Kombinationsterapi med isotretinoin og tamoxifen forventes at give fuldstændig beskyttelse mod alvorligt akut respiratorisk syndrom Coronavirus (Combination)

Studiet er et randomiseret interventionelt sammenlignende fase II-forsøg. Varigheden af ​​forsøget for hvert forsøgsperson forventes at være 3 måneder.160 voksne mandlige og kvindelige patienter med positiv COVID-19-diagnose og opfylder nedenstående skitserede inklusionskriterier vil blive tilmeldt undersøgelsen. Forsøgspopulationen vil bestå af begge køn.

Undersøgelsestype: Interventionel [Skift...]

Primært formål: Behandling

Studiefase: Fase 2 Interventionel undersøgelsesmodel: Sekventiel opgave

Antal våben: 3

Maskering: Ingen (Open Label)

Tildeling: Randomiseret

Tilmelding: 160 [Forventet]

Isotretinoin(13cis RA) kan muligvis hæmme COVID 2019-indtrængen via nedregulering af ACE2, AT1-protein og Ang II-medieret intracellulær calciumfrigivelse snarere end hæmning af interleukin-6 (IL-6), og dette diskuteres som følger:

COVID-19-pandemien forårsaget af SARS-COV-2 har inficeret over 2.000.000 mennesker og forårsaget over 150.000 dødsfald. Et nøgleværtscellulært protein, der kræves til virusindtrængning, er angiotensin-konverterende enzym 2 (ACE2), hvis ekspression er blevet påvist i mange væv, herunder alveolære epiteltype II-celler i lunger, mundslimhinde og tarm, hjerte, nyre, endotel og hud. ACE2-udtrykkende celler kan fungere som hjemmeceller og er tilbøjelige til SARS-CoV-2-infektion, da ACE2-receptor letter cellulær viral indgang og replikation. En undersøgelse viste, at patienter med hypertension og diabetes mellitus kan have højere risiko for SARS-CoV-2-infektion, da disse patienter ofte behandles med ACE-hæmmere (ACEI) eller angiotensin II type-I-receptorblokkere (ARB), som er blevet tidligere foreslået at øge ACE2-ekspression. I en anden undersøgelse af Sinha et al, der analyserede et offentligt tilgængeligt Connectivity Map (CMAP) datasæt af præ/post transkriptomiske profiler til lægemiddelbehandling i cellelinjer for over 20.000 små molekyler, var isotretinoin den stærkeste nedregulator af ACE 2 receptorer. På den anden side fandt de 6 lægemidler i CMAP, som i øjeblikket undersøges i kliniske forsøg til behandling af COVID-19 (chloroquin, thalidomid, methylprednisolon, losartan, lopinavir og ritonavir, fra clinicaltrials.gov). ingen af ​​dem viste sig at ændre ACE2-ekspression signifikant (P>0,1) Desuden viste en anden undersøgelse, at isotretinoin er en potentiel papain-lignende protease (PLpro)-hæmmer, som er et protein kodet af SARS-CoV-2-gener og betragtes som et af de proteiner, der bør målrettes i COVID-19-behandling ved at udføre målbaseret virtuel ligandscreening. Som Principal Investigator diskuterede før, er (13cRA) den stærkeste nedregulator af ACE2. og hovedefterforskeren forventer, at 13cRA kan hæmme eller nedsætte ACE2 ved direkte interaktion og binding med det transmembrane ACE2, hvilket tyder på dets terapeutiske potentiale til at forhindre indtrængen af ​​COVID 2019 til værtscellen.

Tidligere undersøgelser af det relaterede alvorlige akutte respiratoriske syndrom coronavirus (SARS-CoV) og SARS-CoV FP FP har vist, at calcium (Ca2+) spiller en vigtig rolle for fusogen aktivitet via en Ca2+-bindingslomme med konserveret glutaminsyre (E) og asparaginsyre (D) rester demonstrerede, at intracellulær Ca2+ øger MERS-CoV WT PPs-infektion med cirka to gange, og at E891 er en afgørende rest for Ca2+-interaktion. Elektronspinresonans afslørede, at denne forbedring kunne tilskrives Ca2+ stigende MERS-CoV FP-fusionsrelevant membranbestilling. Spændende nok viste isotermisk kalorimetrititrering, at MERS-CoV FP binder en Ca2+ i modsætning til SARS-CoV FP, der binder til to Ca2+ ioner.

