Die Wirkung von exogenem Glucagon-ähnlichem Peptid 2 auf die Cholecystokinin-induzierte Gallenblasenentleerung

Hintergrund

ZIEL DER STUDIE Ziel der Studie ist es zu untersuchen, ob exogenes GLP-2 die CCK-induzierte Gallenblasenkontraktion aufheben kann

STUDIENDESIGN Die Studie ist eine randomisierte, doppelblinde, placebokontrollierte Crossover-Studie mit 15 gesunden Teilnehmern. Jeder Teilnehmer durchläuft vier separate Studientage in randomisierter Reihenfolge. Jeder Studientag umfasst zwei intravenöse (iv) Infusionen, eine mit CCK (0,4 pmol × kg^-1 × min^-1) oder Placebo (Kochsalzlösung) und eine mit GLP-2 (10 pmol × kg^-1 × min ^-1) oder Placebo (Kochsalzlösung): Tag A, CCK + GLP-2; Tag B, CCK + Placebo; Tag C, Placebo + GLP-2; Tag D, Placebo + Placebo.

METHODEN Für jeden Teilnehmer besteht die Studie aus einem Informationsbesuch, einem Screening-Besuch und vier Versuchstagen innerhalb eines Zeitraums von mindestens 2 Monaten und mit mindestens drei Tagen zwischen jedem Versuchstag mit den unten erläuterten Verfahren.

REKRUTIERUNG VON TEILNEHMERN Relevante Personen, die zuvor an Studien in der Forschungseinrichtung des Prüfers teilgenommen haben und zu diesem Zeitpunkt akzeptiert haben, bezüglich anderer Forschungsprojekte erneut kontaktiert zu werden, werden telefonisch oder per E-Mail kontaktiert. Alternativ werden Anzeigen zum Projekt auf www.forsoegsperson.dk veröffentlicht, andere relevante Internet-/Social-Media-Seiten und/oder lokale oder nationale Zeitungen. Positiv reagierende Personen erhalten die schriftliche Information. Ein paar Tage nach Erhalt der schriftlichen Informationen wird der potenzielle Teilnehmer kontaktiert und, wenn die Person weiterhin an einer Teilnahme interessiert ist, ein Informationsbesuch vereinbart. Wenn sich die Person zur Teilnahme entscheidet, wird eine schriftliche Zustimmung eingeholt. Die Einholung der schriftlichen Zustimmung wird verschoben, wenn der potenzielle Teilnehmer mehr Bedenkzeit benötigt. Nach Einholung des schriftlichen Einverständnisses wird der Termin für den Screening-Besuch geplant.

EXPERIMENTELLE TAGE Alle Experimente werden in der Forschungseinrichtung der Prüfärzte im Zentrum für klinische Stoffwechselforschung des Gentofte-Krankenhauses durchgeführt, wo alle erforderlichen Geräte und Fachkenntnisse zur Verfügung stehen. Wenn sich die Teilnehmer einer laufenden medizinischen Behandlung unterziehen, werden die Teilnehmer eine Woche vor jedem Versuchstag darüber informiert, die Behandlung zu unterbrechen. Die Dauer jedes Versuchstages beträgt etwa 5 Stunden.

Nach der Ankunft in der Forschungseinrichtung nach einer nächtlichen Fastenzeit (10 Stunden) (einschließlich Wasser, Kaffee und Medizin) wird der Teilnehmer gebeten, die Harnblase zu entleeren, und es werden zwei Urinproben entnommen. Dann werden zwei intravenöse (iv) Katheter in die Kubitalvenen eingeführt (einer in jedem Arm). Eine zur Entnahme von Blutproben und eine zur Verabreichung von CCK/Placebo und GLP-2/Placebo. Der Unterarm, aus dem Blutproben entnommen werden, wird während des Experiments zur Arterialisierung des venösen Blutes in ein Heizkissen (40-45°C) gewickelt. Der Teilnehmer ruht sich ungefähr 30 Minuten vor Beginn der experimentellen Verfahren aus. Zum Zeitpunkt 0 min wird mit der CCK/Placebo-Infusion begonnen. Zum Zeitpunkt 30 min wird die GLP-2/Placebo-Infusion gestartet. Zum Zeitpunkt -15, 0, 15, 30, 45, 60, 75, 90, 105, 120, 150, 180, 195, 210 und 240 min werden Höhe, Breite und Länge der Gallenblase durch Ultraschalluntersuchungen zur Beurteilung der Gallenblase bestimmt Volumen (berechnet nach der Ellipsoidmethode). Blutproben werden zum Zeitpunkt -15, 0, 10, 30, 40, 50, 70, 100, 140, 180, 210 und 240 Minuten entnommen. Blutdruck und Herzfrequenz werden zum Zeitpunkt -15, 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180 und 240 min gemessen. Der Appetit der Teilnehmer wird durch die visuelle Analogskala (VAS) zum Zeitpunkt -15, 0, 15, 45, 75, 105, 135, 180, 210 und 240 min bewertet. Zum Zeitpunkt 180 min wird die CCK/Placebo-Infusion gestoppt. Zum Zeitpunkt 240 min wird die GLP-2/Placebo-Infusion gestoppt. Bei 240 min erhalten die Teilnehmer eine standardisierte Mahlzeit ad libitum, bestehend aus Hackfleisch, Nudeln, Mais, Karotten, Paprika, Sahne sowie Salz und Pfeffer. Die Teilnehmer werden angewiesen, so viel wie möglich zu essen, bis sie sich angenehm satt fühlen. Die Mahlzeit ist innerhalb von 30 Minuten zu verzehren, davor und danach wird der Appetit der Teilnehmer von VAS bewertet. Nach dem Essen wird der Teilnehmer erneut aufgefordert, die Harnblase zu entleeren und es werden zwei Urinproben entnommen.

