Eksogeenisen glukagonin kaltaisen peptidin 2 vaikutus kolekystokiniinin aiheuttamaan sappirakon tyhjenemiseen

Tausta

TUTKIMUKSEN TAVOITE Tutkimuksen tavoitteena on selvittää, voiko eksogeeninen GLP-2 ohittaa CCK:n aiheuttaman sappirakon supistumisen

TUTKIMUKSEN SUUNNITTELU Tutkimus on satunnaistettu, kaksoissokkoutettu, lumekontrolloitu, risteävä tutkimus, johon osallistui 15 tervettä osallistujaa. Jokainen osallistuja käy läpi neljä erillistä opintopäivää satunnaisjärjestyksessä. Jokainen tutkimuspäivä sisältää kaksi suonensisäistä (iv) infuusiota, joista toinen CCK:lla (0,4 pmol × kg^-1 × min^-1) tai lumelääke (suolaliuos) ja toinen GLP-2:lla (10 pmol × kg^-1 × min) ^-1) tai lumelääke (suolaliuos): päivä A, CCK + GLP-2; Päivä B, CCK + lumelääke; Päivä C, plasebo + GLP-2; Päivä D, plasebo + lumelääke.

MENETELMÄT Jokaisen osallistujan osalta tutkimus koostuu tiedotuskäynnistä, seulontakäynnistä ja neljästä koepäivästä vähintään 2 kuukauden ajanjaksolla ja vähintään kolmen päivän välein kunkin koepäivän välillä alla selitetyillä menetelmillä.

OSALLISTUJIEN REKRYTOINTI Asianomaisiin henkilöihin, jotka ovat aiemmin osallistuneet tutkijoiden tutkimuslaitoksen kokeisiin ja jotka on tuolloin hyväksytty uudelleen otettavaksi yhteyttä muihin tutkimusprojekteihin, otetaan yhteyttä puhelimitse tai sähköpostitse. Vaihtoehtoisesti hanketta koskevat ilmoitukset julkaistaan ​​osoitteessa www.forsoegsperson.dk, muut asiaankuuluvat Internet-/sosiaalisen median sivut ja/tai paikalliset tai valtakunnalliset sanomalehdet. Henkilöt, jotka vastaavat myönteisesti, saavat kirjalliset tiedot. Muutaman päivän kuluttua kirjallisen tiedon vastaanottamisesta potentiaaliseen osallistujaan ollaan yhteydessä ja mikäli henkilö on edelleen kiinnostunut osallistumaan, järjestetään infokäynti. Jos henkilö päättää osallistua, hän saa kirjallisen suostumuksen. Kirjallisen suostumuksen hankkimista lykätään, jos mahdollinen osallistuja tarvitsee enemmän aikaa harkintaan. Tarkastuskäynnin päivämäärä suunnitellaan saatuaan kirjallisen suostumuksen.

KOKEEPÄIVÄT Kaikki kokeet suoritetaan Gentoften sairaalan Clinical Metabolic Research -keskuksen tutkijoiden tutkimuslaitoksessa, jossa on saatavilla kaikki tarvittavat laitteet ja asiantuntemus. Jos osallistujilla on meneillään lääkehoitoa, osallistujaa kehotetaan keskeyttämään hoito viikkoa ennen jokaista koepäivää. Kunkin koepäivän kesto on noin 5 tuntia.