Angiotensin II øger den intracellulære calciumaktivitet i podocytter af den intakte glomerulus. L-type Ca2+-kanalblokkeren nicardipin påvirkede ikke den Ang II-medierede [Ca2+]-stigning, og det er blevet postuleret, at SARS-CoV-2-binding til ACE2 kan svække resterende ACE2-aktivitet, hvilket skævvrider ACE/ACE2-balancen til en tilstand på øget angiotensin II-aktivitet, der fører til pulmonal vasokonstriktion og inflammatorisk og oxidativ organskade, hvilket øger risikoen for akut lungeskade (ALI). AngII via AT1-receptorer opregulerer mange proinflammatoriske gener, såsom vaskulært celleadhæsionsmolekyle-1 (VCAM-1), intercellulært adhæsionsmolekyle-1 (ICAM-1), interleukin-6 (IL-6).30 men 13cis RA nedregulerede specifikt AT1-proteinet på en dosis- og tidsafhængig måde. Nedregulering af AT1-ekspressionen fører til reduceret AngII-medieret intracellulær calciumfrigivelse Ligesom med receptornedregulering resulterede Behandling med 13cRA i en signifikant reduktion i AT1-mRNA. .13cRA har en glucose- og RAR/RXR-uafhængig mekanisme til transkriptionel hæmning af AT1,

Isotretinoin(13cis RA) kan muligvis hæmme COVID 2019-infektion ved at vende den androgene induktions- og aktiveringseffekt af (DHT) på TMPRSS2-ekspression og hjælper med at forhindre spaltning og aktivering af både spikeproteinet (S) af COVID 2019 og den virale receptor, og dette diskuteres som følger:

TMPRSS2 er både det hyppigst ændrede gen i primær prostatacancer og en kritisk faktor, der muliggør cellulær infektion med coronavirus, herunder SARS-CoV-2. Modulationen af ​​dets ekspression med steroider kan bidrage til den mandlige overvægt af alvorlige infektioner, og i betragtning af at TMPRSS2 ikke har nogen kendte uundværlige funktioner, og inhibitorer er tilgængelige, er det et tiltalende mål for forebyggelse eller behandling af luftvejsvirusinfektioner

TMPRSS2, en nøgleregulator i prostatacancer TMPRSS2 blev først identificeret i prostatacancer kort efter, at genet oprindeligt var blevet klonet. Prostatacancercellelinjer opregulerede kraftigt TMPRSS2-ekspression som reaktion på androgener. TMPRSS2 udtrykkes på den luminale side af prostataepitelet, og dets ekspression er øget i prostatacancervæv sammenlignet med ikke-cancerøst prostatavæv. Navnlig er TMPRSS2-genet en partner i en af ​​de mest almindelige genfusionsbegivenheder i solide tumorer: somatiske genomlejringer, der involverer TMPRSS2 med et medlem af ETS-familien af ​​onkogene transkriptionsfaktorer, oftest ERG. Denne fusion forekommer i ca. 50 % af primære prostatacancer blandt mænd af europæisk herkomst. Mens ERG normalt ikke reguleres af androgen, sidestiller genfusionen de androgenreceptorregulerende elementer i TMPRSS2 med ERG-genet. ERG-genet styres følgelig af androgenreceptorsignalering og udtrykkes højt i prostatacancer, der huser TMPRSS2: ERG-fusionen. Spændende nok er prævalensen af ​​TMPRSS2: ERG-fusion lavere i prostatatumorer hos både sorte og asiatiske mænd. Relevansen af ​​dette for den nuværende COVID-19-pandemi er uklar.TMPRSS2: ERG-fusionskræft har også et særskilt sæt risikofaktorer relateret til hormonal signalering. For eksempel har mænd med højere genetisk bestemt transkriptionel aktivitet af androgenreceptoren en højere risiko for TMPRSS2: ERG-fusionspositiv prostatacancer, men ikke for fusionsnegativ prostatacancer

TMPRSS2 er et androgen receptor signalerende målgen og en androgen-reguleret celleoverflade serinprotease, der overvejende udtrykkes i prostata- og lungeepitelceller. ) forbliver ukendt. Det er vigtigt, at i modsætning til andre TTSP'er reguleres TMPRSS2-transkription af androgene ligander og androgenreceptoren (AR). Der er en positiv korrelation mellem AR og TMPRSS2 i mikrodissekeret primært tumorepitel (r2 = 0,39; p

Dihydrotestosteron (DHT) inducerede signifikant og dramatisk ekspressionen af ​​TMPRSS2-protein med to molekylmasser på 60 (fuld længde) og 38 kDa (N-terminal) på en dosisresponsiv måde

Data fra kinesisk udbrud viser dødsrater for mænd, der er næsten 50 procent højere end for kvinder, viser, at tidlig forskning fra Kina tyder på, at kvinder og børn er mindre tilbøjelige til at dø end mænd, hvis de får coronavirus. Dødsraterne for Covid-19, sygdommen, som de smittet med coronavirus udvikler, er lave for alle: kun 2,4 procent af de 44.672 mennesker i den kinesiske undersøgelse døde. Men selvom et stort set lige antal mænd og kvinder får sygdommen, er der større sandsynlighed for, at mænd udvikler et så alvorligt tilfælde af Covid-19, at de dør.

