La terapia di combinazione con isotretinoina e tamoxifene dovrebbe fornire una protezione completa contro il coronavirus della sindrome respiratoria acuta grave (Combination)

Lo studio è uno studio comparativo interventistico randomizzato di Fase II. La durata della sperimentazione per ciascun soggetto è prevista in 3 mesi.160 verranno arruolati nello studio pazienti adulti di sesso maschile e femminile con diagnosi positiva di COVID-19 e che soddisfano i criteri di inclusione descritti di seguito. La popolazione di prova sarà composta da entrambi i sessi.

Tipo di studio:Interventistico [Cambia...]

Scopo principale: trattamento

Fase di studio:Fase 2 Modello di studio interventistico:assegnazione sequenziale

Numero di braccia: 3

Mascheramento: nessuno (etichetta aperta)

Allocazione: randomizzata

Iscrizioni:160 [Previste]

L'isotretinoina (13cis RA) può essere in grado di inibire l'ingresso di COVID 2019 attraverso la down-regulation di ACE2, proteina AT1 e rilascio di calcio intracellulare mediato da Ang II piuttosto che l'inibizione dell'interleuchina-6 (IL-6) e questo è discusso come segue:

La pandemia di COVID-19 causata da SARS-COV-2 ha infettato oltre 2.000.000 di persone provocando oltre 150.000 morti. Una proteina cellulare ospite chiave richiesta per l'ingresso del virus è l'enzima di conversione dell'angiotensina 2 (ACE2) la cui espressione è stata dimostrata in molti tessuti, comprese le cellule epiteliali alveolari di tipo II nei polmoni, nella mucosa orale e nell'intestino, nel cuore, nei reni, nell'endotelio e nella pelle. Le cellule che esprimono ACE2 possono agire come cellule domestiche e sono soggette all'infezione da SARS-CoV-2 poiché il recettore ACE2 facilita l'ingresso e la replicazione virale cellulare. Uno studio ha dimostrato che i pazienti con ipertensione e diabete mellito possono essere a più alto rischio di infezione da SARS-CoV-2, poiché questi pazienti sono spesso trattati con ACE-inibitori (ACEI) o bloccanti del recettore di tipo I dell'angiotensina II (ARB), che sono stati precedentemente suggerito per aumentare l'espressione ACE2. In un altro studio di Sinha et al., che ha analizzato un set di dati CMAP (Connectivity Map) pubblicamente disponibile di profili pre/post trascrittomici per il trattamento farmacologico in linee cellulari per oltre 20.000 piccole molecole, l'isotretinoina era il più potente down-regulator dei recettori ACE 2. D'altra parte, hanno trovato 6 farmaci in CMAP che sono attualmente studiati in studi clinici per il trattamento di COVID-19 (clorochina, talidomide, metilprednisolone, losartan, lopinavir e ritonavir, da clinicaltrials.gov), nessuno dei quali è stato trovato per alterare significativamente l'espressione di ACE2 ( P > 0,1) Inoltre, un altro studio ha dimostrato che l'isotretinoina è un potenziale inibitore della proteasi simile alla papaina (PLpro), che è una proteina codificata dai geni SARS-CoV-2 e considerata una delle proteine ​​che dovrebbero essere prese di mira nel trattamento COVID-19 mediante l'esecuzione di virtualizzazione basata su target screening del ligando. Come Principal Investigator discusso prima (13cRA) è il più forte down-regulator di ACE2. e il ricercatore principale si aspetta che 13cRA possa inibire o dowenrgulat ACE2 mediante interazione diretta e legame con l'ACE2 transmembrana, suggerendo il suo potenziale terapeutico nel prevenire l'ingresso di COVID 2019 nella cellula ospite.

