Ожидается, что комбинированная терапия изотретиноином и тамоксифеном обеспечит полную защиту от тяжелого острого респираторного синдрома, вызванного коронавирусом (Combination)

Исследование представляет собой рандомизированное интервенционное сравнительное исследование фазы II. Ожидается, что продолжительность исследования для каждого субъекта составит 3 месяца160. В исследование будут включены взрослые пациенты мужского и женского пола с положительным диагнозом COVID-19 и соответствующие нижеизложенным критериям включения. Пробная популяция будет состоять из представителей обоих полов.

Тип исследования:Интервенционное [Изменить...]

Основная цель: лечение

Фаза исследования: модель интервенционного исследования фазы 2: последовательное назначение

Количество оружия: 3

Маскировка: нет (открытая этикетка)

Распределение: случайное

Регистрация:160 [ожидается]

Изотретиноин (13цис RA) может быть способен ингибировать проникновение COVID 2019 посредством понижающей регуляции ACE2, белка AT1 и опосредованного Ang II внутриклеточного высвобождения кальция, а не ингибирования интерлейкина-6 (IL-6), и это обсуждается следующим образом:

Пандемия COVID-19, вызванная SARS-COV-2, заразила более 2 000 000 человек, в результате чего погибло более 150 000 человек. Ключевым клеточным белком хозяина, необходимым для проникновения вируса, является ангиотензинпревращающий фермент 2 (ACE2), экспрессия которого была продемонстрирована во многих тканях, включая клетки альвеолярного эпителия типа II в легких, слизистой оболочке полости рта и кишечнике, сердце, почках, эндотелии и коже. Клетки, экспрессирующие ACE2, могут действовать как домашние клетки и склонны к инфекции SARS-CoV-2, поскольку рецептор ACE2 облегчает проникновение и репликацию клеточного вируса. Исследование показало, что пациенты с артериальной гипертензией и сахарным диабетом могут подвергаться более высокому риску заражения SARS-CoV-2, поскольку этих пациентов часто лечат ингибиторами АПФ (ИАПФ) или блокаторами рецепторов ангиотензина II типа I (БРА), которые были ранее предлагалось увеличить экспрессию ACE2. В другом исследовании, проведенном Sinha et al., который проанализировал общедоступный набор данных Connectivity Map (CMAP) пре-/пост-транскриптомных профилей для лечения лекарственными препаратами в клеточных линиях для более чем 20 000 малых молекул, изотретиноин был самым сильным понижающим регулятором рецепторов ACE 2. С другой стороны, они обнаружили в CMAP 6 препаратов, которые в настоящее время проходят клинические испытания для лечения COVID-19 (хлорохин, талидомид, метилпреднизолон, лозартан, лопинавир и ритонавир, с сайта ClinicalTrials.gov). ни в одном из них не было обнаружено значительного изменения экспрессии ACE2 (P>0,1) Более того, другое исследование продемонстрировало, что изотретиноин является потенциальными ингибиторами папаиноподобной протеазы (PLpro), который представляет собой белок, кодируемый генами SARS-CoV-2, и считается одним из белков, на которые следует нацеливаться при лечении COVID-19, выполняя целевые виртуальные скрининг лигандов. Как уже обсуждалось ранее, главный исследователь (13cRA) является самым сильным понижающим регулятором ACE2. и главный исследователь ожидает, что 13cRA может ингибировать или блокировать ACE2 путем прямого взаимодействия и связывания с трансмембранным ACE2, что предполагает его терапевтический потенциал в предотвращении проникновения COVID 2019 в клетку-хозяин.

Предыдущие исследования родственного коронавируса тяжелого острого респираторного синдрома (SARS-CoV) и FP FP SARS-CoV показали, что кальций (Ca2+) играет важную роль в фузогенной активности через карман связывания Ca2+ с консервативной глутаминовой кислотой (E) и аспарагиновой кислотой. (D) остатки продемонстрировали, что внутриклеточный Ca2+ усиливает инфицирование PPs MERS-CoV WT примерно в два раза и что E891 является ключевым остатком для взаимодействия Ca2+. Электронно-спиновый резонанс показал, что это усиление может быть связано с усилением Ca2+ упорядочения мембран, связанного со слиянием FP MERS-CoV. Интересно, что изотермическое калориметрическое титрование показало, что FP MERS-CoV связывает один ион Ca2+, в отличие от FP SARS-CoV, который связывает два иона Ca2+.

