Isotretinoiinin ja tamoksifeenin yhdistelmähoidon odotetaan antavan täydellisen suojan vakavaa akuuttia hengitystieoireyhtymää vastaan ​​koronavirus (Combination)

Tutkimus on satunnaistettu interventiovertaileva vaiheen II tutkimus. Kokeilun keston kunkin koehenkilön osalta odotetaan olevan 3 kuukautta.160 Tutkimukseen otetaan aikuisia mies- ja naispotilaita, joilla on positiivinen COVID-19-diagnoosi ja jotka täyttävät alla kuvatut osallistumiskriteerit. Koepopulaatio koostuu molemmista sukupuolista.

Tutkimustyyppi: Interventio [Muuta...]

Ensisijainen tarkoitus: Hoito

Tutkimusvaihe: Vaihe 2 Interventiotutkimusmalli: Peräkkäinen tehtävä

Aseiden lukumäärä: 3

Peitto: ei mitään (avoin etiketti)

Jako: satunnaistettu

Ilmoittautuminen: 160 [Odotettu]

Isotretinoiini (13cis RA) saattaa kyetä estämään COVID 2019:n sisäänpääsyn ACE2:n, AT1-proteiinin ja Ang II -välitteisen solunsisäisen kalsiumin vapautumisen vaimennuksen kautta interleukiini-6:n (IL-6) estämisen sijaan, ja tästä keskustellaan seuraavasti:

SARS-COV-2:n aiheuttama COVID-19-pandemia on tartuttanut yli 2 000 000 ihmistä ja aiheuttanut yli 150 000 kuolemaa. Keskeinen isäntäsoluproteiini, jota tarvitaan viruksen sisäänpääsyyn, on angiotensiiniä konvertoiva entsyymi 2 (ACE2), jonka ilmentymistä on osoitettu monissa kudoksissa, mukaan lukien keuhkojen, suun limakalvojen ja suolistossa, sydämessä, munuaisissa, endoteelissä ja ihossa olevissa alveolaarisissa epiteelisoluissa. ACE2:ta ilmentävät solut voivat toimia kotisoluina ja ovat alttiita SARS-CoV-2-infektiolle, koska ACE2-reseptori helpottaa viruksen pääsyä soluun ja replikaatiota. Tutkimus osoitti, että potilailla, joilla on korkea verenpaine ja diabetes mellitus, saattaa olla suurempi riski saada SARS-CoV-2-infektio, koska näitä potilaita hoidetaan usein ACE:n estäjillä (ACEI) tai angiotensiini II tyypin I reseptorin salpaajilla (ARB). aiemmin ehdotettu lisäävän ACE2:n ilmentymistä. Toisessa tutkimuksessa Sinha et al, jotka analysoivat julkisesti saatavilla olevaa Connectivity Map (CMAP) -tietosarjaa transkriptioiden edeltävistä ja jälkeisistä profiileista lääkehoitoa varten solulinjoissa yli 20 000 pienelle molekyylille, isotretinoiini oli vahvin ACE 2 -reseptorien säätelijä. Toisaalta he löysivät CMAP:sta kuusi lääkettä, joita tutkitaan parhaillaan COVID-19:n hoitoon tarkoitetuissa kliinisissä tutkimuksissa (klorokiini, talidomidi, metyyliprednisoloni, losartaani, lopinaviiri ja ritonaviiri, Clinictrials.gov), yhdenkään niistä ei havaittu merkittävästi muuttavan ACE2:n ilmentymistä (P>0,1) Lisäksi toinen tutkimus osoitti, että isotretinoiini on mahdollinen papaiinin kaltainen proteaasin (PLpro) inhibiittori, joka on SARS-CoV-2-geenien koodaama proteiini, jota pidetään yhtenä proteiineista, johon COVID-19-hoidossa tulisi kohdistua kohdepohjaisen virtuaalisen hoidon avulla. ligandiseulonta. Kuten päätutkija aiemmin mainitsi, (13cRA) on vahvin ACE2:n alasäätäjä. ja päätutkija odottaa, että 13cRA voi estää tai laskea ACE2:ta suoran vuorovaikutuksen ja transmembraanisen ACE2:n kanssa sitoutumisen kautta, mikä viittaa sen terapeuttiseen potentiaaliin estää COVID 2019:n pääsyn isäntäsoluun.