Precedenti studi sulla sindrome respiratoria acuta grave correlata coronavirus (SARS-CoV) e SARS-CoV FP FP hanno dimostrato che il calcio (Ca2+) svolge un ruolo importante per l'attività fusogenica attraverso una tasca legante Ca2+ con acido glutammico conservato (E) e acido aspartico (D) i residui hanno dimostrato che il Ca2+ intracellulare migliora l'infezione da MERS-CoV WT PPs di circa due volte e che l'E891 è un residuo cruciale per l'interazione del Ca2+. La risonanza di spin elettronico ha rivelato che questo miglioramento potrebbe essere attribuito all'aumento dell'ordinamento della membrana rilevante per la fusione MERS-CoV FP di Ca2+. Curiosamente, la titolazione calorimetrica isotermica ha mostrato che MERS-CoV FP lega un Ca2+, al contrario di SARS-CoV FP che si lega a due ioni Ca2+.

L'angiotensina II aumenta l'attività del calcio intracellulare nei podociti del glomerulo intatto. Il bloccante dei canali del Ca2+ di tipo L nicardipina non ha influenzato l'aumento di [Ca2+] mediato da Ang II ed è stato postulato che il legame di SARS-CoV-2 ad ACE2 possa attenuare l'attività residua di ACE2, distorcendo l'equilibrio ACE/ACE2 a uno stato di maggiore attività dell'angiotensina II che porta a vasocostrizione polmonare e danno d'organo infiammatorio e ossidativo, che aumenta il rischio di danno polmonare acuto (ALI). AngII attraverso i recettori AT1 sovraregola molti geni proinfiammatori, come la molecola di adesione cellulare vascolare-1 (VCAM-1), la molecola di adesione intercellulare-1 (ICAM-1), l'interleuchina-6 (IL-6).30 ma 13cis RA ha specificamente down-regolato la proteina AT1 in modo dipendente dalla dose e dal tempo. La down-regolazione dell'espressione di AT1 porta a un ridotto rilascio di calcio intracellulare mediato da AngII Analogamente alla down-regulation del recettore, il trattamento con 13cRA ha determinato una significativa riduzione dell'mRNA di AT1. Il 13cRA ha un meccanismo indipendente dal glucosio e da RAR/RXR per l'inibizione trascrizionale di AT1,

L'isotretinoina (13cis RA) può essere in grado di inibire l'infezione da COVID 2019 invertendo l'effetto di induzione e attivazione androgenica di (DHT) sull'espressione di TMPRSS2 e aiuta a prevenire la scissione e l'attivazione sia della proteina spike (S) di COVID 2019 che del recettore virale, e questo è discusso come segue:

TMPRSS2 è sia il gene più frequentemente alterato nel carcinoma prostatico primario sia un fattore critico che consente l'infezione cellulare da coronavirus, incluso SARS-CoV-2. La modulazione della sua espressione da parte degli steroidi potrebbe contribuire alla predominanza maschile delle infezioni gravi e dato che TMPRSS2 non ha funzioni indispensabili note e sono disponibili inibitori, è un bersaglio interessante per la prevenzione o il trattamento delle infezioni virali respiratorie

TMPRSS2, un regolatore chiave nel cancro alla prostataTMPRSS2 è stato identificato per la prima volta nel cancro alla prostata poco dopo che il gene era stato originariamente clonato. Linee cellulari di cancro alla prostata hanno fortemente sovraregolato l'espressione di TMPRSS2 in risposta agli androgeni . TMPRSS2 è espresso sul lato luminale dell'epitelio prostatico e la sua espressione è aumentata nel tessuto tumorale della prostata rispetto al tessuto prostatico non canceroso. In particolare, il gene TMPRSS2 è un partner in uno dei più comuni eventi di fusione genica nei tumori solidi: riarrangiamenti genici somatici che coinvolgono TMPRSS2 con un membro della famiglia ETS di fattori di trascrizione oncogenici, più comunemente ERG. Questa fusione si verifica in circa il 50% dei tumori primari della prostata tra gli uomini di origine europea. Sebbene l'ERG non sia normalmente regolato dagli androgeni, la fusione genica giustappone gli elementi regolatori del recettore degli androgeni di TMPRSS2 con il gene ERG. Il gene ERG è di conseguenza controllato dalla segnalazione del recettore degli androgeni ed è altamente espresso nei tumori della prostata che ospitano la fusione TMPRSS2: ERG. Curiosamente, la prevalenza del TMPRSS2: la fusione ERG è inferiore nei tumori della prostata sia negli uomini neri che in quelli asiatici. La rilevanza di questo per l'attuale pandemia di COVID-19 non è chiara. TMPRSS2: I tumori della fusione ERG hanno anche un insieme distinto di fattori di rischio legati alla segnalazione ormonale. Ad esempio, gli uomini con una maggiore attività trascrizionale geneticamente determinata del recettore degli androgeni hanno un rischio più elevato di TMPRSS2: carcinoma prostatico positivo alla fusione ERG ma non di carcinoma prostatico negativo alla fusione

