Desarrollo y validación prospectiva de un ensayo de citometría de flujo estandarizado de la expresión de mieloperoxidasa de neutrófilos en sangre periférica para descartar síndromes mielodisplásicos. (MPO-MDS-Develp)

El objetivo principal del estudio MPO-MDS-develop es estimar la precisión discriminativa (es decir, el área bajo la curva ROC junto con el IC del 95 %) de un ensayo de citometría de flujo estandarizado y semiautomático de expresión de MPO de neutrófilos en sangre periférica para el diagnóstico de SMD en pacientes adultos.

Los objetivos secundarios son evaluar:

1. reproducibilidad intralaboratorio (precisión intraensayo e interensayo) para la medición de RCV intraindividual de la expresión de MPO de neutrófilos en sangre periférica;
2. estabilidad de la muestra para la medición de RCV intraindividual de la expresión de MPO de neutrófilos en sangre periférica en diferentes momentos en comparación con H0 (almacenada a 4 °C ya temperatura ambiente);
3. reproducibilidad entre laboratorios para la medición de RCV intraindividual de la expresión de MPO de neutrófilos en sangre periférica;
4. el valor predictivo negativo para la medición de RCV intraindividual de la expresión de MPO de neutrófilos en sangre periférica (con un umbral preespecificado de 30,0 %) para descartar SMD en pacientes adultos consecutivos.

El proyecto MPO-MDS-Develop es un estudio multicéntrico, transversal y de precisión diagnóstica de una prueba índice en comparación con un estándar de referencia, en pacientes consecutivos no seleccionados.

Evaluación: todos los pacientes consecutivos remitidos al laboratorio de inmunohematología en los sitios de estudio por sospecha de SMD serán evaluados para determinar su elegibilidad. Un médico de laboratorio revisará los criterios de inclusión y exclusión, utilizando registros médicos y de laboratorio computarizados.

Reclutamiento: Los participantes serán incluidos en el estudio una vez que se hayan realizado todas las actividades de selección y solo si el paciente cumple con todos los criterios de inclusión y ninguno de exclusión. El consentimiento para el análisis de citometría de flujo de la muestra de sangre periférica y la recopilación de datos a través de la revisión de gráficos se buscará bajo un régimen de "no oposición" (opt-out): después de que se entregue la información escrita adecuada, se recopilarán datos transversales excepto en caso de oposición del paciente. A todos los pacientes incluidos en el estudio se les asignará un número único de identificación de paciente. Este número se utilizará para identificar al paciente durante todo el estudio.

Prueba de índice: el análisis de citometría de flujo de la expresión de mieloperoxidasa de neutrófilos en sangre periférica se realizará utilizando un solo tubo listo para usar con anticuerpos liofilizados desarrollados en asociación con Becton Dickinson France SAS y cegados al estándar de referencia.

Estándar de referencia: El diagnóstico de MDS se establecerá de acuerdo con la clasificación de la Organización Mundial de la Salud (OMS), con base en datos clínicos, citopenia de sangre periférica, citomorfología de sangre periférica y aspirado de médula ósea y análisis citogenético. Los criterios para el diagnóstico de SMD son 1) la presencia de ≥10 % de células displásicas en cualquier linaje hematopoyético, 2) la exclusión de leucemia mieloide aguda (definida por la presencia de ≥20 % de blastos en sangre periférica o médula ósea) y 3) la exclusión de etiologías reactivas de displasia. La citopenia se define por una concentración de hemoglobina <10 g/dl, recuento de plaquetas <100x109/l y/o recuento absoluto de neutrófilos <1,8 x109/l. Sin embargo, se podría hacer un diagnóstico de MDS con niveles más leves de citopenia. La citopenia idiopática de significado incierto (ICUS, por sus siglas en inglés) se define por una citopenia persistente leve inexplicable durante al menos 6 meses y la imposibilidad de establecer el diagnóstico de SMD de acuerdo con las pautas publicadas. De acuerdo con la clasificación de la OMS, la subcategorización de SMD se basará en el grado de displasia (unilinaje frente a multilinaje), porcentajes de blastos, presencia de sideroblastos anulares y análisis citogenético (del(5q)). Los criterios para el diagnóstico de CMML son 1) la presencia de monocitosis persistente en sangre periférica ≥1 x109/L, y 2) monocitos que representen más del 10 % del recuento diferencial de glóbulos blancos. La evaluación de la citomorfología de la médula ósea será realizada prospectivamente por hematopatólogos experimentados que desconocen los resultados de la prueba índice.

Pacientes con sospecha confirmada de SMD: los participantes cuyo diagnóstico de SMD (o LMMC) sea confirmado por el estándar de referencia se clasificarán como pacientes con sospecha confirmada de SMD.

Pacientes con sospecha no confirmada de SMD: los participantes para los que el estándar de referencia descarte el diagnóstico de SMD (o LMMC) se clasificarán como pacientes con sospecha no confirmada de SMD. Este último subgrupo incluirá pacientes con ICUS, según se define de acuerdo con las guías publicadas.

Seguimiento: No se planea una visita de seguimiento en este estudio transversal de precisión diagnóstica.