Sviluppo e validazione prospettica di un test citometrico a flusso standardizzato dell'espressione della mieloperossidasi neutrofila nel sangue periferico per escludere le sindromi mielodisplastiche. (MPO-MDS-Develp)

L'obiettivo principale dello studio MPO-MDS-develop è stimare l'accuratezza discriminativa (cioè l'area sotto la curva ROC insieme al 95% CI) di un'analisi citometrica a flusso standardizzata e semiautomatica dell'espressione di MPO dei neutrofili nel sangue periferico per la diagnosi di SMD nei pazienti adulti.

Gli obiettivi secondari sono di valutare:

1. riproducibilità intra-laboratorio (precisione intra- e inter-dosaggio) per la misurazione intra-individuale dell'RCV dell'espressione di MPO dei neutrofili nel sangue periferico;
2. stabilità del campione per la misurazione intra-individuale dell'RCV dell'espressione di MPO dei neutrofili nel sangue periferico a tempi diversi rispetto a H0 (conservato a 4°C ea temperatura ambiente);
3. riproducibilità inter-laboratorio per la misurazione intra-individuale di RCV dell'espressione di MPO dei neutrofili nel sangue periferico;
4. il valore predittivo negativo per la misurazione intra-individuale di RCV dell'espressione di MPO dei neutrofili nel sangue periferico (con una soglia prespecificata del 30,0%) nell'escludere MDS in pazienti adulti consecutivi.

Il progetto MPO-MDS-Develop è uno studio di accuratezza diagnostica multicentrico, trasversale, di un test indice rispetto a uno standard di riferimento, in pazienti consecutivi non selezionati.

Screening: tutti i pazienti consecutivi indirizzati al laboratorio di immunoematologia nei siti dello studio per sospetto di MDS saranno sottoposti a screening per l'idoneità. Un medico di laboratorio esaminerà i criteri di inclusione ed esclusione, utilizzando cartelle cliniche e di laboratorio computerizzate.

Reclutamento: i partecipanti saranno inclusi nello studio una volta condotte tutte le attività di screening e solo se il paziente soddisfa tutti i criteri di inclusione e nessuno di esclusione. Il consenso per l'analisi di citometria a flusso del campione di sangue periferico e la raccolta dei dati attraverso la revisione della cartella saranno richiesti in un regime di "non opposizione" (opt-out): dopo la consegna di un'adeguata informativa scritta, i dati trasversali saranno raccolti tranne in caso di opposizione del paziente. A tutti i pazienti inclusi nello studio verrà assegnato un numero di identificazione univoco del paziente. Questo numero verrà utilizzato per identificare il paziente durante lo studio.

Test dell'indice: l'analisi della citometria a flusso dell'espressione della mieloperossidasi dei neutrofili nel sangue periferico verrà eseguita utilizzando un'unica provetta pronta per l'uso con anticorpi liofilizzati sviluppati in collaborazione con Becton Dickinson France SAS e in cieco rispetto allo standard di riferimento.

Standard di riferimento: la diagnosi di MDS sarà stabilita secondo la classificazione dell'Organizzazione mondiale della sanità (OMS), sulla base di dati clinici, citopenia del sangue periferico, citomorfologia del sangue periferico e dell'aspirato del midollo osseo e analisi citogenetica. I criteri per la diagnosi di MDS sono 1) la presenza di ≥10% di cellule displastiche in qualsiasi linea ematopoietica, 2) l'esclusione della leucemia mieloide acuta (definita dalla presenza di ≥20% di sangue periferico o di blasti del midollo osseo) e 3) il esclusione delle eziologie reattive della displasia. La citopenia è definita da una concentrazione di emoglobina <10 g/dL, conta piastrinica <100x109/L e/o conta assoluta dei neutrofili <1,8 x109/L. Eppure una diagnosi di MDS potrebbe essere fatta con livelli più lievi di citopenia. La citopenia idiopatica di significato incerto (ICUS) è ​​definita da una citopenia lieve persistente inspiegabile per almeno 6 mesi e dal mancato accertamento della diagnosi di MDS secondo le linee guida pubblicate. Coerentemente con la classificazione dell'OMS, la sottocategorizzazione delle MDS si baserà sul grado di displasia (unilinea contro multilinea), percentuali di blasti, presenza di sideroblasti ad anello e analisi citogenetica (del(5q)). I criteri per la diagnosi di CMML sono 1) la presenza di monocitosi persistente nel sangue periferico ≥1 x109/L, e 2) i monociti rappresentano più del 10% della conta differenziale dei globuli bianchi. La valutazione della citomorfologia del midollo osseo sarà eseguita in modo prospettico da ematopatologi esperti che sono all'oscuro dei risultati del test indice.

Pazienti con sospetto confermato di MDS: i partecipanti per i quali la diagnosi di MDS (o CMML) è confermata dallo standard di riferimento saranno classificati come pazienti con sospetto confermato di MDS.

Pazienti con sospetto non confermato di MDS: i partecipanti per i quali la diagnosi di MDS (o CMML) è esclusa dallo standard di riferimento saranno classificati come pazienti con sospetto non confermato di MDS. Quest'ultimo sottogruppo comprenderà i pazienti con ICUS, come definito in accordo con le linee guida pubblicate.

Follow-up: in questo studio trasversale sull'accuratezza diagnostica non è prevista alcuna visita di follow-up.