TMPRSS2 è un gene bersaglio di segnalazione del recettore degli androgeni e una serina proteasi della superficie cellulare regolata dagli androgeni espressa prevalentemente nelle cellule epiteliali della prostata e del polmone. ) rimane sconosciuto. È importante sottolineare che, a differenza di altri TTSP, la trascrizione di TMPRSS2 è regolata da ligandi androgeni e dal recettore degli androgeni (AR). Esiste una correlazione positiva tra AR e TMPRSS2 nell'epitelio tumorale primario microdissezionato (r2 = 0,39; p

Il diidrotestosterone (DHT) ha indotto in modo significativo e drammatico l'espressione della proteina TMPRSS2 con due masse molecolari di 60 (lunghezza intera) e 38 kDa (N-terminale) in modo dose-sensibile

I dati dell'epidemia cinese mostrano che i tassi di mortalità per gli uomini sono quasi il 50% più alti rispetto alle donne e mostrano che le prime ricerche dalla Cina suggeriscono che donne e bambini hanno meno probabilità di morire rispetto agli uomini se prendono il coronavirus. I tassi di mortalità per Covid-19, la malattia che sviluppano le persone infette dal coronavirus, sono bassi per tutti: solo il 2,4% delle 44.672 persone nello studio cinese è morto. Ma sebbene un numero approssimativamente pari di uomini e donne contragga la malattia, gli uomini hanno maggiori probabilità di sviluppare un caso così grave di Covid-19 da morire.

Oltre il 70% dei decessi per coronavirus in Italia sono stati tra uomini, ma gli scienziati ammettono di essere sconcertati dal divario di genere. Almeno 3.400 persone in Italia sono morte a causa della devastante malattia - ha annunciato ieri di avere un bilancio delle vittime più alto della Cina - ma meno di 1.000 di loro erano donne. Gli uomini hanno anche maggiori probabilità di contrarre l'infezione in primo luogo e rappresentano il 60% dei casi confermati, secondo l'agenzia di ricerca sulla salute pubblica italiana. Un'analisi precedente ha rilevato che l'80% dei decessi riguardava uomini e solo il 20% donne, ma il divario si è ridotto nel tempo

Secondo questi dati, il ricercatore principale ritiene che esista una forte relazione tra l'elevata mortalità nei maschi e l'effetto androgenico, in particolare l'effetto del DHT sulla proteina TMPRSS2 che viene utilizzata da covid 2019 nell'invasione e nell'ingresso delle cellule e in base a questi dati relativi a sei ormoni in particolare (DHT), l'investigatore è stato in grado di scoprire che donne e bambini hanno meno probabilità di morire di malattia rispetto agli uomini. Quindi, l'investigatore ha diviso i pazienti infetti in base al loro sei ormone perché TMPRSS2 è una serina proteasi della superficie cellulare regolata dagli androgeni espressa prevalentemente nelle cellule epiteliali della prostata e del polmone TMPRSS2.

