Desenvolvimento e Validação Prospectiva de um Ensaio de Citometria de Fluxo Padronizado da Expressão da Mieloperoxidase de Neutrófilos do Sangue Periférico para Excluir Síndromes Mielodisplásicas. (MPO-MDS-Develp)

O objetivo principal do estudo de desenvolvimento de MPO-MDS é estimar a precisão discriminativa (isto é, área sob a curva ROC junto com 95% CI) de um ensaio de citometria de fluxo semiautomático e padronizado da expressão de MPO de neutrófilos no sangue periférico para o diagnóstico de SMD em pacientes adultos.

Os objetivos secundários são avaliar:

1. reprodutibilidade intralaboratorial (precisão intra e interensaio) para medição intraindividual de RCV da expressão de neutrófilos MPO no sangue periférico;
2. estabilidade da amostra para medição de RCV intraindividual da expressão de MPO de neutrófilos no sangue periférico em diferentes pontos de tempo em comparação com H0 (armazenado a 4°C e à temperatura ambiente);
3. reprodutibilidade interlaboratorial para medida de RCV intraindividual da expressão de MPO de neutrófilos no sangue periférico;
4. o valor preditivo negativo para medição de RCV intraindividual da expressão de MPO de neutrófilos no sangue periférico (com um limiar pré-especificado de 30,0%) na exclusão de SMD em pacientes adultos consecutivos.

O projeto MPO-MDS-Develop é um estudo multicêntrico, transversal e de precisão diagnóstica de um teste índice por comparação com um padrão de referência, em pacientes consecutivos não selecionados.

Triagem: Todos os pacientes consecutivos encaminhados ao laboratório de imuno-hematologia nos locais de estudo por suspeita de MDS serão rastreados para elegibilidade. Um médico de laboratório revisará os critérios de inclusão e exclusão, usando registros médicos e laboratoriais computadorizados.

Recrutamento: Os participantes serão incluídos no estudo assim que todas as atividades de triagem forem realizadas e somente se o paciente atender a todos os critérios de inclusão e nenhum de exclusão. O consentimento para análise de citometria de fluxo de amostra de sangue periférico e coleta de dados por meio de revisão de prontuário será solicitado em regime de "não oposição" (opt-out): após a entrega de informações escritas apropriadas, dados transversais serão coletados, exceto em caso de oposição do paciente. Todos os pacientes incluídos no estudo receberão um número de identificação de paciente exclusivo. Este número será usado para identificar o paciente durante todo o estudo.

Teste de índice: A análise por citometria de fluxo da expressão da mieloperoxidase neutrofílica no sangue periférico será realizada usando um único tubo pronto para uso com anticorpos liofilizados desenvolvido em parceria com a Becton Dickinson France SAS e cego para o padrão de referência.

Padrão de referência: O diagnóstico de SMD será estabelecido de acordo com a classificação da Organização Mundial da Saúde (OMS), baseado em dados clínicos, citopenia de sangue periférico, citomorfologia de sangue periférico e aspirado de medula óssea e análise citogenética. Os critérios para o diagnóstico de SMD são 1) a presença de ≥10% de células displásicas em qualquer linhagem hematopoiética, 2) a exclusão de leucemia mielóide aguda (definida pela presença de ≥20% de sangue periférico ou blastos de medula óssea) e 3) a exclusão de etiologias reativas de displasia. A citopenia é definida pela concentração de hemoglobina <10 g/dL, contagem de plaquetas <100x109/L e/ou contagem absoluta de neutrófilos <1,8 x109/L. No entanto, um diagnóstico de SMD pode ser feito com níveis mais leves de citopenia. A citopenia idiopática de significado incerto (ICUS) é definida por citopenia persistente leve inexplicável por pelo menos 6 meses e a falha em estabelecer o diagnóstico de SMD de acordo com as diretrizes publicadas. De acordo com a classificação da OMS, a subcategorização da SMD dependerá do grau de displasia (unilinhagem versus multilinhagem), porcentagens de blastos, presença de sideroblastos em anel e análise citogenética (del(5q)). Os critérios para o diagnóstico de LMMC são 1) a presença de monocitose persistente no sangue periférico ≥1 x109/L e 2) monócitos representando mais de 10% da contagem diferencial de glóbulos brancos. A avaliação da citomorfologia da medula óssea será realizada prospectivamente por hematopatologistas experientes que não têm conhecimento dos resultados do teste índice.

Pacientes com suspeita confirmada de SMD: Os participantes para os quais o diagnóstico de SMD (ou CMML) é confirmado pelo padrão de referência serão categorizados como pacientes com suspeita confirmada de SMD.

Pacientes com suspeita não confirmada de SMD: Os participantes para os quais o diagnóstico de SMD (ou CMML) é descartado pelo padrão de referência serão categorizados como pacientes com suspeita não confirmada de SMD. Este último subgrupo incluirá pacientes com ICUS, conforme definido de acordo com as diretrizes publicadas.

Acompanhamento: Nenhuma visita de acompanhamento está planejada neste estudo transversal de precisão diagnóstica.