Perifeerisen veren neutrofiilien myeloperoksidaasin ilmentymisen standardoidun virtaussytometrisen määrityksen kehittäminen ja tuleva validointi myelodysplastisten oireyhtymien poissulkemiseksi. (MPO-MDS-Develp)

MPO-MDS-kehitystutkimuksen ensisijainen tavoite on arvioida neutrofiilien MPO:n ilmentymisen perifeerisessä veressä standardoidun ja puoliautomaattisen virtaussytometrisen määrityksen erottava tarkkuus (eli ROC-käyrän alla oleva pinta-ala ja 95 % CI) diagnoosia varten. MDS:stä aikuisilla potilailla.

Toissijaisina tavoitteina on arvioida:

1. laboratorion sisäinen toistettavuus (määrityksen sisäinen ja välinen tarkkuus) neutrofiilien MPO:n ilmentymisen perifeerisessä veressä yksilön sisäiseen RCV-mittaukseen;
2. näytteen stabiilisuus neutrofiilien MPO:n ilmentymisen yksilön sisäisessä RCV-mittauksessa ääreisveressä eri ajankohtina verrattuna H0:aan (säilytetty 4 °C:ssa ja huoneenlämpötilassa);
3. laboratorioiden välinen toistettavuus neutrofiilien MPO:n ilmentymisen yksilön sisäiseen RCV-mittaukseen ääreisveressä;
4. negatiivinen ennustearvo yksilön sisäiselle RCV-mittaukselle neutrofiilien MPO:n ilmentymisestä ääreisveressä (ennalta määrätyllä kynnysarvolla 30,0 %) MDS:n poissulkemiseksi peräkkäisillä aikuispotilailla.

MPO-MDS-Develop-projekti on monikeskus, poikkileikkaus, diagnostinen indeksitestin tarkkuustutkimus vertailustandardiin verrattuna valitsemattomilla peräkkäisillä potilailla.

Seulonta: Kaikki peräkkäiset potilaat, jotka on lähetetty immunohematologiseen laboratorioon tutkimuspaikalla epäillään MDS:ää, seulotaan kelpoisuuden suhteen. Laboratoriolääkäri tarkistaa sisällyttämis- ja poissulkemiskriteerit tietokoneistettujen lääketieteellisten ja laboratoriotietojen avulla.

Rekrytointi: Osallistujat otetaan mukaan tutkimukseen, kun kaikki seulontatoimet on suoritettu, ja vain, jos potilas täyttää kaikki sisällyttämiskriteerit ja ei yhtään poissulkemiskriteerit. Suostumus ääreisverinäytteen virtaussytometriseen analyysiin ja tietojen keräämiseen kaavion tarkastelun kautta haetaan "ei vastusta" (opt-out) -menettelyn mukaisesti: kun asianmukaiset kirjalliset tiedot on toimitettu, kerätään poikkileikkaustietoja paitsi jos potilas vastustaa. Kaikille tutkimukseen osallistuville potilaille annetaan yksilöllinen potilastunnus. Tätä numeroa käytetään potilaan tunnistamiseen koko tutkimuksen ajan.

Indeksitesti: Virtaussytometrinen analyysi neutrofiilien myeloperoksidaasin ilmentymisestä ääreisveressä suoritetaan käyttämällä yhtä käyttövalmis putkea, jossa on lyofilisoituja vasta-aineita, jotka on kehitetty yhteistyössä Becton Dickinson France SAS:n kanssa ja sokkoutettu vertailustandardiin.

Viitestandardi: MDS-diagnoosi vahvistetaan Maailman terveysjärjestön (WHO) luokituksen mukaisesti, joka perustuu kliinisiin tietoihin, perifeerisen veren sytopeniaan, perifeerisen veren ja luuytimen aspiraatin sytomorfologiaan sekä sytogeneettiseen analyysiin. MDS-diagnoosin kriteerit ovat 1) ≥10 % dysplastisten solujen esiintyminen missä tahansa hematopoieettisessa sukulinjassa, 2) akuutin myelooisen leukemian poissulkeminen (määritetään ≥20 % perifeerisen veren tai luuytimen blastien esiintymisestä) ja 3) dysplasian reaktiivisten etiologioiden poissulkeminen. Sytopenia määritellään hemoglobiinipitoisuudella <10 g/dl, verihiutaleiden määrällä <100 x 109/l ja/tai absoluuttisella neutrofiilimäärällä <1,8 x 109/l. Silti MDS-diagnoosi voitaisiin tehdä lievemmällä sytopeniatasolla. Epävarman merkityksen idiopaattinen sytopenia (ICUS) määritellään selittämättömänä lievänä, pysyvänä sytopeniana vähintään 6 kuukautta ja epäonnistumisena MDS-diagnoosissa julkaistujen ohjeiden mukaisesti. WHO:n luokituksen mukaisesti MDS-alaluokitus perustuu dysplasian asteeseen (yksilinjaisuus vs. monilinjaisuus), räjähdysprosenttiosuudet, rengassideroblastien läsnäolo ja sytogeneettinen analyysi (del(5q)). CMML-diagnoosin kriteerit ovat 1) jatkuva perifeerisen veren monosytoosi ≥ 1 x 109/l ja 2) monosyyttien osuus valkosolujen erotusmäärästä yli 10 %. Luuytimen sytomorfologian arvioinnin suorittavat kokeneet hematopatologit, jotka ovat sokeutuneet indeksitestin tuloksiin.

Potilaat, joilla on vahvistettu MDS-epäily: Osallistujat, joiden MDS (tai CMML) diagnoosi on vahvistettu vertailustandardin mukaan, luokitellaan potilaiksi, joilla on vahvistettu MDS-epäily.

Potilaat, joilla on vahvistamaton MDS-epäily: Osallistujat, joiden MDS (tai CMML) diagnoosi on poissuljettu vertailustandardin mukaan, luokitellaan potilaiksi, joilla on vahvistamaton MDS-epäily. Tähän jälkimmäiseen alaryhmään kuuluvat potilaat, joilla on ICUS julkaistujen ohjeiden mukaisesti.

Seuranta: Tässä poikkileikkaustutkimuksessa ei ole suunniteltu seurantakäyntiä.