Ангиотензин II повышает активность внутриклеточного кальция в подоцитах интактного клубочка. Блокатор Са2+-каналов L-типа никардипин не влиял на опосредованное Ang II увеличение [Ca2+], и было высказано предположение, что связывание SARS-CoV-2 с ACE2 может ослаблять остаточную активность ACE2, искажая баланс ACE/ACE2 до состояния повышенная активность ангиотензина II, приводящая к легочной вазоконстрикции и воспалительному и окислительному повреждению органов, что увеличивает риск острого повреждения легких (ALI). AngII через рецепторы AT1 активирует многие провоспалительные гены, такие как молекула адгезии сосудистых клеток-1 (VCAM-1), молекула межклеточной адгезии-1 (ICAM-1), интерлейкин-6 (IL-6)30. но 13cis RA специфически подавляла белок AT1 в зависимости от дозы и времени. Понижение экспрессии AT1 приводит к уменьшению внутриклеточного высвобождения кальция, опосредованного AngII. Аналогично подавлению рецептора лечение 13cRA приводило к значительному снижению мРНК AT1. 13cRA обладает независимым от глюкозы и RAR/RXR механизмом ингибирования транскрипции АТ1,

Изотретиноин (13 цис RA) может ингибировать инфекцию COVID 2019 путем обращения вспять андрогенного индукционного и активационного эффекта (DHT) на экспрессию TMPRSS2 и помогает предотвратить расщепление и активацию как шиповидного белка (S) COVID 2019, так и вирусного рецептора. и это обсуждается следующим образом:

TMPRSS2 является одновременно наиболее часто изменяемым геном при первичном раке предстательной железы и критическим фактором, обеспечивающим клеточную инфекцию коронавирусами, включая SARS-CoV-2. Модуляция его экспрессии стероидами может способствовать преобладанию тяжелых инфекций у мужчин, и, учитывая, что TMPRSS2 не имеет известных незаменимых функций и доступны ингибиторы, он является привлекательной мишенью для профилактики или лечения респираторных вирусных инфекций.

TMPRSS2, ключевой регулятор рака предстательной железы. Впервые TMPRSS2 был идентифицирован при раке предстательной железы вскоре после того, как ген был первоначально клонирован. Клеточные линии рака предстательной железы сильно повышали экспрессию TMPRSS2 в ответ на андрогены. TMPRSS2 экспрессируется на люминальной стороне эпителия предстательной железы, и его экспрессия повышена в ткани рака предстательной железы по сравнению с нераковой тканью предстательной железы. Примечательно, что ген TMPRSS2 является партнером в одном из наиболее распространенных случаев слияния генов в солидных опухолях: реаранжировках соматических генов с участием TMPRSS2 с членом семейства онкогенных транскрипционных факторов ETS, чаще всего ERG. Это слияние происходит примерно в 50% случаев первичного рака предстательной железы у мужчин европейского происхождения. Хотя ERG обычно не регулируется андрогеном, слияние генов сопоставляет регуляторные элементы рецептора андрогена TMPRSS2 с геном ERG. Следовательно, ген ERG контролируется передачей сигналов рецептора андрогена и сильно экспрессируется при раке предстательной железы, содержащем слияние TMPRSS2: ERG. Интересно, что распространенность слияния TMPRSS2: ERG ниже в опухолях предстательной железы как у чернокожих, так и у азиатских мужчин. Актуальность этого для текущей пандемии COVID-19 неясна. TMPRSS2: слияние ERG — рак также имеет четкий набор факторов риска, связанных с гормональной сигнализацией. Например, мужчины с более высокой генетически детерминированной транскрипционной активностью рецептора андрогенов имеют более высокий риск TMPRSS2: рака простаты с положительным результатом слияния ERG, но не рака простаты с отрицательным слиянием.

TMPRSS2 представляет собой ген-мишень, передающий сигнальный рецептор андрогена, и андроген-регулируемую сериновую протеазу клеточной поверхности, экспрессируемую преимущественно в предстательной железе и эпителиальных клетках легких. ) остается неизвестным. Важно отметить, что в отличие от других TTSP, транскрипция TMPRSS2 регулируется андрогенными лигандами и андрогенным рецептором (AR). Существует положительная корреляция между АР и TMPRSS2 в микрорассеченном эпителии первичной опухоли (r2 = 0,39; p

Дигидротестостерон (ДГТ) значительно и резко индуцировал экспрессию белка TMPRSS2 с двумя молекулярными массами 60 (полная длина) и 38 кДа (N-конец) дозозависимым образом.