L'effetto potenziale dell'androgeno (DHT) sull'espressione di TMPRSS2 nei bambini è inferiore al suo effetto nelle femmine e nei maschi, seguito dalla gravità virale e dalla vigrosità negli uomini rispetto ai bambini e alle donne. .

L'effetto potenziale dell'androgeno (DHT) sull'espressione di TMPRSS2 nelle femmine è inferiore rispetto ai maschi, seguito dalla gravità e dalla vigoria virale negli uomini rispetto alle femmine .

Quindi, il ricercatore principale pensa che quando alcuni ricercatori hanno studiato il ruolo degli steroidi sessuali nella patogenesi della SARS-CoV confrontando le controparti gonadectomizzate e di controllo dopo l'infezione. La gonadectomia o il trattamento con flutamide, un anti-androgeno non steroideo non ha influenzato la morbilità e la mortalità nei topi maschi a seguito di infezione letale da MA15. Potrebbero essersi sbagliati nelle loro conclusioni nel suggerire che gli androgeni non svolgono un ruolo nella patogenesi della SARS-CoV perché La gonadectomia o il trattamento con flutamide non influirà o inibirà completamente la concentrazione di DHT e dei suoi derivati ​​​​(5α-Androstan-3α, 17β-Diol) nei tessuti e nel sangue perché dopo aver inibito il testosterone con flutamide. il percorso di formazione di DHT sarà attivato per compensare i livelli di testosterone inibiti in modo che l'espressione di TMPRSS2 sarà significativamente indotta da DHT e gli animali trattati non saranno influenzati in caso di trattamento con flutamide ma in caso di gonadectomia l'espressione di TMPRSS2 sarà ridotta di Inibizione del DHT solo se è passato molto tempo dalla gonadectomia per assicurarsi che il DHT e i suoi derivati ​​siano completamente diminuiti a livelli che non gli permetteranno di influenzare l'espressione di TMPRSS2 e nelle femmine di topo dopo aver bloccato i recettori degli estrogeni è morto a causa dell'aumento della formazione di androgeni ormoni.

Uno studio ha dimostrato che l'acido 13-cis-retinoico inibisce in modo competitivo e reversibile il diidrotestosterone Quindi, il ricercatore principale si aspetta una modulazione significativa dell'espressione di TMPRSS2 dopo il trattamento con acido 13-cis-retinoico prevenendo temporaneamente l'effetto del diidrotestosterone (DHT) sulla promozione di TMPRSS2 e espressione. E la serina proteasi transmembrana di tipo II TMPRSS2 che può scindere e attivare la proteina spike (S) del coronavirus della sindrome respiratoria acuta grave (SARS-CoV) per la fusione della membrana. Inoltre, queste proteasi scindono il recettore virale, l'enzima di conversione dell'angiotensina carbossipeptidasi 2 (ACE2), ed è stato proposto che la scissione di ACE2 aumenti l'infettività virale.

Uno studio ha dimostrato che il COVID-19 riduce i livelli di testosterone negli uomini alterando il funzionamento delle gonadi. Quindi l'aumento della gravità della malattia negli uomini potrebbe essere dovuto alla riduzione del testosterone. Ma secondo la spiegazione del ricercatore principale, COVID-19 riduce i livelli di testosterone perché c'è una drastica riduzione dei livelli di colesterolo dei pazienti infetti da COVID 19, rispetto ai controlli sani. I livelli di colesterolo diminuiscono abbastanza rapidamente durante le prime fasi dell'infezione e aumentano man mano che il paziente inizia a riprendersi. Pertanto, indicando che il colesterolo può svolgere un ruolo importante nella difesa dell'organismo da tali infezioni e in base alla spiegazione del ricercatore principale, il testosterone viene sintetizzato partendo dal colesterolo attraverso un percorso biosintetico steroideo ben caratterizzato che coinvolge l'azione sequenziale di più enzimi Quindi, quando i livelli di colesterolo diminuiscono, questa diminuzione sarà seguita dalla diminuzione del livello di testosterone e secondo questa spiegazione la terapia con testosterone in COVID 2019 non è raccomandata ma temporanea Si raccomanda un inibitore del DHT come l'isotretinoina perché questo trattamento con il testosterone inibirà la sintesi del colesterolo mediante l'inibizione del feedback e ridurrà l'assorbimento del colesterolo da parte delle cellule di Leydig nei testicoli e questo porterà anche a un aumento eccessivo dei livelli di DHT e dei suoi derivati ​​​​in diversi tessuti, che indurrà TMP SS2. perché il DHT è un potente attivatore di TMPRSS2 e questo sarà seguito dall'elaborazione e dall'attivazione della proteina spike COVID2019 per legare i suoi recettori ACE2 nei polmoni e nei reni, portando al loro danno specificamente nei testicoli perché contiene alti livelli di proteasi e ACE2. Le serina proteasi stanno emergendo come importanti contributori alla produzione, maturazione e competenza funzionale degli spermatozoi.