Mere end 70 procent af Italiens dødsfald med coronavirus har været blandt mænd, men videnskabsmænd der indrømmer, at de er mystificerede over kønsforskellen. Mindst 3.400 mennesker i Italien er døde af den ødelæggende sygdom - det meddelte i går, at det havde et højere dødstal end Kina - men mindre end 1.000 af dem har været kvinder. Mænd er også mere tilbøjelige til at opfange infektionen i første omgang og står for 60 procent af de bekræftede tilfælde, ifølge Italiens forskningsagentur for folkesundhed. En tidligere analyse viste, at 80 procent af dødsfaldene var hos mænd og kun 20 procent var hos kvinder - men forskellen er blevet mindre over tid

Ifølge disse data mener hovedforskeren, at der er en stærk sammenhæng mellem høj dødelighed hos mænd og androgen effekt, specifikt effekten af ​​DHT på TMPRSS2-protein, som bruges af covid 2019 i celleinvasion og -indtrængen og afhængigt af disse data relateret til seks hormoner specifikt (DHT), Efterforskeren var i stand til at opdage valle, kvinder og børn, der er mindre tilbøjelige til at dø af sygdom end mænd. Så efterforskeren opdelte inficerede patienter efter deres seks hormon, fordi TMPRSS2 er en androgen-reguleret celleoverflade serinprotease, der overvejende udtrykkes i prostata og lungeepitelcelle TMPRSS2.

Androgen (DHT) potentielle effekt på TMPRSS2-ekspression hos børn er mindre end dens effekt hos kvinder og mænd efterfulgt af viral sværhedsgrad og kraftighed hos mænd sammenlignet med børn og kvinder. .

Androgen (DHT) potentielle effekt på TMPRSS2-ekspression hos kvinder er mindre end hos mænd efterfulgt af viral sværhedsgrad og kraftighed hos mænd sammenlignet med kvinder.

Så den primære efterforsker mener, at da nogle forskere undersøgte kønssteroidernes rolle i SARS-CoV-patogenese ved at sammenligne gonadektomerede og kontrolmodparter efter infektion. Gonadektomi eller behandling med flutamid, et ikke-steroidt anti-androgen, påvirkede ikke sygelighed og dødelighed hos hanmus efter dødelig MA15-infektion. De kunne være forkerte i deres konklusioner, da de antydede, at androgener ikke spiller en rolle i SARS-CoV-patogenese, fordi Gonadektomi eller behandling med flutamid vil ikke fuldstændigt påvirke eller hæmme DHT og dets derivater (5α-Androstan-3α,17β-Diol) koncentration i væv og blod, fordi efter inhibering af testosteron med flutamid . DHT-dannelsesvejen vil blive aktiveret for at kompensere for de hæmmede testosteronniveauer, så TMPRSS2-ekspressionen vil blive signifikant induceret af DHT, og de behandlede dyr vil ikke blive påvirket i tilfælde af flutamidbehandling, men i tilfælde af Gonadektomi vil ekspressionen af ​​TMPRSS2 blive reduceret med DHT-hæmning kun, hvis der er gået tid på Gonadektomi for at sikre, at DHT og dets derivater faldt fuldstændigt i niveauer, der ikke vil tillade det at påvirke ekspressionen af ​​TMPRSS2, og i hunmus efter blokering af østrogenreceptorer døde det på grund af stigende dannelse af androgene hormoner.

En undersøgelse viste, at 13-cis-retinsyre kompetitivt og reversibelt hæmmer dihydrotestosteron. Så hovedforskeren forventer en signifikant modulation af TMPRSS2-ekspression efter behandling med 13-cis-retinsyre via midlertidig forebyggelse af virkningen af ​​dihydrotestosteron (DHT) på TMPRSS2-fremmende udtryk. Og type II transmembrane serinproteaser TMPRSS2, som kan spalte og aktivere spikeproteinet (S) af det alvorlige akutte respiratoriske syndrom coronavirus (SARS-CoV) til membranfusion. Derudover spalter disse proteaser den virale receptor, carboxypeptidase angiotensin-konverterende enzym 2 (ACE2), og det blev foreslået, at ACE2-spaltning øger viral infektivitet.