Данные о вспышке в Китае показывают, что уровень смертности мужчин почти на 50% выше, чем среди женщин, показывают, что ранние исследования из Китая показывают, что женщины и дети с меньшей вероятностью умрут, чем мужчины, если они заразятся коронавирусом. Смертность от Covid-19, заболевания, которое развивается у инфицированных коронавирусом, низка для всех: только 2,4% из 44 672 человек, участвовавших в китайском исследовании, умерли. Но хотя примерно одинаковое количество мужчин и женщин заражаются этой болезнью, у мужчин больше шансов заболеть настолько серьезным случаем Covid-19, что они умрут.

Более 70 процентов смертей от коронавируса в Италии приходится на мужчин, но местные ученые признают, что они озадачены гендерным разрывом. По меньшей мере 3400 человек в Италии умерли от разрушительной болезни — вчера было объявлено, что число погибших в ней выше, чем в Китае, — но менее 1000 из них были женщинами. По данным итальянского исследовательского агентства общественного здравоохранения, мужчины также чаще заражаются инфекцией, и на них приходится 60 процентов подтвержденных случаев. Более ранний анализ показал, что 80 процентов смертей приходится на мужчин и только 20 процентов — на женщин, но со временем этот разрыв сократился.

Согласно этим данным, главный исследователь считает, что существует тесная связь между высокой смертностью у мужчин и андрогенным эффектом, в частности, эффектом ДГТ на белок TMPRSS2, который используется covid 2019 для инвазии и проникновения в клетки, и в зависимости от этих данных, связанных с шестью гормонами. в частности (ДГТ). Исследователь смог обнаружить, что у женщин и детей меньше шансов умереть от болезни, чем у мужчин. Таким образом, исследователь разделил инфицированных пациентов в соответствии с их шестью гормонами, поскольку TMPRSS2 представляет собой андроген-регулируемую сериновую протеазу клеточной поверхности, экспрессируемую преимущественно в эпителиальных клетках предстательной железы и легких TMPRSS2.

Потенциальное влияние андрогена (ДГТ) на экспрессию TMPRSS2 у детей меньше, чем его влияние на женщин и мужчин, за которым следует вирусная тяжесть и активность у мужчин по сравнению с детьми и женщинами. .

Потенциальное влияние андрогенов (ДГТ) на экспрессию TMPRSS2 у женщин меньше, чем у мужчин, за чем следует тяжесть и активность вируса у мужчин по сравнению с женщинами.

Итак, главный исследователь считает, что когда некоторые исследователи исследовали роль половых стероидов в патогенезе SARS-CoV, сравнивая гонадэктомированные и контрольные аналоги после заражения. Гонадэктомия или лечение флутамидом, нестероидным антиандрогеном, не влияли на заболеваемость и смертность самцов мышей после летальной инфекции MA15. Они могли ошибаться в своих выводах, предполагая, что андрогены не играют роли в патогенезе SARS-CoV, потому что Гонадэктомия или лечение флутамидом не будут полностью влиять или ингибировать концентрацию ДГТ и его производных (5α-андростан-3α, 17β-диол) в тканях и крови, потому что после ингибирования тестостерона флутамидом . путь образования ДГТ будет активирован, чтобы компенсировать ингибированные уровни тестостерона, поэтому экспрессия TMPRSS2 будет значительно индуцироваться ДГТ, и обработанные животные не будут затронуты в случае лечения флутамидом, но в случае гонадэктомии экспрессия TMPRSS2 будет уменьшена на Ингибирование ДГТ только в том случае, если со временем прошла гонадэктомия, чтобы убедиться, что ДГТ и его производные полностью снизились до уровней, которые не позволят ему влиять на экспрессию TMPRSS2, а у самок мышей после блокирования рецепторов эстрогена он умер из-за увеличения образования андрогенов. гормоны.

Исследование показало, что 13-цис-ретиноевая кислота конкурентно и обратимо ингибирует дигидротестостерон. Таким образом, главный исследователь ожидает значительной модуляции экспрессии TMPRSS2 после лечения 13-цис-ретиноевой кислотой за счет временного предотвращения эффекта дигидротестостерона (ДГТ) на стимулирование и развитие TMPRSS2. выражение. И трансмембранные сериновые протеазы II типа TMPRSS2, которые могут расщеплять и активировать шиповидный белок (S) коронавируса тяжелого острого респираторного синдрома (SARS-CoV) для слияния мембран. Кроме того, эти протеазы расщепляют вирусный рецептор, ангиотензинпревращающий фермент карбоксипептидазы 2 (ACE2), и было высказано предположение, что расщепление ACE2 увеличивает инфекционность вируса.