Il tamoxifene può essere in grado di inibire il COVID 2019 inibendo l'acidificazione degli endosomi e dei lisosomi piuttosto che inibendo gli enzimi lisosomiali.

Uno studio ha dimostrato che il tamoxifene causa la ridistribuzione dei chemioterapici a base debole dagli organelli acidi al nucleo nelle cellule resistenti ai farmaci. Gli agenti che interrompono l'acidificazione degli organelli (ad es. monensina, bafilomicina A1) causano una ridistribuzione simile. La misurazione del pH cellulare in diverse linee cellulari rivela che il tamoxifene inibisce l'acidificazione degli endosomi e dei lisosomi senza influenzare il pH citoplasmatico. Simile al monensin, il tamoxifene ha diminuito il tasso di trasporto vescicolare attraverso le vie di riciclaggio e secretorie. L'acidificazione organellare è necessaria per molte funzioni cellulari e la sua interruzione potrebbe spiegare molti degli effetti collaterali del tamoxifene. Uno studio ha dimostrato che la fagocitosi è abitata da tamoxifene e clorochina nelle cellule epiteliali della retina Uno studio ha dimostrato che il tamoxifene ha proprietà di basi deboli e aumenta il pH endolisosomiale e altera la dinamica endosomiale. È importante sottolineare che il trattamento con TAM ha migliorato la sopravvivenza dei topi iniettati con una dose letale di STx1 o STx2. L'effetto protettivo era indipendente dai recettori degli estrogeni ma dipendeva dalla proprietà di base debole del TAM, che ha permesso al TAM di aumentare il pH endolisosomiale e alterare la dinamica endosomiale. Uno studio ha dimostrato che il tamoxifene ha un effetto antimalarico attraverso il trattamento di topi infetti da P. berghei, che mostrano livelli più bassi di parassitemia e non sviluppano segni di malaria cerebrale, si è scoperto che il tamoxifene previene la fibrosi polmonare e riduce i livelli sierici di TGFβ-1. Uno studio ha dimostrato che il tamoxifene ha un effetto inibitorio delle proteasi della cisteina endosomiale e lisosomiale migliore della clorochina, le catepsine sono proteasi della cisteina endosomiale e lisosomiale che svolgono un ruolo importante nella degradazione delle proteine ​​in vari processi cellulari, tra cui sia la via endocitica che l'autofagia. Il ruolo delle catepsine nell'infezione virale è stato identificato per la prima volta da Huang et al e hanno scoperto che un inibitore delle proteasi della cisteina E64d e uno specifico inibitore della catepsina L Z-FY(t-Bu)-DMK sono in grado di bloccare l'infezione da SARS-CoV. La catepsina D era più sensibile al tamoxifene che alla clorochina. L'esposizione al tamoxifene ha diminuito l'attività della catepsina D a concentrazioni inferiori alle 22:00. L'effetto della clorochina è iniziato alle 15:00

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