Die Daten der Studientage werden in Clinical Report Forms erfasst.

LABORVERFAHREN Zur bettseitigen Messung der Plasmaglukose wird Blut in mit Natriumfluorid beschichtete Röhrchen entnommen, sofort bei Raumtemperatur zentrifugiert und auf einem Glukoseanalysator analysiert. Zur Analyse der Plasmakonzentrationen von Hormonen aus dem Darm, die durch DPP-4 abgebaut werden, wird Blut in gekühlten Röhrchen (auf Eis) gesammelt, die EDTA und den spezifischen DPP-4-Inhibitor Valin-Pyrrolidid (0,01 ml einer 1 mmol/l Valin-Pyrrolidid-Lösung) enthalten - 4,3 mg in 20 ml sterilem Wasser/ml Blut). Zur Analyse der Serumkonzentrationen anderer sekundärer Endpunkte wird Blut in einfachen Röhrchen mit Gerinnungsaktivator zur Gerinnung entnommen (10 Minuten bei Raumtemperatur). EDTA- und Normalröhrchen werden 15 Minuten lang bei 4 °C zentrifugiert. Plasma-/Serumproben werden bis zur Analyse bei -20 °C oder -80 °C gelagert.

STATISTIKEN UND BERECHNUNGEN Die Daten werden unter Verwendung von deskriptiven Standardstatistiken verarbeitet und präsentiert. Die Fläche unter der Kurve (AUC) wird mithilfe der Trapezregel berechnet. Die Ergebnisse werden als Mittelwert und Standardabweichung (SD) und als vom Ausgangswert abgezogene AUC (bsAUC) angegeben. Normalverteilte Daten werden unter Verwendung einer Varianzanalyse mit wiederholten Messungen in einer Richtung verglichen. Die Varianzanalyse wiederholter Messungen wird für die statistische Analyse wiederholter Messungen bei demselben Teilnehmer verwendet. Daten, die nicht normalverteilt sind, werden mit nichtparametrischen Tests analysiert. P-Werte < 0,05 werden als statistisch signifikant betrachtet, d. h. Signifikanzniveau (α) von 5 %. Die Aussagekraft der Studie (1-β) wird auf 80 % festgelegt, wobei β (20 %) das Risiko darstellt, eine falsche Hypothese zu akzeptieren.

Die Populationsgröße (N) wurde mit folgender Formel berechnet:

N = (Za + Zb)^2 × (SD^2)/(MIREDIF^2), wobei Za ein Tabellenwert gemäß einer zweiseitigen Standardnormalverteilung (1,96), Zb ein Tabellenwert gemäß einer Eins ist -seitige Standardnormalverteilung (0,84). MIREDIF ist die relevante Mindestdifferenz. SD und MIREDIF werden als bsAUC für das Gallenblasenvolumen bewertet.

Die Ermittler planen, 15 Teilnehmer einzuschreiben. In einer früheren Studie mit CCK-induzierter Gallenblasenentleerung betrug die bsAUC (0–120) für das Gallenblasenvolumen –1791 ml × min und SD 795,2 ml × min. Basierend auf diesen Werten kann ein Unterschied von 30 % in der bsAUC für das Gallenblasenvolumen festgestellt werden.