Исследование показало, что COVID-19 снижает уровень тестостерона у мужчин, изменяя функционирование половых желез. Таким образом, повышенная тяжесть заболевания у мужчин может быть связана с пониженным уровнем тестостерона. Но, согласно основному объяснению исследователя, COVID-19 снижает уровень тестостерона, потому что у пациентов, инфицированных COVID-19, наблюдается резкое снижение уровня холестерина по сравнению со здоровыми людьми. Уровни холестерина довольно быстро снижаются на ранних стадиях инфекции и повышаются по мере того, как пациент начинает выздоравливать. начиная с холестерина через хорошо охарактеризованный путь биосинтеза стероидов, включающий последовательное действие нескольких ферментов. Таким образом, когда уровень холестерина снижается, за этим снижением следует снижение уровня тестостерона, и, согласно этому объяснению, терапия тестостероном при COVID 2019 не рекомендуется, а является временной. рекомендуется использовать ингибитор ДГТ, такой как изотретиноин, потому что такое лечение тестостероном ингибирует синтез холестерина за счет ингибирования по принципу обратной связи и снижает поглощение холестерина клетками Лейдига в яичках, а это также приводит к чрезмерному увеличению уровня ДГТ и его производных в различных тканях, что вызывает ТМПР СС2. потому что ДГТ является мощным активатором TMPRSS2, и за этим последует процессинг и активация шиповидного белка COVID2019 для связывания его рецепторов ACE2 в легких и почках, что приводит к их повреждению, особенно в яичках, поскольку он содержит высокие уровни протеаз и ACE2. Сериновые протеазы становятся важными участниками продукции, созревания и функциональной компетентности сперматозоидов.

Тамоксифен может ингибировать COVID-2019 за счет ингибирования подкисления эндосом и лизосом, а не ингибирования лизосомальных ферментов.

Исследование показало, что тамоксифен вызывает перераспределение слабоосновных химиотерапевтических препаратов из кислых органелл в ядро ​​в устойчивых к лекарственным средствам клетках. Агенты, нарушающие подкисление органелл (например, монензин, бафиломицин А1), вызывают аналогичное перераспределение. Измерение клеточного рН в нескольких клеточных линиях показывает, что тамоксифен ингибирует закисление эндосом и лизосом, не влияя на рН цитоплазмы. Подобно монензину, тамоксифен снижал скорость везикулярного транспорта через пути рециркуляции и секреции. Органеллярное закисление необходимо для многих клеточных функций, и его нарушение может объяснить многие побочные эффекты тамоксифена. Исследование показало, что тамоксифен и хлорохин участвуют в фагоцитозе эпителиальных клеток сетчатки. Исследование показало, что тамоксифен обладает свойством слабого основания и увеличивает рН эндолизосом и изменяет динамику эндосом. Важно отметить, что лечение ТАМ увеличивало выживаемость мышей, инъецированных летальной дозой STx1 или STx2. Защитный эффект не зависел от рецепторов эстрогена, но зависел от свойства слабого основания ТАМ, что позволяло ТАМ повышать рН эндолизосом и изменять эндосомальную динамику. Исследование показало, что Тамоксифен оказывает противомалярийное действие при лечении мышей, инфицированных P. berghei, у которых наблюдается более низкий уровень паразитемии и не развиваются признаки церебральной малярии. Было обнаружено, что Тамоксифен предотвращает фиброз легких и снижает уровни TGFβ-1 в сыворотке. Исследование показало, что тамоксифен оказывает ингибирующее действие на эндосомальные и лизосомальные цистеиновые протеазы лучше, чем хлорохин. Катепсины представляют собой эндосомальные и лизосомальные цистеиновые протеазы, которые играют важную роль в деградации белка в различных клеточных процессах, включая как эндоцитарный путь, так и аутофагию. Роль катепсинов в вирусной инфекции была впервые выявлена ​​Huang et al., и они обнаружили, что один ингибитор цистеиновых протеаз E64d и специфический ингибитор катепсина L Z-FY(t-Bu)-DMK способны блокировать инфекцию SARS-CoV. Катепсин D был более чувствителен к тамоксифену, чем к хлорохину. Воздействие тамоксифена снижало активность катепсина D при концентрациях менее 10 пМ. Действие хлорохина начиналось с 15 часов вечера.

.