Разработка и проспективная валидация стандартизированного проточного цитометрического анализа экспрессии миелопероксидазы нейтрофилов периферической крови для исключения миелодиспластических синдромов. (MPO-MDS-Develp)

Основная цель исследования MPO-MDS-develop состоит в том, чтобы оценить дискриминационную точность (т. е. площадь под ROC-кривой вместе с 95% CI) стандартизированного и полуавтоматического проточного цитометрического анализа экспрессии нейтрофильной MPO в периферической крови для диагностики МДС у взрослых пациентов.

Второстепенные цели заключаются в оценке:

1. внутрилабораторная воспроизводимость (внутри- и межаналитическая точность) для внутрииндивидуального измерения RCV экспрессии нейтрофильной МПО в периферической крови;
2. стабильность образцов для внутрииндивидуального RCV-измерения экспрессии нейтрофильной МПО в периферической крови в разные моменты времени по сравнению с НО (хранение при 4°С и при комнатной температуре);
3. межлабораторная воспроизводимость для индивидуального измерения RCV экспрессии нейтрофильной МПО в периферической крови;
4. отрицательная прогностическая ценность для индивидуального измерения RCV экспрессии нейтрофильной МПО в периферической крови (с заранее заданным порогом 30,0%) для исключения МДС у последовательных взрослых пациентов.

Проект MPO-MDS-Develop представляет собой многоцентровое перекрестное исследование диагностической точности индексного теста в сравнении с эталонным стандартом у невыбранных последовательных пациентов.

Скрининг: Все пациенты, последовательно направленные в иммуногематологическую лабораторию в исследовательские центры с подозрением на МДС, будут проверены на соответствие требованиям. Врач-лаборант рассмотрит критерии включения и исключения, используя компьютеризированные медицинские и лабораторные записи.

Набор участников: участники будут включены в исследование после проведения всех скрининговых мероприятий и только в том случае, если пациент соответствует всем критериям включения и ни одному из критериев исключения. Согласие на проточный цитометрический анализ образца периферической крови и сбор данных путем просмотра карты будет запрашиваться в соответствии с режимом «невозражения» (отказ от участия): после предоставления соответствующей письменной информации будут собираться данные поперечного сечения, за исключением случаев, когда случае противодействия со стороны пациента. Всем пациентам, включенным в исследование, будет присвоен уникальный идентификационный номер пациента. Этот номер будет использоваться для идентификации пациента на протяжении всего исследования.

Индексный тест: проточный цитометрический анализ экспрессии нейтрофильной миелопероксидазы в периферической крови будет проводиться с использованием одной готовой к использованию пробирки с лиофилизированными антителами, разработанными в сотрудничестве с Becton Dickinson France SAS и ослепленными относительно эталонного стандарта.

Справочный стандарт: Диагноз МДС будет установлен в соответствии с классификацией Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) на основании клинических данных, цитопении периферической крови, цитоморфологии аспирата периферической крови и костного мозга и цитогенетического анализа. Критериями диагностики МДС являются: 1) наличие ≥10% диспластических клеток в любом гематопоэтическом ростке, 2) исключение острого миелоидного лейкоза (определяется наличием ≥20% бластов в периферической крови или костном мозге) и 3) исключение реактивной этиологии дисплазии. Цитопения определяется концентрацией гемоглобина <10 г/дл, количеством тромбоцитов <100x109/л и/или абсолютным числом нейтрофилов <1,8x109/л. Тем не менее, диагноз МДС может быть поставлен при более мягких уровнях цитопении. Идиопатическая цитопения неопределенной значимости (ICUS) определяется как необъяснимая легкая персистирующая цитопения в течение не менее 6 месяцев и невозможность установить диагноз МДС в соответствии с опубликованными рекомендациями. В соответствии с классификацией ВОЗ, подкатегория МДС будет основываться на степени дисплазии (однолинейная или многолинейная), проценте бластов, наличии кольцевых сидеробластов и цитогенетическом анализе (del(5q)). Критериями диагностики ХММЛ являются: 1) наличие стойкого моноцитоза периферической крови ≥1 x 109/л и 2) наличие моноцитов, составляющих более 10% дифференциального числа лейкоцитов. Оценка цитоморфологии костного мозга будет проводиться проспективно опытными гематопатологами, которые не знают результатов индексного теста.

Пациенты с подтвержденным подозрением на МДС: участники, у которых диагноз МДС (или ХММЛ) подтвержден эталонным стандартом, будут отнесены к категории пациентов с подтвержденным подозрением на МДС.

Пациенты с неподтвержденным подозрением на МДС: Участники, у которых диагноз МДС (или ХММЛ) исключен эталонным стандартом, будут отнесены к категории пациентов с неподтвержденным подозрением на МДС. Эта последняя подгруппа будет включать пациентов с ICUS, как это определено в соответствии с опубликованными рекомендациями.

Последующее наблюдение: в этом перекрестном исследовании точности диагностики повторные визиты не планируются.