Kun osallistuja on saapunut tutkimuslaitokseen yön (10 tunnin) paaston jälkeen (sisältäen veden, kahvin ja lääkkeet), häntä pyydetään tyhjentämään virtsarakko ja otetaan kaksi virtsanäytettä. Kaksi suonensisäistä (iv) katetria asetetaan sitten kynsilaskimoihin (yksi kumpaankin käsivarteen). Yksi verinäytteiden keräämistä varten ja yksi CCK/plasebo- ja GLP-2/plasebo-hoitoa varten. Kyynärvarsi, josta verinäytteitä otetaan, kääritään lämmitystyynyyn (40-45 °C) koko kokeen ajan laskimoveren arterialisaatiota varten. Osallistuja lepää noin 30 minuuttia ennen koetoimenpiteiden aloittamista. Ajankohtana 0 min CCK/plasebo-infuusio aloitetaan. 30 minuutin kohdalla GLP-2/plasebo-infuusio aloitetaan. Ajankohtana -15, 0, 15, 30, 45, 60, 75, 90, 105, 120, 150, 180, 195, 210 ja 240 min sappirakon korkeus, leveys ja pituus määritetään ultraäänitutkimuksilla sappirakon arvioimiseksi. tilavuus (laskettu ellipsoidimenetelmällä). Verinäytteet otetaan aikaisin -15, 0, 10, 30, 40, 50, 70, 100, 140, 180, 210 ja 240 min. Verenpaine ja syke mitataan ajankohtina -15, 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180 ja 240 min. Osallistujien ruokahalua arvioidaan Visual Analogue Scale (VAS) -asteikolla -15, 0, 15, 45, 75, 105, 135, 180, 210 ja 240 min. 180 minuutin kohdalla CCK/plasebo-infuusio lopetetaan. 240 minuutin kohdalla GLP-2/plasebo-infuusio lopetetaan. 240 minuutin kohdalla osallistujat saavat standardoidun ad libitum -aterian, joka sisältää jauhelihaa, pastaa, maissia, porkkanoita, paprikaa, kermaa sekä suolaa ja pippuria. Osallistujia neuvotaan syömään niin paljon kuin pystyvät, kunnes he tuntevat olonsa mukavaksi kylläisiksi. Ateria tulee nauttia 30 minuutin sisällä ja ennen ja jälkeen osallistujien ruokahalun arvioi VAS. Aterian jälkeen osallistujaa pyydetään jälleen tyhjentämään virtsarakko ja otetaan kaksi virtsanäytettä.

Tutkimuspäivien tiedot kirjataan kliinisiin raporttilomakkeisiin.

LABORATORIOMENETELMÄT Plasman glukoosin vuodemittausta varten veri otetaan natriumfluoridilla päällystettyihin putkiin, sentrifugoidaan välittömästi huoneenlämpötilassa ja analysoidaan glukoosianalysaattorilla. DPP-4:n hajottamien suolistosta peräisin olevien hormonien plasmapitoisuuksien analysointia varten veri kerätään jäähdytettyihin putkiin (jään päällä), jotka sisältävät EDTA:ta ja spesifistä DPP-4-estäjää valiinipyrrolididia (0,01 ml 1 mmol/l valiinipyrrolididiliuosta). - 4,3 mg 20 ml:ssa steriiliä vettä/ml verta). Muiden toissijaisten päätepisteiden seerumipitoisuuksien analysointia varten verinäyte otetaan tavallisissa putkissa, joissa on hyytymisaktivaattori koagulaatiota varten (10 minuuttia huoneenlämpötilassa). EDTA:ta ja tavallisia putkia sentrifugoidaan 15 minuuttia 4 °C:ssa. Plasma/seeruminäytteet säilytetään -20 °C:ssa tai -80 °C:ssa analyysiin asti.

TILASTOJA JA LASKELMAT Tiedot käsitellään ja esitetään standardinmukaisia ​​kuvaavia tilastoja käyttäen. Käyrän alla oleva pinta-ala (AUC) lasketaan käyttämällä puolisuunnikkaan sääntöä. Tulokset raportoidaan keskiarvona ja standardipoikkeamana (SD) ja lähtötilanteesta vähennettynä AUC:na (bsAUC). Normaalisti jakautuneita tietoja verrataan käyttämällä yksisuuntaista toistuvien mittausten varianssianalyysiä. Toistuvan mittauksen varianssianalyysiä käytetään saman osallistujan toistuvien mittausten tilastolliseen analyysiin. Tiedot, jotka eivät jakaudu normaalisti, analysoidaan ei-parametrisilla testeillä. P-arvot <0,05 katsotaan tilastollisesti merkitseviksi, eli merkitsevyystasoksi (α) 5 %. Tutkimuksen teho (1-β) on asetettu 80 %:iin, missä β (20 %) on riski hyväksyä hypoteesi, joka on väärä.

Populaatiokoko (N) on laskettu kaavalla:

N = (Za + Zb)^2 × (SD^2)/(MIREDIF^2), missä Za on taulukon arvo kaksipuolisen normaalijakauman (1.96) mukaan, Zb on taulukon arvo yhden mukaan. -puolinen standardi normaalijakauma (0,84). MIREDIF on pienin relevantti ero. SD ja MIREDIF arvioidaan sappirakon tilavuuden bsAUC-arvoiksi.

Tutkijat suunnittelevat 15 osallistujaa. Aiemmassa tutkimuksessa CCK-indusoidulla sappirakon tyhjennyksellä bsAUC (0-120) sappirakon tilavuudelle oli -1791 ml × min ja SD 795,2 ml × min. Näiden arvojen perusteella voidaan havaita 30 % ero bsAUC:ssa sappirakon tilavuudessa.