En undersøgelse viste, at COVID-19 reducerer testosteronniveauet hos mænd ved at ændre funktionen af ​​kønskirtlerne. Så kunne den øgede sværhedsgrad af sygdommen hos mænd skyldes nedsat testosteron. Men ifølge hovedforskerens forklaring reducerer COVID-19 testosteronniveauet, fordi der er en dramatisk reduktion i kolesterolniveauet hos patienter, der er inficeret med COVID 19, sammenlignet med raske kontroller. Kolesterolniveauet falder ret hurtigt i de tidlige stadier af infektion og stiger, efterhånden som patienten begynder at komme sig. Derfor, hvilket indikerer, at kolesterol kan spille en vigtig rolle i at forsvare kroppen mod sådanne infektioner, og afhængigt af hovedforskerens forklaring syntetiseres testosteron startende fra kolesterol gennem en velkarakteriseret steroid biosyntesevej, der involverer den sekventielle virkning af flere enzymer. Så når kolesterolniveauet falder, vil dette fald efterfølges af et fald i testosteronniveauet, og ifølge denne forklaring anbefales testosteronbehandling i COVID 2019 ikke, men midlertidig inhibitor af DHT anbefales, såsom isotretinoin, fordi denne behandling med testosteron vil hæmme kolesterolsyntesen ved feedback-hæmning og reducere kolesteroloptagelsen af ​​Leydig-celler i testiklerne, og dette vil også føre til overstigning i DHT-niveauer og dets derivater i forskellige væv, hvilket vil inducere TMPR SS2. fordi DHT er en potent aktivator af TMPRSS2, og dette vil blive efterfulgt af forarbejdning og aktivering af COVID2019 spike protein for at binde dets ACE2 receptorer i lunger og nyrer, hvilket fører til deres skade specifikt i testikler, fordi det indeholder høje niveauer af proteaser og ACE2. Serinproteaser dukker op som vigtige bidragydere til produktion, modning og funktionel kompetence af spermatozoer.

Tamoxifen kan muligvis hæmme COVID 2019 ved at hæmme forsuring af endosomerne og lysosomerne i stedet for hæmning af lysosomale enzymer.

En undersøgelse viste, at tamoxifen forårsager omfordeling af svage base kemoterapeutika fra sure organeller til kernen i lægemiddelresistente celler. Midler, der forstyrrer forsuring af organeller (f.eks. monensin, bafilomycin A1) forårsager en lignende omfordeling. Måling af cellulær pH ​​i flere cellelinjer afslører, at tamoxifen hæmmer forsuring af endosomer og lysosomer uden at påvirke cytoplasmatisk pH. I lighed med monensin reducerede tamoxifen hastigheden af ​​vesikulær transport gennem genbrugs- og sekretionsvejene. Organellar forsuring er påkrævet for mange cellulære funktioner, og dens forstyrrelse kan forklare mange af bivirkningerne af tamoxifen. En undersøgelse viste, at fagocytosen er beboet af tamoxifen og chloroquin i retinale epitelceller. En undersøgelse viste, at Tamoxifen har svage baseegenskaber og øger endolysosomal pH og ændrer endosomal dynamik. Det er vigtigt, at TAM-behandling forbedrede overlevelsen af ​​mus injiceret med en dødelig dosis STx1 eller STx2. Den beskyttende virkning var uafhængig af østrogenreceptorer, men afhængig af TAM's svage baseegenskab, hvilket gjorde det muligt for TAM at øge endolysosomal pH og ændre endosomale dynamik. En undersøgelse viste, at Tamoxifen har antimalaria effekt ved at behandle mus inficeret med P. berghei, som viser lavere niveauer af parasitæmi og ikke udvikler tegn på cerebral malaria. Tamoxifen har vist sig at forhindre lungefibrose og reducere serum TGFβ-1 niveauer. En undersøgelse viste, at Tamoxifen har endosomale og lysosomale cysteinproteaser hæmmende effekt bedre end chloroquin, cathepsiner er endosomale og lysosomale cysteinproteaser, der spiller vigtige roller i proteinnedbrydning i forskellige cellulære processer, herunder både den endocytiske vej og autofagi. Rollen af ​​cathepsin i viral infektion blev først identificeret af Huang et al, og de fandt ud af, at en cysteinproteasehæmmer E64d og en specifik cathepsin L-hæmmer Z-FY(t-Bu)-DMK er i stand til at blokere SARS-CoV-infektionen. Cathepsin D var mere følsom over for tamoxifen end over for chloroquin. Tamoxifeneksponeringer reducerede cathepsin D-aktiviteten ved mindre end 10 pM koncentrationer. Virkningen af ​​chloroquin startede kl. 15.00

.