Ontwikkeling en prospectieve validatie van een gestandaardiseerde flowcytometrische test van perifere bloedneutrofielen myeloperoxidase-expressie voor het uitsluiten van myelodysplastische syndromen. (MPO-MDS-Develp)

Het primaire doel van MPO-MDS-ontwikkelingsonderzoek is het schatten van de discriminerende nauwkeurigheid (d.w.z. gebied onder de ROC-curve samen met 95% BI) van een gestandaardiseerde en semi-automatische flowcytometrische assay van MPO-expressie van neutrofielen in perifeer bloed voor de diagnose van MDS bij volwassen patiënten.

De secundaire doelstellingen zijn het beoordelen van:

1. intralaboratoriumreproduceerbaarheid (intra- en inter-assayprecisie) voor intra-individuele RCV-meting van MPO-expressie van neutrofielen in perifeer bloed;
2. monsterstabiliteit voor intra-individuele RCV-meting van MPO-expressie van neutrofielen in perifeer bloed op verschillende tijdstippen in vergelijking met H0 (bewaard bij 4°C en bij kamertemperatuur);
3. interlaboratoriumreproduceerbaarheid voor intra-individuele RCV-meting van MPO-expressie van neutrofielen in perifeer bloed;
4. de negatief voorspellende waarde voor intra-individuele RCV-meting van MPO-expressie van neutrofielen in perifeer bloed (met een vooraf gespecificeerde drempel van 30,0%) bij het uitsluiten van MDS bij opeenvolgende volwassen patiënten.

Het MPO-MDS-Develop-project is een multicenter, cross-sectionele, diagnostische nauwkeurigheidsstudie van een indextest in vergelijking met een referentiestandaard, bij niet-geselecteerde opeenvolgende patiënten.

Screening: Alle opeenvolgende patiënten die naar het immunohematologielaboratorium op de onderzoekslocaties zijn verwezen wegens verdenking van MDS, zullen worden gescreend op geschiktheid. Een laboratoriumarts beoordeelt de opname- en uitsluitingscriteria, met behulp van geautomatiseerde medische en laboratoriumdossiers.

Werving: Deelnemers worden in het onderzoek opgenomen zodra alle screeningactiviteiten zijn uitgevoerd en alleen als de patiënt aan alle inclusie- en geen exclusiecriteria voldoet. De toestemming voor flowcytometrie-analyse van perifeer bloedmonster en gegevensverzameling door kaartbeoordeling zal worden gevraagd onder een regime van "niet-oppositie" (opt-out): nadat de juiste schriftelijke informatie is verstrekt, zullen transversale gegevens worden verzameld, behalve in geval van verzet van de patiënt. Alle patiënten die in de studie zijn opgenomen, krijgen een uniek patiëntidentificatienummer toegewezen. Dit nummer zal tijdens het onderzoek worden gebruikt om de patiënt te identificeren.

Indextest: Flowcytometrie-analyse van neutrofiele myeloperoxidase-expressie in perifeer bloed zal worden uitgevoerd met behulp van een enkele gebruiksklare buis met gelyofiliseerde antilichamen, ontwikkeld in samenwerking met Becton Dickinson France SAS en geblindeerd voor de referentiestandaard.

Referentiestandaard: De diagnose van MDS zal worden vastgesteld volgens de classificatie van de Wereldgezondheidsorganisatie (WHO), op basis van klinische gegevens, perifere bloedcytopenie, cytomorfologie van perifeer bloed en beenmergaspiraat en cytogenetische analyse. De criteria voor MDS-diagnose zijn 1) de aanwezigheid van ≥10% dysplastische cellen in elke hematopoietische lijn, 2) de uitsluiting van acute myeloïde leukemie (gedefinieerd door de aanwezigheid van ≥20% perifere bloed- of beenmergblasten), en 3) de uitsluiting van reactieve etiologieën van dysplasie. Cytopenie wordt gedefinieerd door hemoglobineconcentratie <10 g/dl, aantal bloedplaatjes <100x109/l en/of absoluut aantal neutrofielen <1,8 x109/l. Toch zou een diagnose van MDS kunnen worden gesteld met mildere niveaus van cytopenie. Idiopathische cytopenie van onzekere significantie (ICUS) wordt gedefinieerd door onverklaarde milde aanhoudende cytopenie gedurende ten minste 6 maanden en het niet kunnen stellen van de diagnose MDS volgens gepubliceerde richtlijnen. In overeenstemming met de WHO-classificatie zal MDS-subcategorisering afhangen van de mate van dysplasie (unilineage versus multilineage), blastpercentages, aanwezigheid van ringsideroblasten en cytogenetische analyse (del(5q)). De criteria voor CMML-diagnose zijn 1) de aanwezigheid van aanhoudende perifere bloedmonocytose ≥1 x109/L, en 2) monocyten die meer dan 10% van het aantal witte bloedcellen uitmaken. De evaluatie van de cytomorfologie van het beenmerg zal prospectief worden uitgevoerd door ervaren hematopathologen die blind zijn voor de resultaten van de indextest.

Patiënten met bevestigd vermoeden van MDS: Deelnemers bij wie de diagnose MDS (of CMML) wordt bevestigd door de referentiestandaard, worden gecategoriseerd als patiënten met bevestigd vermoeden van MDS.

Patiënten met onbevestigde verdenking op MDS: Deelnemers bij wie de diagnose MDS (of CMML) door de referentiestandaard wordt uitgesloten, worden gecategoriseerd als patiënten met onbevestigde verdenking op MDS. Deze laatste subgroep omvat patiënten met ICUS, zoals gedefinieerd in overeenstemming met gepubliceerde richtlijnen.

Follow-up: Er is geen vervolgbezoek gepland in dit transversale onderzoek naar diagnostische nauwkeurigheid.