O efeito do peptídeo 2 semelhante ao glucagon exógeno no esvaziamento da vesícula biliar induzido por colecistoquinina

Fundo

OBJETIVO DO ESTUDO O objetivo do estudo é investigar se o GLP-2 exógeno pode anular a contração da vesícula biliar induzida por CCK

DESENHO DO ESTUDO O estudo é um estudo cruzado randomizado, duplo-cego, controlado por placebo, envolvendo 15 participantes saudáveis. Cada participante passará por quatro dias de estudo separados em ordem aleatória. Cada dia de estudo abrange duas infusões intravenosas (iv), uma com CCK (0,4 pmol × kg^-1 × min^-1) ou placebo (solução salina) e uma com GLP-2 (10 pmol × kg^-1 × min ^-1) ou placebo (solução salina): Dia A, CCK + GLP-2; Dia B, CCK + placebo; Dia C, placebo + GLP-2; Dia D, placebo + placebo.

MÉTODOS Para cada participante, o estudo consiste em uma visita de informação, uma visita de triagem e quatro dias experimentais dentro de um período mínimo de 2 meses, e com um mínimo de três dias entre cada dia experimental com os procedimentos explicados abaixo.

RECRUTAMENTO DE PARTICIPANTES Pessoas relevantes, que tenham participado anteriormente em ensaios nas instalações de pesquisa dos investigadores e naquele momento aceitaram ser contatadas novamente em relação a outros projetos de pesquisa, serão contatadas por telefone ou e-mail. Alternativamente, anúncios sobre o projeto serão publicados em www.forsoegsperson.dk, outras páginas relevantes da internet/mídia social e/ou jornais locais ou nacionais. As pessoas que responderem positivamente receberão as informações por escrito. Alguns dias após receber a informação por escrito, o potencial participante será contactado e, se ainda estiver interessado em participar, será marcada uma visita de informação. Se a pessoa decidir participar, será obtido consentimento por escrito. A obtenção do consentimento por escrito será adiada se o potencial participante exigir mais tempo para consideração. Depois de obter o consentimento por escrito, a data da visita de triagem é planejada.

DIAS EXPERIMENTAIS Todos os experimentos são realizados nas instalações de pesquisa dos investigadores no Centro de Pesquisa Metabólica Clínica do Hospital Gentofte, onde todos os equipamentos e experiência necessários estão disponíveis. Se os participantes tiverem algum tratamento médico em andamento, o participante será informado para interromper o tratamento uma semana antes de cada dia experimental. A duração de cada dia experimental será de aproximadamente 5 horas.

Após chegar ao local da pesquisa após jejum noturno (10h) (incluindo água, café e remédios), será solicitado ao participante que esvazie a bexiga urinária e serão coletadas duas amostras de urina. Dois cateteres intravenosos (iv) serão então inseridos nas veias cubitais (um em cada braço). Um para coleta de amostras de sangue e outro para administração de CCK/placebo e GLP-2/placebo. O antebraço do qual as amostras de sangue são coletadas será envolvido em uma almofada de aquecimento (40-45°C) durante todo o experimento para arterialização do sangue venoso. O participante descansará aproximadamente 30 minutos antes do início dos procedimentos experimentais. No tempo 0 min, a infusão de CCK/placebo será iniciada. No tempo 30 min, a infusão de GLP-2/placebo será iniciada. Nos tempos -15, 0, 15, 30, 45, 60, 75, 90, 105, 120, 150, 180, 195, 210 e 240 min, a altura, largura e comprimento da vesícula serão determinados por ultrassonografias para avaliação da vesícula biliar volume (calculado pelo método do elipsóide). Amostras de sangue serão coletadas nos tempos -15, 0, 10, 30, 40, 50, 70, 100, 140, 180, 210 e 240 min. A pressão arterial e a frequência cardíaca serão medidas nos tempos -15, 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180 e 240 min. O apetite dos participantes será avaliado pela Escala Visual Analógica (EVA) nos tempos -15, 0, 15, 45, 75, 105, 135, 180, 210 e 240 min. No tempo 180 min, a infusão de CCK/placebo será interrompida. No tempo 240 min, a infusão de GLP-2/placebo será interrompida. Aos 240 min, os participantes recebem uma refeição padronizada ad libitum composta por carne moída, macarrão, milho, cenoura, pimentão, creme de leite e sal e pimenta. Os participantes são instruídos a comer o máximo que puderem até se sentirem confortavelmente cheios. A refeição deverá ser consumida em até 30 minutos, sendo que antes e depois o apetite dos participantes será avaliado pela EVA. Após a refeição será solicitado novamente ao participante que esvazie a bexiga urinária e serão coletadas duas amostras de urina.

Os dados dos dias de estudo serão registrados em Formulários de Relatórios Clínicos.

MÉTODOS LABORATORIAIS Para medição de glicose plasmática à beira do leito, o sangue será coletado em tubos revestidos com fluoreto de sódio, centrifugado imediatamente à temperatura ambiente e analisado em um analisador de glicose. Para análise das concentrações plasmáticas de hormônios derivados do intestino degradados por DPP-4, o sangue será coletado em tubos refrigerados (no gelo) contendo EDTA e o inibidor específico de DPP-4 valina-pirrolida (0,01 ml de solução de valina-pirrolida 1 mmol/l - 4,3 mg em 20 ml de água estéril/ml de sangue). Para análise das concentrações séricas de outros desfechos secundários, o sangue será coletado em tubos simples com ativador de coágulo para coagulação (10 minutos em temperatura ambiente). Os tubos de EDTA e simples serão centrifugados por 15 minutos e 4°C. As amostras de plasma/soro serão armazenadas a -20°C ou -80°C até serem analisadas.

ESTATÍSTICAS E CÁLCULOS Os dados serão processados ​​e apresentados com o uso de estatísticas descritivas padrão. A área sob a curva (AUC) será calculada usando a regra do trapézio. Os resultados serão relatados como média e desvio padrão (SD) e como linha de base subtraída AUC (bsAUC). Dados normalmente distribuídos serão comparados usando análise de variância de medições repetidas unidirecionais. A análise de variância de medidas repetidas será usada para análise estatística de medidas repetidas no mesmo participante. Os dados que não são normalmente distribuídos serão analisados ​​por meio de testes não paramétricos. Valores de p < 0,05 serão considerados estatisticamente significativos, ou seja, nível de significância (α) de 5%. O poder do estudo (1-β) é definido como 80%, onde β (20%) é o risco de aceitar uma hipótese falsa.

O tamanho da população (N) foi calculado usando a fórmula:

N = (Za + Zb)^2 × (SD^2)/(MIREDIF^2), onde Za é um valor de tabela de acordo com uma distribuição normal padrão bilateral (1,96), Zb é um valor de tabela de acordo com um distribuição normal padrão de dois lados (0,84). MIREDIF é a diferença mínima relevante. SD e MIREDIF são avaliados como bsAUC para o volume da vesícula biliar.

Os investigadores planejam inscrever 15 participantes. Em um estudo anterior com esvaziamento da vesícula biliar induzido por CCK bsAUC (0-120) para o volume da vesícula biliar foi -1791 ml × min e SD 795,2 ml × min. Com base nesses valores, pode ser detectada uma diferença de 30% em bsAUC para o volume da vesícula biliar.