Vývoj a prospektivní validace standardizovaného průtokového cytometrického testu exprese neutrofilní myeloperoxidázy v periferní krvi pro vyloučení myelodysplastických syndromů. (MPO-MDS-Develp)

Primárním cílem studie vývoje MPO-MDS je odhadnout diskriminační přesnost (tj. oblast pod ROC křivkou spolu s 95% CI) standardizovaného a poloautomatického průtokového cytometrického testu exprese neutrofilů MPO v periferní krvi pro diagnózu MDS u ​​dospělých pacientů.

Sekundárními cíli je posoudit:

1. intralaboratorní reprodukovatelnost (intra- a inter-analytická přesnost) pro intraindividuální měření RCV exprese neutrofilů MPO v periferní krvi;
2. stabilita vzorku pro intraindividuální měření RCV exprese neutrofilů MPO v periferní krvi v různých časových bodech ve srovnání s H0 (uchováváno při 4 °C a při pokojové teplotě);
3. mezilaboratorní reprodukovatelnost pro intraindividuální měření RCV exprese neutrofilů MPO v periferní krvi;
4. negativní prediktivní hodnota pro intraindividuální měření RCV exprese neutrofilů MPO v periferní krvi (s předem specifikovanou hranicí 30,0 %) při vyloučení MDS u ​​po sobě jdoucích dospělých pacientů.

Projekt MPO-MDS-Develop je multicentrická, průřezová, diagnostická studie přesnosti indexového testu srovnáním s referenčním standardem u neselektovaných po sobě jdoucích pacientů.

Screening: Všichni po sobě jdoucí pacienti odeslaní do imunohematologické laboratoře v místech studie pro podezření na MDS budou podrobeni screeningu, zda jsou způsobilí. Laboratorní lékař přezkoumá kritéria pro zařazení a vyloučení pomocí počítačových lékařských a laboratorních záznamů.

Nábor: Účastníci budou zahrnuti do studie, jakmile budou provedeny všechny screeningové aktivity, a to pouze v případě, že pacient splní všechna kritéria pro zařazení a žádná kritéria pro vyloučení. Souhlas s průtokovou cytometrickou analýzou vzorku periferní krve a sběrem dat prostřednictvím přezkoumání grafu bude požadován v režimu „neopozice“ (opt-out): po doručení příslušných písemných informací budou shromažďována průřezová data s výjimkou případ odporu ze strany pacienta. Všem pacientům zařazeným do studie bude přiděleno jedinečné identifikační číslo pacienta. Toto číslo se bude používat k identifikaci pacienta v průběhu studie.

Indexový test: Průtoková cytometrická analýza exprese neutrofilní myeloperoxidázy v periferní krvi bude provedena pomocí jedné zkumavky připravené k použití s ​​lyofilizovanými protilátkami vyvinuté ve spolupráci s Becton Dickinson France SAS a zaslepené vůči referenčnímu standardu.

Referenční standard: Diagnóza MDS bude stanovena podle klasifikace Světové zdravotnické organizace (WHO) na základě klinických dat, cytopenie periferní krve, cytomorfologie periferní krve a aspirátu kostní dřeně a cytogenetické analýzy. Kritéria pro diagnózu MDS jsou 1) přítomnost ≥ 10 % dysplastických buněk v jakékoli hematopoetické linii, 2) vyloučení akutní myeloidní leukémie (definované přítomností ≥ 20 % blastů periferní krve nebo kostní dřeně) a 3) vyloučení reaktivních etiologií dysplazie. Cytopenie je definována koncentrací hemoglobinu <10 g/dl, počtem krevních destiček <100x109/l a/nebo absolutním počtem neutrofilů <1,8 x109/l. Diagnóza MDS by však mohla být provedena s mírnějšími hladinami cytopenie. Idiopatická cytopenie nejistého významu (ICUS) je definována nevysvětlenou mírnou perzistující cytopenií po dobu nejméně 6 měsíců a selháním stanovení diagnózy MDS podle publikovaných doporučení. V souladu s klasifikací WHO bude podkategorizace MDS záviset na stupni dysplazie (unilineage versus multilineage), procentech blastů, přítomnosti prstencových sideroblastů a cytogenetické analýze (del(5q)). Kritéria pro diagnózu CMML jsou 1) přítomnost přetrvávající monocytózy periferní krve ≥1 x 109/l a 2) monocyty představující více než 10 % diferenciálního počtu bílých krvinek. Hodnocení cytomorfologie kostní dřeně bude provedeno prospektivně zkušenými hematopatology, kteří jsou zaslepeni výsledky indexového testu.

Pacienti s potvrzeným podezřením na MDS: Účastníci, u kterých je diagnóza MDS (nebo CMML) potvrzena referenčním standardem, budou zařazeni jako pacienti s potvrzeným podezřením na MDS.

Pacienti s nepotvrzeným podezřením na MDS: Účastníci, u kterých je diagnóza MDS (nebo CMML) referenčním standardem vyloučena, budou zařazeni jako pacienti s nepotvrzeným podezřením na MDS. Tato podskupina bude zahrnovat pacienty s ICUS, jak jsou definováni v souladu s publikovanými doporučeními.

Sledování: V této průřezové diagnostické studii přesnosti není plánována žádná následná návštěva.