Aiemmat tutkimukset vastaavasta vakavasta akuutista hengitystieoireyhtymästä koronaviruksesta (SARS-CoV) ja SARS-CoV FP FP:stä ovat osoittaneet, että kalsiumilla (Ca2+) on tärkeä rooli fusogeenisessa aktiivisuudessa Ca2+:aa sitovan taskun kautta, jossa on säilynyt glutamiinihappo (E) ja asparagiinihappo. (D) tähteet osoittivat, että solunsisäinen Ca2+ tehostaa MERS-CoV WT PP -infektiota noin kaksinkertaisesti ja että E891 on ratkaiseva jäännös Ca2+-vuorovaikutukselle. Elektronispin resonanssi paljasti, että tämä parannus voi johtua Ca2+:n lisäämisestä MERS-CoV FP -fuusion kannalta merkitykselliseen kalvojärjestykseen. Kiehtovaa on, että isoterminen kalorimetrinen titraus osoitti, että MERS-CoV FP sitoo yhden Ca2+:n, toisin kuin SARS-CoV FP, joka sitoutuu kahteen Ca2+-ioniin.

Angiotensiini II lisää solunsisäistä kalsiumaktiivisuutta ehjän glomeruluksen podosyyteissä. L-tyypin Ca2+-kanavan salpaaja nikardipiini ei vaikuttanut Ang II-välitteiseen [Ca2+]-lisäykseen, ja on oletettu, että SARS-CoV-2:n sitoutuminen ACE2:een saattaa heikentää ACE2-jäännösaktiivisuutta ja vääristää ACE/ACE2-tasapainon tilaan. kohonnut angiotensiini II -aktiivisuus, joka johtaa keuhkojen vasokonstriktioon ja tulehduksellisiin ja oksidatiivisiin elinvaurioihin, mikä lisää akuutin keuhkovaurion (ALI) riskiä. AngII säätelee AT1-reseptorien kautta monia proinflammatorisia geenejä, kuten vaskulaaristen solujen adheesiomolekyyli-1 (VCAM-1), solujen välinen adheesiomolekyyli-1 (ICAM-1), interleukiini-6 (IL-6).30 mutta 13cis RA vähensi spesifisesti AT1-proteiinia annoksesta ja ajasta riippuvaisella tavalla. AT1:n ilmentymisen heikkeneminen johtaa vähentyneeseen AngII-välitteiseen solunsisäiseen kalsiumin vapautumiseen Samoin kuin reseptorin vaimeneminen, hoito 13cRA:lla johti AT1-mRNA:n merkittävään vähenemiseen. 13cRA:lla on glukoosista ja RAR/RXR:stä riippumaton mekanismi, joka estää AT1,

Isotretinoiini (13cis RA) saattaa kyetä estämään COVID 2019 -infektiota kumoamalla (DHT) androgeenisen induktion ja aktivointivaikutuksen TMPRSS2:n ilmentymiseen ja auttaa estämään sekä COVID 2019:n piikkiproteiinin (S) että virusreseptorin pilkkoutumista ja aktivoitumista. ja tästä keskustellaan seuraavasti:

TMPRSS2 on sekä yleisimmin muuttunut geeni primaarisessa eturauhassyövässä että kriittinen tekijä, joka mahdollistaa koronavirusten, mukaan lukien SARS-CoV-2, aiheuttaman soluinfektion. Sen ilmentymisen säätely steroideilla voi myötävaikuttaa vakavien infektioiden miesten määrään, ja koska TMPRSS2:lla ei ole tunnettuja välttämättömiä toimintoja ja estäjiä on saatavilla, se on houkutteleva kohde hengitysteiden virusinfektioiden ehkäisyyn tai hoitoon.

