Влияние экзогенного глюкагоноподобного пептида 2 на холецистокинин-индуцированное опорожнение желчного пузыря

Фон

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ Целью исследования является изучение того, может ли экзогенный ГПП-2 преобладать над сокращением желчного пузыря, вызванным ХЦК.

ДИЗАЙН ИССЛЕДОВАНИЯ Исследование представляет собой рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое перекрестное исследование с участием 15 здоровых участников. Каждый участник будет проходить четыре отдельных учебных дня в рандомизированном порядке. Каждый день исследования включает две внутривенные (в/в) инфузии, одну с CCK (0,4 пмоль × кг^-1 × мин^-1) или плацебо (физиологический раствор) и одну с GLP-2 (10 пмоль × кг^-1 × мин). ^-1) или плацебо (физиологический раствор): день А, CCK + GLP-2; День B, CCK + плацебо; День C, плацебо + GLP-2; День D, плацебо + плацебо.

МЕТОДЫ Для каждого участника исследование состоит из информационного визита, визита для скрининга и четырех экспериментальных дней в течение периода времени не менее 2 месяцев и с минимум тремя днями между каждым экспериментальным днем ​​с процедурами, описанными ниже.

НАБОР УЧАСТНИКОВ С соответствующими лицами, которые ранее участвовали в испытаниях в исследовательском центре исследователей и в то время согласились снова связаться с ними по поводу других исследовательских проектов, свяжутся по телефону или электронной почте. В качестве альтернативы рекламные объявления о проекте будут опубликованы на www.forsoegsperson.dk, другие соответствующие страницы в Интернете / социальных сетях и / или местные или национальные газеты. Лица, давшие положительный ответ, получат письменную информацию. Через пару дней после получения письменной информации с потенциальным участником свяжутся и, если человек все еще заинтересован в участии, будет организован информационный визит. Если человек решит участвовать, будет получено письменное согласие. Получение письменного согласия будет отложено, если потенциальному участнику потребуется больше времени для рассмотрения. После получения письменного согласия назначается дата визита для скрининга.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ДНИ Все эксперименты проводятся в исследовательском центре Центра клинических метаболических исследований в больнице Гентофте, где имеется все необходимое оборудование и специалисты. Если участники проходят какое-либо текущее лечение, участник будет проинформирован о приостановке лечения за одну неделю до каждого экспериментального дня. Продолжительность каждого экспериментального дня составит примерно 5 часов.

По прибытии в исследовательский центр после ночного (10-часового) голодания (включая воду, кофе и лекарства) участника попросят опорожнить мочевой пузырь и взять два образца мочи. Затем в локтевые вены будут вставлены два внутривенных (в/в) катетера (по одному на каждую руку). Один для сбора образцов крови и один для введения CCK/плацебо и GLP-2/плацебо. Предплечье, из которого берутся образцы крови, будет завернуто в грелку (40-45°C) на протяжении всего эксперимента для артериализации венозной крови. Участник будет отдыхать примерно за 30 минут до начала экспериментальных процедур. В момент времени 0 минут будет начата инфузия CCK/плацебо. В момент времени 30 мин будет начата инфузия GLP-2/плацебо. Во время -15, 0, 15, 30, 45, 60, 75, 90, 105, 120, 150, 180, 195, 210 и 240 минут высота, ширина и длина желчного пузыря будут определяться с помощью ультразвукового сканирования для оценки желчного пузыря. объем (рассчитывается методом эллипсоидов). Образцы крови будут собираться во время -15, 0, 10, 30, 40, 50, 70, 100, 140, 180, 210 и 240 минут. Артериальное давление и частота сердечных сокращений будут измеряться в моменты времени -15, 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180 и 240 мин. Аппетит участников будет оцениваться по визуальной аналоговой шкале (ВАШ) в моменты времени -15, 0, 15, 45, 75, 105, 135, 180, 210 и 240 мин. В момент времени 180 мин инфузия CCK/плацебо будет остановлена. В момент времени 240 мин инфузия GLP-2/плацебо будет остановлена. В 240 минут участники получают стандартную еду ad libitum, состоящую из мясного фарша, макарон, кукурузы, моркови, перца, сливок, соли и перца. Участников просят есть столько, сколько они могут, пока не почувствуют себя комфортно. Еда должна быть употреблена в течение 30 минут, а до и после аппетит участников будет оцениваться с помощью VAS. После еды участника снова попросят опорожнить мочевой пузырь и возьмут два образца мочи.

Данные за дни исследования будут записаны в формах клинического отчета.

ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ Для измерения уровня глюкозы в плазме у постели больного кровь берут в пробирки, покрытые фторидом натрия, немедленно центрифугируют при комнатной температуре и анализируют на анализаторе глюкозы. Для анализа концентраций кишечных гормонов в плазме крови, расщепленных ДПП-4, кровь будет собираться в охлажденные пробирки (на льду), содержащие ЭДТА и специфический ингибитор ДПП-4 валин-пирролид (0,01 мл 1 ммоль/л раствора валин-пирролидида). - 4,3 мг в 20 мл стерильной воды/мл крови). Для анализа сывороточных концентраций других вторичных конечных точек кровь берут в простые пробирки с активатором свертывания для коагуляции (10 минут при комнатной температуре). Пробирки с ЭДТА и обычные пробирки центрифугируют в течение 15 минут при 4°C. Образцы плазмы/сыворотки будут храниться при температуре -20°C или -80°C до проведения анализа.

СТАТИСТИКА И РАСЧЕТЫ Данные будут обработаны и представлены с использованием стандартной описательной статистики. Площадь под кривой (AUC) рассчитывается по правилу трапеций. Результаты будут представлены как среднее значение и стандартное отклонение (SD), а также как базовая вычтенная AUC (bsAUC). Нормально распределенные данные будут сравниваться с использованием дисперсионного анализа односторонних повторных измерений. Дисперсионный анализ повторных измерений будет использоваться для статистического анализа повторных измерений у одного и того же участника. Данные, которые не имеют нормального распределения, будут проанализированы с использованием непараметрических тестов. Значения P <0,05 будут считаться статистически значимыми, т.е. уровень значимости (α) 5%. Мощность исследования (1-β) установлена ​​равной 80%, где β (20%) — это риск принятия ложной гипотезы.

Численность населения (N) рассчитывалась по формуле:

N = (Za + Zb)^2 × (SD^2)/(MIREDIF^2), где Za — табличное значение по двустороннему стандартному нормальному распределению (1.96), Zb — табличное значение по двустороннее стандартное нормальное распределение (0,84). MIREDIF – это минимальная релевантная разница. SD и MIREDIF оцениваются как bsAUC для объема желчного пузыря.

Исследователи планируют зарегистрировать 15 участников. В предыдущем исследовании с опорожнением желчного пузыря, вызванным CCK, bsAUC (0-120) для объема желчного пузыря составляло -1791 мл × мин и SD 795,2 мл × мин. На основании этих значений можно обнаружить 30%-ную разницу в bsAUC для объема желчного пузыря.