodowane obniżonym poziomem testosteronu. Ale zgodnie z wyjaśnieniem głównego badacza, COVID-19 obniża poziom testosteronu, ponieważ u pacjentów zakażonych COVID-19 następuje dramatyczne obniżenie poziomu cholesterolu w porównaniu ze zdrowymi osobami z grupy kontrolnej. Poziom cholesterolu spada dość szybko we wczesnych stadiach infekcji i wzrasta, gdy pacjent zaczyna wracać do zdrowia. W związku z tym, wskazując, że cholesterol może odgrywać ważną rolę w obronie organizmu przed takimi infekcjami i w zależności od wyjaśnień głównego badacza, testosteron jest syntetyzowany zaczynając od cholesterolu poprzez dobrze scharakteryzowany szlak biosyntezy steroidów obejmujący sekwencyjne działanie wielu enzymów Tak więc, gdy poziom cholesterolu spada, po tym spadku następuje spadek poziomu testosteronu i zgodnie z tym wyjaśnieniem terapia testosteronem w COVID 2019 nie jest zalecana, ale tymczasowa zalecany jest inhibitor DHT, taki jak izotretynoina, ponieważ to leczenie testosteronem zahamuje syntezę cholesterolu poprzez hamowanie sprzężenia zwrotnego i zmniejszy wychwyt cholesterolu przez komórki Leydiga w jądrach, a to również doprowadzi do nadmiernego wzrostu poziomów DHT i jego pochodnych w różnych tkankach, co wywoła TMPR SS2. ponieważ DHT jest silnym aktywatorem TMPRSS2, po czym nastąpi przetwarzanie i aktywacja białka kolczastego COVID2019 w celu powiązania jego receptorów ACE2 w płucach i nerkach, co prowadzi do ich uszkodzenia, szczególnie w jądrach, ponieważ zawiera wysoki poziom proteaz i ACE2. Proteazy serynowe stają się ważnymi czynnikami przyczyniającymi się do produkcji, dojrzewania i kompetencji funkcjonalnych plemników.

Tamoksyfen może hamować COVID 2019 raczej poprzez hamowanie zakwaszenia endosomów i lizosomów niż hamowanie enzymów lizosomalnych.

Badanie wykazało, że tamoksyfen powoduje redystrybucję słabo zasadowych chemioterapeutyków z kwaśnych organelli do jądra w komórkach lekoopornych. Czynniki zakłócające zakwaszenie organelli (np. monenzyna, bafilomycyna A1) powodują podobną redystrybucję. Pomiar pH komórek w kilku liniach komórkowych wykazał, że tamoksyfen hamuje zakwaszenie endosomów i lizosomów bez wpływu na pH cytoplazmy. Podobnie jak monenzyna, tamoksyfen zmniejszał szybkość transportu pęcherzykowego przez szlaki recyklingowe i sekrecyjne. Zakwaszenie organelarne jest wymagane dla wielu funkcji komórkowych, a jego zakłócenie może odpowiadać za wiele skutków ubocznych tamoksyfenu. Badanie wykazało, że fagocytoza jest zamieszkiwana przez tamoksyfen i chlorochinę w komórkach nabłonka siatkówki. Badanie wykazało, że tamoksyfen ma właściwości słabej zasady i zwiększa pH endolizosomu oraz zmienia dynamikę endosomu. Co ważne, leczenie TAM zwiększyło przeżywalność myszy, którym wstrzyknięto śmiertelną dawkę STx1 lub STx2. Efekt ochronny był niezależny od receptorów estrogenowych, ale zależny od właściwości słabej zasady TAM, co pozwoliło TAM na zwiększenie pH endolizosomu i zmianę dynamiki endosomu. Badanie wykazało, że tamoksyfen ma działanie przeciwmalaryczne poprzez leczenie myszy zakażonych P. berghei, które wykazują niższy poziom parazytemii i nie rozwijają się objawy malarii mózgowej. Stwierdzono, że tamoksyfen zapobiega zwłóknieniu płuc i obniża poziomy TGFβ-1 w surowicy. Astudy wykazało, że tamoksyfen ma działanie hamujące endosomalne i lizosomalne proteazy cysteinowe lepiej niż chlorochina. Katepsyny to endosomalne i lizosomalne proteazy cysteinowe, które odgrywają ważną rolę w degradacji białek w różnych procesach komórkowych, w tym zarówno na szlaku endocytarnym, jak i autofagii. Rola katepsyn w infekcji wirusowej została po raz pierwszy zidentyfikowana przez Huanga i wsp. i odkryli, że jeden inhibitor proteaz cysteinowych E64d i specyficzny inhibitor katepsyny L Z-FY(t-Bu)-DMK są w stanie zablokować infekcję SARS-CoV. Katepsyna D była bardziej wrażliwa na tamoksyfen niż na chlorochinę. Ekspozycja na tamoksyfen zmniejszała aktywność katepsyny D przy stężeniach mniejszych niż 10 pM. Działanie chlorochiny rozpoczęło się o godzinie 15 po południu

.