TMPRSS2, eturauhassyövän avainsäätelijä TMPRSS2 tunnistettiin ensimmäisen kerran eturauhassyövässä pian sen jälkeen, kun geeni oli alun perin kloonattu. Eturauhassyöpäsolulinjat lisäsivät voimakkaasti TMPRSS2:n ilmentymistä vasteena androgeeneille. TMPRSS2 ekspressoituu eturauhasen epiteelin luminaalisella puolella, ja sen ilmentyminen on lisääntynyt eturauhassyöpäkudoksessa verrattuna ei-syöpäiseen eturauhaskudokseen. Erityisesti TMPRSS2-geeni on kumppani yhdessä yleisimmistä geenifuusiotapahtumista kiinteissä kasvaimissa: somaattisissa geenien uudelleenjärjestelyissä, joihin liittyy TMPRSS2, onkogeenisten transkriptiotekijöiden ETS-perheen jäsenen, yleisimmin ERG:n, kanssa. Tätä fuusiota esiintyy noin 50 %:ssa primaarisista eturauhassyövistä eurooppalaisten miesten keskuudessa. Vaikka androgeeni ei normaalisti säätele ERG:tä, geenifuusio asettaa rinnakkain TMPRSS2:n androgeenireseptorin säätelyelementit ERG-geenin kanssa. ERG-geeniä säätelee näin ollen androgeenireseptorisignalointi, ja se ilmentyy voimakkaasti eturauhassyövissä, joissa on TMPRSS2: ERG-fuusio. Mielenkiintoista on, että TMPRSS2: ERG-fuusion esiintyvyys on pienempi sekä mustien että aasialaisten miesten eturauhaskasvaimissa. Tämän merkitys nykyiselle COVID-19-pandemialle on epäselvä.TMPRSS2: ERG-fuusiosyövillä on myös selkeä joukko hormonaaliseen signalointiin liittyviä riskitekijöitä. Esimerkiksi miehillä, joilla on korkeampi geneettisesti määrätty androgeenireseptorin transkriptioaktiivisuus, on suurempi riski saada TMPRSS2: ERG-fuusiopositiivinen eturauhassyöpä, mutta ei fuusionegatiiviseen eturauhassyöpään.

TMPRSS2 on androgeenireseptorin signalointikohdegeeni ja androgeenisäädellyt solun pinnan seriiniproteaasi, jota ilmentyy pääasiassa eturauhasen ja keuhkojen epiteelisoluissa. TMPRSS2:ta ilmentyy normaalisti eturauhasessa useita kertoja enemmän verrattuna mihin tahansa muuhun ihmisen kudokseen, vaikka normaali fysiologinen toiminta (funktiot) ) jää tuntemattomaksi. Tärkeää on, että toisin kuin muut TTSP:t, TMPRSS2:n transkriptiota säätelevät androgeeniset ligandit ja androgeenireseptori (AR). AR:n ja TMPRSS2:n välillä on positiivinen korrelaatio mikrodissektoidussa primaarisen kasvaimen epiteelissä (r2 = 0,39 ; p

Dihydrotestosteroni (DHT) indusoi merkittävästi ja dramaattisesti TMPRSS2-proteiinin ilmentymistä kahdella molekyylimassalla, 60 (täyspitkä) ja 38 kDa (N-pää) annosvasteella

Kiinan epidemian tiedot osoittavat, että miesten kuolleisuus on lähes 50 prosenttia korkeampi kuin naisten, osoittavat, että varhaiset Kiinasta tehdyt tutkimukset viittaavat siihen, että naiset ja lapset kuolevat vähemmän kuin miehet, jos he saavat koronaviruksen. Kuolleisuus Covid-19-tautiin, koronavirustartunnan saaneiden kehittämään tautiin, on kaikilla alhainen: vain 2,4 prosenttia kiinalaisen tutkimuksen 44 672 ihmisestä kuoli. Mutta vaikka suunnilleen parillinen määrä miehiä ja naisia ​​saa taudin, miehille kehittyy todennäköisemmin niin vakava Covid-19-tapaus, että he kuolevat.

Yli 70 prosenttia Italian koronaviruskuolemista on ollut miesten keskuudessa, mutta siellä tutkijat myöntävät olevansa hämmentyneitä sukupuolten välisestä erosta. Italiassa ainakin 3 400 ihmistä on kuollut tuhoiseen tautiin - se ilmoitti eilen, että sen kuolonuhrien määrä on suurempi kuin Kiinassa - mutta alle 1 000 heistä on ollut naisia. Italian kansanterveystutkimuslaitoksen mukaan miehet saavat todennäköisemmin tartunnan ja muodostavat 60 prosenttia vahvistetuista tapauksista. Aikaisempi analyysi osoitti, että 80 prosenttia kuolemista oli miehiä ja vain 20 prosenttia naisia ​​- mutta ero on kaventunut ajan myötä.

Näiden tietojen mukaan päätutkija uskoo, että miesten korkean kuolleisuuden ja androgeenisen vaikutuksen välillä on vahva yhteys, erityisesti DHT:n vaikutuksen TMPRSS2-proteiiniin, jota covid 2019 käyttää solujen tunkeutumiseen ja sisäänpääsyyn, ja näistä tiedoista riippuen kuuteen hormoniin. erityisesti (DHT) , Tutkija pystyi löytämään heran naiset ja lapset kuolevat vähemmän todennäköisemmin sairauteen kuin miehet. Niinpä tutkija jakoi tartunnan saaneet potilaat heidän kuuden hormoninsa mukaan, koska TMPRSS2 on androgeenisäädelty solupinnan seriiniproteaasi, jota ilmentyy pääasiassa eturauhasen ja keuhkojen epiteelisolussa TMPRSS2.

