Udvikling og prospektiv validering af en standardiseret flowcytometrisk analyse af perifert blod neutrofil myeloperoxidase-ekspression til udelukkelse af myelodysplastiske syndromer. (MPO-MDS-Develp)

Det primære formål med MPO-MDS-udviklingsstudie er at estimere den diskriminerende nøjagtighed (dvs. areal under ROC-kurven sammen med 95 % CI) af en standardiseret og semi-automatisk flowcytometrisk analyse af neutrofil MPO-ekspression i perifert blod til diagnosen af MDS hos voksne patienter.

De sekundære mål er at vurdere:

1. intra-laboratorie reproducerbarhed (intra- og inter-assay-præcision) til intra-individuel RCV-måling af neutrofil MPO-ekspression i perifert blod;
2. prøvestabilitet til intra-individuel RCV-måling af neutrofil MPO-ekspression i perifert blod på forskellige tidspunkter sammenlignet med H0 (opbevaret ved 4°C og ved stuetemperatur);
3. inter-laboratorie reproducerbarhed til intra-individuel RCV-måling af neutrofil MPO-ekspression i perifert blod;
4. den negative prædiktive værdi for intra-individuel RCV-måling af neutrofil MPO-ekspression i perifert blod (med en forudbestemt tærskel på 30,0%) for at udelukke MDS hos konsekutive voksne patienter.

MPO-MDS-Develop-projektet er et multicenter, tværsnitsdiagnostisk nøjagtighedsstudie af en indekstest ved sammenligning med en referencestandard i uudvalgte på hinanden følgende patienter.

Screening: Alle på hinanden følgende patienter, der henvises til immunhæmatologisk laboratorium på undersøgelsesstederne for mistanke om MDS, vil blive screenet for egnethed. En laboratorielæge vil gennemgå inklusions- og eksklusionskriterier ved hjælp af computeriserede læge- og laboratoriejournaler.

Rekruttering: Deltagerne vil blive inkluderet i undersøgelsen, når alle screeningsaktiviteterne er blevet udført, og kun hvis patienten opfylder alle inklusions- og ingen eksklusionskriterier. Samtykke til flowcytometrianalyse af perifer blodprøve og dataindsamling gennem diagramgennemgang vil blive indhentet under et regime af "ikke-opposition" (opt-out): efter at passende skriftlig information er leveret, vil der blive indsamlet tværsnitsdata undtagen i tilfælde af modstand fra patienten. Alle patienter inkluderet i undersøgelsen vil blive tildelt et unikt patientidentifikationsnummer. Dette nummer vil blive brugt til at identificere patienten gennem hele undersøgelsen.

Indekstest: Flowcytometrianalyse af neutrofil myeloperoxidase-ekspression i perifert blod vil blive udført ved hjælp af et enkelt brugsklart rør med frysetørrede antistoffer udviklet i samarbejde med Becton Dickinson France SAS og blindet til referencestandarden.

Referencestandard: Diagnosen MDS vil blive etableret i henhold til Verdenssundhedsorganisationens (WHO) klassifikation, baseret på kliniske data, perifer blodcytopeni, cytomorfologi af perifert blod og knoglemarvsaspirat og cytogenetisk analyse. Kriterierne for MDS-diagnose er 1) tilstedeværelsen af ​​≥10 % dysplastiske celler i enhver hæmatopoietisk afstamning, 2) udelukkelse af akut myeloid leukæmi (defineret ved tilstedeværelsen af ​​≥20 % perifert blod eller knoglemarvsblaster), og 3) udelukkelse af reaktive ætiologier af dysplasi. Cytopeni er defineret ved hæmoglobinkoncentration <10 g/dL, blodpladetal <100x109/L og/eller absolut neutrofiltal <1,8 x109/L. Alligevel kan en diagnose af MDS stilles med mildere niveauer af cytopeni. Idiopatisk cytopeni af usikker betydning (ICUS) er defineret ved uforklarlig mild persisterende cytopeni i mindst 6 måneder og manglende etablering af diagnosen MDS i henhold til offentliggjorte retningslinjer. I overensstemmelse med WHO-klassificeringen vil MDS-underkategorisering afhænge af graden af ​​dysplasi (unilineage versus multilineage), blastprocenter, tilstedeværelse af ringsideroblaster og cytogenetisk analyse (del(5q)). Kriterierne for CMML-diagnose er 1) tilstedeværelsen af ​​vedvarende perifer blodmonocytose ≥1 x109/L, og 2) monocyt, der tegner sig for mere end 10 % af forskellen i hvide blodlegemer. Evaluering af knoglemarvscytomorfologi vil blive udført prospektivt af erfarne hæmatopatologer, som er blindet for indekstestresultaterne.

Patienter med bekræftet mistanke om MDS: Deltagere, for hvem diagnosen MDS (eller CMML) er bekræftet af referencestandarden, vil blive kategoriseret som patienter med bekræftet mistanke om MDS.

Patienter med ubekræftet mistanke om MDS: Deltagere, for hvem diagnosen MDS (eller CMML) er udelukket af referencestandarden, vil blive kategoriseret som patienter med ubekræftet mistanke om MDS. Sidstnævnte undergruppe vil omfatte patienter med ICUS, som defineret i overensstemmelse med offentliggjorte retningslinjer.

Opfølgning: Der er ikke planlagt noget opfølgningsbesøg i dette tværsnitsdiagnostiske nøjagtighedsstudie.