Účinek exogenního glukagonu podobného peptidu 2 na cholecystokininem indukované vyprazdňování žlučníku

Pozadí

CÍL STUDIE Cílem studie je zjistit, zda exogenní GLP-2 může potlačit kontrakci žlučníku vyvolanou CCK

NÁVRH STUDIE Studie je randomizovaná, dvojitě zaslepená, placebem kontrolovaná zkřížená studie zahrnující 15 zdravých účastníků. Každý účastník absolvuje čtyři samostatné studijní dny v náhodném pořadí. Každý den studie zahrnuje dvě intravenózní (iv) infuze, jednu s CCK (0,4 pmol × kg^-1 × min^-1) nebo placebo (fyziologický roztok) a jednu s GLP-2 (10 pmol × kg^-1 × min ^-1) nebo placebo (fyziologický roztok): den A, CCK + GLP-2; den B, CCK + placebo; den C, placebo + GLP-2; Den D, placebo + placebo.

METODY Pro každého účastníka se studie skládá z informační návštěvy, screeningové návštěvy a čtyř experimentálních dnů v časovém období minimálně 2 měsíců a s minimálně třemi dny mezi každým experimentálním dnem s postupy vysvětlenými níže.

NÁBOR ÚČASTNÍKŮ Telefonicky nebo e-mailem budou kontaktováni příslušné osoby, které se již dříve účastnily zkoušek ve výzkumném zařízení řešitelů a v té době souhlasily s opětovným kontaktováním ohledně dalších výzkumných projektů. Případně budou inzeráty týkající se projektu zveřejněny na www.forsoegsperson.dk, další relevantní internetové stránky / stránky sociálních médií a/nebo místní nebo celostátní noviny. Osoby, které odpoví kladně, obdrží písemnou informaci. Několik dní po obdržení písemné informace bude potenciální účastník kontaktován a v případě, že má stále zájem o účast, bude sjednána informační návštěva. Pokud se osoba rozhodne zúčastnit se, bude získán písemný souhlas. Získání písemného souhlasu bude odloženo, bude-li potenciální účastník potřebovat více času na zvážení. Po získání písemného souhlasu je naplánován termín screeningové návštěvy.

EXPERIMENTÁLNÍ DNY Všechny experimenty se provádějí ve výzkumném zařízení výzkumníků v Centru klinického metabolického výzkumu v nemocnici Gentofte, kde je k dispozici veškeré potřebné vybavení a odborné znalosti. Pokud mají účastníci nějaké pokračující lékařské ošetření, bude účastník informován, aby přerušil léčbu jeden týden před každým experimentálním dnem. Délka každého experimentálního dne bude přibližně 5 hodin.

Po příjezdu do výzkumného zařízení po celonočním (10h) půstu (včetně vody, kávy a léků) bude účastník požádán, aby vyprázdnil močový měchýř a odeberou se dva vzorky moči. Poté budou do kubitálních žil zavedeny dva intravenózní (iv) katétry (jeden do každé paže). Jeden pro odběr vzorků krve a jeden pro podávání CCK/placeba a GLP-2/placeba. Předloktí, ze kterého se odebírají vzorky krve, bude po celou dobu experimentu zabaleno do vyhřívací podložky (40-45 °C) pro arterializaci žilní krve. Účastník si odpočine přibližně 30 minut před zahájením experimentálních procedur. V čase 0 min bude zahájena infuze CCK/placeba. V čase 30 minut bude zahájena infuze GLP-2/placebo. V čase -15, 0, 15, 30, 45, 60, 75, 90, 105, 120, 150, 180, 195, 210 a 240 min se výška, šířka a délka žlučníku určí pomocí ultrasonografických skenů pro hodnocení žlučníku objem (vypočteno elipsoidní metodou). Vzorky krve budou odebírány v čase -15, 0, 10, 30, 40, 50, 70, 100, 140, 180, 210 a 240 min. Krevní tlak a srdeční frekvence budou měřeny v čase -15, 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180 a 240 min. Chuť účastníků bude hodnocena pomocí vizuální analogové škály (VAS) v čase -15, 0, 15, 45, 75, 105, 135, 180, 210 a 240 min. V čase 180 min bude infuze CCK/placeba zastavena. V čase 240 min bude infuze GLP-2/placeba zastavena. Ve 240 minutách dostanou účastníci standardizované ad libitum jídlo skládající se z mletého masa, těstovin, kukuřice, mrkve, papriky, smetany a soli a pepře. Účastníci jsou instruováni, aby jedli co nejvíce, dokud se nebudou cítit pohodlně sytí. Jídlo je nutné zkonzumovat do 30 minut a před a po vyhodnocení chuti účastníků VAS. Po jídle bude účastník opět vyzván k vyprázdnění močového měchýře a budou odebrány dva vzorky moči.

Údaje ze dnů studie budou zaznamenány ve formulářích klinické zprávy.

LABORATORNÍ METODY Pro měření plazmatické glukózy u lůžka bude krev odebírána do zkumavek potažených fluoridem sodným, ihned centrifugována při pokojové teplotě a analyzována na analyzátoru glukózy. Pro analýzu plazmatických koncentrací hormonů pocházejících ze střeva degradovaných DPP-4 bude krev odebírána do chlazených zkumavek (na ledu) obsahujících EDTA a specifický inhibitor DPP-4 valin-pyrrolidid (0,01 ml 1 mmol/l roztoku valin-pyrrolididu - 4,3 mg ve 20 ml sterilní vody/ml krve). Pro analýzu sérových koncentrací dalších sekundárních koncových bodů se odebere krev v prostých zkumavkách s aktivátorem sraženiny pro koagulaci (10 minut při pokojové teplotě). EDTA a obyčejné zkumavky budou centrifugovány po dobu 15 minut a 4 °C. Vzorky plazmy/séra budou až do analýzy skladovány při -20 °C nebo -80 °C.

STATISTIKA A VÝPOČTY Data budou zpracována a prezentována s využitím standardní popisné statistiky. Plocha pod křivkou (AUC) bude vypočítána pomocí lichoběžníkového pravidla. Výsledky budou uvedeny jako průměr a standardní odchylka (SD) a jako základní hodnota odečtená AUC (bsAUC). Normálně rozložená data budou porovnána pomocí jednosměrné analýzy rozptylu opakovaných měření. Analýza rozptylu opakovaných měření bude použita pro statistickou analýzu opakovaných měření u stejného účastníka. Data, která nejsou normálně distribuována, budou analyzována pomocí neparametrických testů. Za statisticky významné budou považovány hodnoty P <0,05, tj. hladina významnosti (α) 5 %. Síla studie (1-β) je nastavena na 80 %, kde β (20 %) je riziko přijetí hypotézy, která je nepravdivá.

Velikost populace (N) byla vypočtena pomocí vzorce:

N = (Za + Zb)^2 × (SD^2)/(MIREDIF^2), kde Za je tabulková hodnota podle oboustranného standardního normálního rozdělení (1,96), Zb je tabulková hodnota podle jedničky -stranné standardní normální rozdělení (0,84). MIREDIF je minimální relevantní rozdíl. SD a MIREDIF jsou hodnoceny jako bsAUC pro objem žlučníku.

Vyšetřovatelé plánují zapsat 15 účastníků. V předchozí studii s CCK-indukovaným vyprazdňováním žlučníku byla bsAUC (0-120) pro objem žlučníku -1791 ml × min a SD 795,2 ml × min. Na základě těchto hodnot lze detekovat 30% rozdíl v bsAUC pro objem žlučníku.