Androgeenin (DHT) mahdollinen vaikutus TMPRSS2:n ilmentymiseen lapsilla on pienempi kuin sen vaikutus naisilla ja miehillä, minkä jälkeen viruksen vakavuus ja voimakkuus miehillä verrattuna lapsiin ja naisiin. .

Androgeenin (DHT) mahdollinen vaikutus TMPRSS2:n ilmentymiseen naisilla on pienempi kuin miehillä, minkä jälkeen viruksen vakavuus ja voimakkuus miehillä verrattuna naisiin.

Niinpä päätutkija uskoo, että kun jotkut tutkijat tutkivat sukupuolisteroidien roolia SARS-CoV-patogeneesissä vertaamalla sukupuolirauhasten poistoa ja kontrollivastineita tartunnan jälkeen. Gonadektomia tai hoito flutamidilla, ei-steroidisella antiandrogeenilla, ei vaikuttanut sairastuvuuteen ja kuolleisuuteen uroshiirillä tappavan MA15-infektion jälkeen. He saattavat olla väärässä päätelmissään ehdottaessaan, että androgeenit eivät näytä roolia SARS-CoV-patogeneesissä, koska Gonadektomia tai hoito flutamidilla ei täysin vaikuta tai estä DHT:n ja sen johdannaisten (5α-Androstan-3α,17β-dioli) pitoisuutta kudoksissa ja veressä, koska testosteronin estämisen jälkeen flutamidilla. DHT:n muodostumisreitti aktivoituu kompensoimaan estyneitä testosteronitasoja, joten DHT indusoi merkittävästi TMPRSS2:n ilmentymistä eikä flutamidihoito vaikuta hoidetuihin eläimiin, mutta gonadektomian tapauksessa TMPRSS2:n ilmentyminen vähenee DHT:n esto vain, jos aikojen saatossa on siirtynyt sukupuolirauhasten poistoon, jotta voidaan varmistaa, että DHT ja sen johdannaiset ovat laskeneet täysin tasoilla, jotka eivät anna sen vaikuttaa TMPRSS2:n ilmentymiseen, ja naarashiirillä estrogeenireseptorien salpauksen jälkeen se kuoli lisääntyneen androgeenisten reseptoreiden muodostumisen vuoksi. hormonit.

Tutkimus osoitti, että 13-cis-retinoiinihappo estää kilpailevasti ja palautuvasti dihydrotestosteronia. Päätutkija odottaa TMPRSS2:n ilmentymisen merkittävää modulaatiota 13-cis-retinoiinihapolla käsittelyn jälkeen estämällä tilapäisesti dihydrotestosteronin (DHT) vaikutuksen TMPRSS2:ta edistäviin ja ilmaisu. Ja tyypin II transmembraaniset seriiniproteaasit TMPRSS2, jotka voivat pilkkoa ja aktivoida vakavan akuutin hengitystieoireyhtymän koronaviruksen (SARS-CoV) piikkiproteiinin (S) kalvofuusiota varten. Lisäksi nämä proteaasit pilkkovat virusreseptorin, karboksipeptidaasi-angiotensiinikonvertoivan entsyymin 2:n (ACE2), ja ehdotettiin, että ACE2:n pilkkominen lisää viruksen tarttuvuutta.

Tutkimus osoitti, että COVID-19 alentaa miesten testosteronitasoja muuttamalla sukurauhasten toimintaa. Voisiko miesten taudin lisääntynyt vakavuus johtua alentuneesta testosteronista. Mutta päätutkijan selityksen mukaan COVID-19 alentaa testosteronitasoja, koska COVID 19 -tartunnan saaneiden potilaiden kolesterolitasot laskevat dramaattisesti terveisiin verrokkeihin verrattuna. Kolesterolitasot laskevat melko nopeasti infektion alkuvaiheessa ja kasvavat, kun potilas alkaa toipua. Näin ollen, mikä osoittaa, että kolesterolilla voi olla tärkeä rooli kehon puolustamisessa tällaisia ​​infektioita vastaan, ja päätutkijan selityksestä riippuen testosteronia syntetisoidaan. alkaen kolesterolista hyvin karakterisoidun steroidibiosynteesireitin kautta, johon liittyy useiden entsyymien peräkkäinen toiminta. Joten kun kolesterolitasot laskevat, tätä laskua seuraa testosteronitason lasku ja tämän selityksen mukaan testosteronihoitoa ei suositella COVID 2019: ssä, vaan tilapäinen. DHT-inhibiittoria, kuten isotretinoiinia, suositellaan, koska tämä testosteronihoito estää kolesterolin synteesiä estämällä takaisinkytkennän ja vähentää kolesterolin ottoa Leydig-soluissa kiveksissä ja tämä johtaa myös DHT-arvojen ja sen johdannaisten liialliseen nousuun eri kudoksissa, mikä indusoi TMPR SS2. koska DHT on voimakas TMPRSS2:n aktivaattori, ja tätä seuraa COVID2019-piikkiproteiinin prosessointi ja aktivaatio ACE2-reseptoriensa sitomiseksi keuhkoissa ja munuaisissa, mikä johtaa niiden vaurioitumiseen erityisesti kiveksissä, koska se sisältää korkeita proteaaseja ja ACE2:ta. Seriiniproteaasit ovat nousemassa tärkeiksi tekijöiksi siittiöiden tuotannon, kypsymisen ja toiminnallisen kyvyn kannalta.

Tamoksifeeni saattaa pystyä estämään COVID 2019:n estämällä endosomien ja lysosomien happamoitumista lysosomaalisten entsyymien estämisen sijaan.

Tutkimus osoitti, että tamoksifeeni aiheuttaa heikkojen emästen kemoterapeuttisten aineiden uudelleenjakautumista happamista organelleista tumaan lääkeresistenteissä soluissa. Organellien happamoitumista häiritsevät aineet (esim. monensiini, bafilomysiini A1) aiheuttavat samanlaisen uudelleenjakautumisen. Solujen pH:n mittaus useissa solulinjoissa paljastaa, että tamoksifeeni estää endosomien ja lysosomien happamoitumista vaikuttamatta sytoplasman pH:hon. Samoin kuin monensiini, tamoksifeeni hidasti vesikulaarista kulkeutumista kierrätys- ja eritysreittien kautta. Organellaarista happamoitumista tarvitaan moniin solutoimintoihin, ja sen häiriintyminen voi selittää monia tamoksifeenin sivuvaikutuksia. Tutkimus osoitti, että tamoksifeeni ja klorokiini asuttavat verkkokalvon epiteelisoluissa. Tutkimus osoitti, että tamoksifeenilla on heikko emäsominaisuus ja se lisää endolysosomaalista pH:ta ja muuttaa endosomaalista dynamiikkaa. Tärkeää on, että TAM-hoito paransi hiirten selviytymistä, joille injektoitiin tappava STx1- tai STx2-annos. Suojavaikutus oli riippumaton estrogeenireseptoreista, mutta riippui TAM:n heikosta emäsominaisuudesta, mikä mahdollisti TAM:n nostaa endolysosomaalista pH:ta ja muuttaa endosomaalista dynamiikkaa. Tutkimus osoitti, että tamoksifeenilla on malariaa estävä vaikutus, kun hoidetaan P. berghei -tartunnan saaneita hiiriä, joilla on alhaisempi parasitemian taso ja jotka eivät kehitä aivomalarian merkkejä. Tamoksifeenin on todettu ehkäisevän keuhkofibroosia ja alentavan seerumin TGFβ-1-tasoja. Tutkimus osoitti, että tamoksifeenilla on endosomaalisia ja lysosomaalisia kysteiiniproteaaseja estävä vaikutus parempi kuin klorokiini, katepsiinit ovat endosomaalisia ja lysosomaalisia kysteiiniproteaaseja, joilla on tärkeä rooli proteiinien hajoamisessa erilaisissa soluprosesseissa, mukaan lukien sekä endosyyttireitti että autofagia. Katepsiinien roolin virusinfektiossa tunnistivat ensin Huang et al ja he havaitsivat, että yksi kysteiiniproteaasin estäjä E64d ja spesifinen katepsiini L:n estäjä Z-FY(t-Bu)-DMK pystyvät estämään SARS-CoV-infektion. Katepsiini D oli herkempi tamoksifeenille kuin klorokiinille. Tamoksifeenialtistukset vähensivät katepsiini D -aktiivisuutta alle 10 pM pitoisuuksilla. Klorokiinin vaikutus alkoi klo 15 pM

.